mPAGE® Lux Casting System SDS-PAGE gélekhez
Fedezze fel az mPAGE® Lux Casting Systemet, amely 3 perc alatt kész SDS-PAGE gélekhez jut. Friss SDS-PAGE gélek, amelyek akkor állnak készen, amikor szüksége van rájuk. Ha kérdése van, és szeretne többet megtudni a gyorsabb öntésről, kattintson ide az űrlap kitöltéséhez és csapatunk felveszi Önnel a kapcsolatot.
mPAGE® Lux Öntőrendszer SDS-PAGE gélekhez
Hogyan öntsön gélt SDS-PAGE gélhez? A gélöntés jellemzően a reszolváló és egymásra helyezett gélek öntését jelenti egy időigényes, lépésenkénti folyamat során. A kutatóknak hagyományosan kevés lehetőségük van a gélöntés és az elektroforézis igényeinek kielégítésére. Innovatív mPAGE® Lux SDS-PAGE gélöntő rendszerünket úgy terveztük, hogy a kézzel öntött gélek rugalmasságát és az előre öntött gélek megbízhatóságát biztosítsa, anélkül, hogy az alternatív lehetőségekkel járó minőségromlás, időveszteség vagy jelentősen magasabb költségek jelentkeznének. A mPAGE®® Lux gélöntő rendszerünkkel kevesebb mint három perc alatt elkészülnek a gélek. Búcsút mondhat a hagyományos módszereknek és az időigényes, kézzel végzett gélkészítési lépéseknek. Ez a friss.
Bővebben
mPAGE® Lux Az öntőrendszer jellemzői és előnyei
mPAGE® Lux öntőrendszer gyorsabb, egyszerűbb és biztonságosabb módszerekkel helyettesíti a gélöntési folyamatot, reprodukálhatóbb eredményekkel. Az mPAGE® Lux Casting System segítségével 90 másodperc alatt kikeményíthet egy mini gélt, szemben a hagyományos módszerekkel, amelyek több mint 90 percig tartanak. Gyors öntési munkafolyamatunk UV-sugárzással felgyorsítja az mPAGE® Lux Bis-Tris reagensek gyógyítását, míg a Bis-Tris gélkémia a hagyományos módszerekhez képest rövidebb futási időt tesz lehetővé.
A precíz rendszervezérlésű, egylépéses fotopolimerizáció és a kevesebb előkészítési lépés együttesen azt jelenti, hogy kevesebb a hibalehetőség. Az mPAGE® Casterünk megakadályozza a szivárgást, a Bis-Tris gélek használata pedig a kézzel öntött Tris-Glycine gélekhez képest kiváló sávminőséget biztosít. Ezenkívül az mPAGE® Lux Reagent Kit, az mPAGE® TurboMix Reagent Kit és az mPAGE® előregyártott gélek mindegyike Bis-Tris kémiát használ, és ugyanazokat a futtatási puffereket és gélfestékeket használja. Az mPAGE® Lux Casting System nem használ APS-t vagy TEMED-et, és biztonságosabb, kevesebb mérgező vegyszert használó megoldást kínál.
Hagyományos kézi öntési munkafolyamat
1. ábra.Hagyományos kézi öntéses munkafolyamat SDS-PAGE gélekhez infografika, amely bemutatja a hosszabb lépéseket és a 90 perc vagy annál hosszabb polimerizációs időt.
mPAGE®Lux munkafolyamat
2. ábra. Hagyományos gélöntés vs. mPAGE® Lux munkafolyamat. Az mPAGE® Lux Casting rendszer a hagyományos gélöntési technológiához képest kevesebb általános lépéssel, csökkentett polimerizációs idővel és toxikus hulladékkal rendelkezik. Az mPAGE® Lux Casting System által létrehozott gélek kompatibilisek az mPAGE® Mini-gel Tankkal és a Bio-Rad Mini-PROTEAN Cells készülékkel. A kiemelkedő felbontás és a csökkentett futási idő érdekében használja az mPAGE® puffereket. A Lux gélek kompatibilisek a Bis-Tris kompatibilis pufferekkel és festési reagensekkel.
Melyek a gélöntés lépései?
Az SDS-PAGE-gélöntés gyakran magában foglalja a mérlegelést, a géloldatok előkeverését, az öntést és a polimerizációra való várakozási időt. Bár gyakran gazdaságosabb megoldásként említik, a hagyományos kézi gélöntési módszerek időigényesek, sok kézzel végzett lépést igényelnek, ami következetlen gélkészítményeket eredményezhet. A kézzel öntött gélek minősége és az adatok, amelyek előállításához hozzájárulhatnak, a formuláció konzisztenciáján múlik, hogy az értékes reagensek és az idő végül ne vesszen kárba a gél hibáival.
3. ábra.Az adatok minőségének összehasonlítása mPAGE® Lux Bis-Tris géllel és kézzel öntött trisz-glicin géllel. Az mPAGE® Lux Bis-Tris gél (balra) sávminősége a kézzel öntött trisz-glicin géllel (jobbra) összehasonlítva. Mindkét gél 10%-os akrilamidot tartalmaz, és A431 humán sejtlizátum titrálásával töltötték meg. Az elektroforézis futási ideje 42 perc 200 V-on (Lux gél) és 119 perc 120 V-on (trisz-glicin gél). A géleket ReadyBlue™ Coomassie gélfestékkel festjük.
A mPAGE® Lux Casting System innovatív megoldást kínál a gélöntési folyamathoz. Többé nem kell választania, hogy időt vagy erőforrást takarít meg. Újszerű gélöntő rendszerünk lehetővé teszi a kutatók számára, hogy egyszerűen és gyorsan öntsék géljeiket, amikor szükségük van rájuk, az előregyártott géltechnológiák költségének töredékéért. Növelje laboratóriuma hatékonyságát, és frissítse gélelektroforézisének munkafolyamatát az mPAGE® Lux Casting System segítségével.
4. ábra. Western blotting nedves, gyors és félszáraz transzfer módszer összehasonlítása. Az összehasonlításokat 12%-os mPAGE® Lux Bis-Tris gélekkel végeztük el, amelyeket A431 humán sejtlízisből készült titrálással és különböző transzfer módszerekkel futtattunk Immobilon®-P membránokra. A membránokat anti-EGFR és anti-ErK1/2 antitestekkel blottoltuk, majd Immobilon® ECL Ultra Western HRP szubsztráttal detektáltuk. Turbó módszer = transzfer a Bio-Rad Trans-Blot® Turbo™ Transfer System és a Trans-Blot® Turbo™ Transfer Packs használatával.
5. ábra: Az mPAGE® Lux Bis-Tris gélek reprodukálhatósága. A. Négy 8%-os gélt öntöttünk és futtattunk A341 humán sejtlizátum titrálásával, majd ReadyBlue™ Coomassie gélfestékkel festettük. B. A relatív migrációs távolságot (Rf) a festetlen molekulatömeg-markerhez minden gélre kiszámítottuk. A standard eltérés minden egyes fehérje sávhoz fel van tüntetve.
6. ábra.mPAGE® Lux Bis-Tris reagensek eltarthatósági idejének elemzése. mPAGE® Lux Bis-Tris gélek, amelyeket (A) 0 hónapos, (B) 6 hónapos vagy (C) 12 hónapos reagensekkel öntöttek. A futási mintázatban vagy a futási időben nem figyelhető meg különbség.
mPAGE® Lux< Casting System és Bis-Tris reagenskészletek
Adja hozzá az mPAGE® Lux Casting System-et a laboratóriumához, és kevesebb mint 3 perc alatt kész gélekkel rendelkezhet. Vegyen egy nagy levegőt, és szokjon hozzá a gyors gélöntési folyamathoz, kevesebb hulladékkal és a hiba miatti aggodalom nélkül. Ez a friss. Az mPAGE® Lux Casting System Kittjeink az mPAGE® Lux Curing Stationből, az mPAGE® Lux keverőcsőből, az mPAGE® Lux gélkeverő tubusból, az mPAGE® Gel Caster, mPAGE® Comb 10 és 15 lyukkal, mPAGE® Mini Spacer Plate, mPAGE® Lux Masked Short Plates 10 és 15 lyukkal. A 0,75 mm vastagságú mPAGE® Lux öntőrendszerhez a 15 lyukú fésű és a maszkolt rövid lemezek nem tartoznak a csomagba. A készletleírások és konfigurációk a következők:
7. ábra.mPAGE® Lux pácolóállomás
A mPAGE® Lux Bis-Tris Reagens Kit egy speciális reagenskészlet az mPAGE® Lux Casting Systemhez. Az mPAGE® Lux Bis-Tris Reagens Kit 3 komponensből áll: Resolving Solution (oldóoldat), Diluent (hígítószer) és Stacking Solution (halmazoldat). A készlet támogatja a különböző 8,0-13,5% közötti akrilamid gélek használatát. mPAGE® Lux Reagent Kit leírása és konfigurációja az alábbi:
mPAGE® L<ux SDS-PAGE gélöntési protokoll
Minden oldatot védeni kell a napfénytől a polimerizáció megelőzése érdekében. A gélek öntése előtt minden oldatot szobahőmérsékletre kell hozni.
Rezolváló gél
- A rezolváló gél oldatot a rezolváló oldat és a hígító keverésével készítse el. A keverési mennyiségeket lásd az alábbi táblázatban. A feloldó géloldat nagy tételben is elkészíthető, hogy egymás után több gélt készítsen.
- Tiszta pipetta segítségével adjon feloldó oldatot egy fekete keverőcsőbe vagy más átlátszatlan tartályba.
- Tiszta pipetta segítségével adjon hígítószert ugyanabba a keverőcsőbe.
- Keverje össze a tartály óvatos, végét végére fordítva. Ne keverje fel.
Az oldó géloldat térfogatai
Az alábbi térfogatokat használja egyetlen 1,0 mm-es gél elkészítéséhez. A 0,75 mm-es és 1,5 mm-es oldatmennyiségekhez lásd a SigmaAldrich.com termékoldalon elérhető teljes használati útmutatót.
Stacking Gel
A Stacking Solution közvetlenül a flakonból használható. Használjon 1,5 ml Stacking Solutiont 1,0 mm-es gélhez. Fontos: Ne hígítsa a Stacking Solutiont.
Gélöntés
- Tisztítsa meg az üveglapokat enyhe tisztítószerrel, és öblítse le DI vízzel. Használat előtt törölje át 70%-os etanollal.
- Az mPAGE® gélöntőlemezt az mPAGE® távtartó lemez és az mPAGE® Lux maszkolt rövid lemez segítségével állítsa össze üvegkazettává. A maszkolt rövid lemezt úgy kell tájolni, hogy a kazetta bal oldalán legyen a szöveg. Győződjön meg róla, hogy mindkét üveglap a görgőkeret alján van, mielőtt bezárja a görgőkapcsokat. Megjegyzés: Az mPAGE® Lux maszkolt rövid lemezt az mPAGE® pácolóállomással együtt kell használni.
- A bekapcsoló gomb megnyomásával kapcsolja be az mPAGE® Lux pácolóállomást. A pácolóállomás önellenőrzést indít. Az önellenőrzés befejezése után megjelenik a készenléti képernyő.
- Nyissa ki az ajtót, és helyezze a gélgörgőt a Curing Stationbe, a görgőt az ütközők mögé igazítva.
- Egy tiszta 5 ml-es pipetta segítségével adagolja az elkészített Resolving Gel Solution oldatot az mPAGE® gélgörgő keretén lévő jelzett töltésvonalig.
- Tiszta 5 mL pipettát használva, lassan adjon Stacking Solution oldatot a rövid lemez tetejéig.
- A mPAGE® fésűt lassan, ferdén helyezze be, hogy megakadályozza a fogak alatti légbuborékképződést. Fontos: A különböző kútformátumok keverése nem megfelelő kútképzést eredményezhet. Használja:
- 10 lyukú fésűk 10 lyukú mPAGE® Lux maszkolt rövid lemezekkel
- 15 lyukú fésűk 15 lyukú mPAGE® 15 lyukú mPAGE®< Lux Masked Short Plates
- Törölje le a rövid lemez elejéről a kiömlött oldatot, hogy megakadályozza a nem teljes gyógyulást ott, ahol kiömlött oldat van.
- Zárja be a pácolóállomás ajtaját, és válassza ki a gélvastagságot.
- Nyomja meg a Start gombot a gél pácolásának megkezdéséhez. Tipp: Több gél öntése esetén kezdje meg a gélöntési folyamatot a második gélöntővel most, amíg az első gél gyógyul.
- A gyógyítás befejezése után nyissa ki az ajtót, és vegye ki a gélöntőgörgőt. Vegye ki a kazettát a Gel Casterből a feszítőkapocs leengedésével, hogy az öntőkeret kioldódjon. Ezután nyissa ki a keret oldalait, és csúsztassa ki a kazettát a tetejéről.
- A gélt azonnal használja fel, vagy tekerje a kazettát nedves papírtörlőbe, és tárolja laposan fekve egy cipzáras zacskóban vagy más légmentesen záródó edényben 2-8 °C-on legfeljebb 2 hétig. Ne hagyja a kazettákat becsomagolatlanul, mert a gél kiszárad.
Hogyan távolítsa el a gélt az elektroforézis után
A gélt egy gélkaparó segítségével távolítsa el az üvegkazettáról. A gélszélek mentén vágja le (jobbra), hogy elkerülje a gél beszakadását. mPAGE® Lux Bis-Tris gélek CSAK MOPS-SDS vagy MES-SDS futópufferrel használhatók. A Bis-Tris gélek NEM kompatibilisek a Tris-Glicin futópufferrel.
Fenntartható gélöntés mPAGE® Lux gélöntő rendszerrel./h2>
Az mPAGE® Lux Casting System által kifejtett fenntartható hatások számszerűsítése érdekében számításokat végeztünk egy reprezentatív gyors öntőkészlet használatával szemben a fehérjeelektroforézishez használt poliakrilamid gélek kézi öntéséhez. Mindkét rendszer újrafelhasználható öntőkészletek és kézi öntő reagenskészletek használatát igényli. Az mPAGE® Lux Casting System ezen felül az mPAGE® Lux Gel Curing Station használatát is megköveteli, míg az alaprendszerhez APS & TEMED használata szükséges, amelyek a kézi öntő reagens-készlettől külön megvásárolhatók.
Ez az értékelés az mPAGE® Lux Curing Station minimális élettartama alatt, azaz 5 év alatt az elektroforézis gélek öntéséhez szükséges összes alkatrészt figyelembe veszi. Ez magában foglalja a kézi gélöntő készlet, a szükséges reagensek és az összes szükséges fogyó laboratóriumi eszköz gyártását, csomagolását, forgalmazását, használatát és élettartamának végét. A számításokat évi 250, 500 vagy 1000 gél előállítását feltételezve végeztük el, és az alaprendszerhez képest a minimális különbséget állítottuk.
Az anyag- és termékfenntarthatósági jellemzők
Az mPAGE® Lux Casting System ugyan innovatív munkafolyamat-megoldás a poliakrilamid gélek kézi öntéséhez, mégis igényel némi műanyag fogyóanyagot és veszélyes reagenseket. Bár az akrilamidnak nincs megfelelő helyettesítője ebben az alkalmazásban, az összes fennmaradó vegyi veszélyt kiküszöböltük ebből a rendszerből, és a szükséges műanyag fogyóeszközök mennyisége jelentősen csökkent az alaprendszerhez képest.
Az mPAGE® Lux Casting System által igényelt gélkeményítő állomás többlettömegét ellensúlyozza a gélöntési munkafolyamathoz szükséges termékek számának csökkenése, amint az a grafikonon látható. Az eszköz teljes élettartama alatt a rendszer teljes tömege legalább 20 %-kal csökken a gyors öntőrendszerekhez képest.
A rendszer élettartamának tömege (kg) 500 gél/év öntése esetén:
5. ábra.A rendszer élettartamára vonatkozó tömeg (kg) összehasonlítása 500 gél/év öntése esetén az mPAGE® Lux Casting rendszer és a referencia termékrendszer esetében. Sötétkék = referencia termékrendszer. Világoskék = mPAGE® Lux Casting rendszer.
Ez a termék ráadásul követi a SMASH Packaging alapelveit, a stratégiánkat, amely a csomagolás fenntarthatóságának javítására törekszik a kevesebb csomagolás, a fenntarthatóbb anyagok és a könnyebb újrahasznosítás révén.
- A termékek és a funkcionális egységhez szükséges további elemek csomagolása 30%-kal csökken az alaprendszerhez képest.
- A rendszer rostalapú csomagolásainak 100%-a fenntartható erdészeti tanúsítvánnyal rendelkezik.
- Minden védőhabbetét 100%-ban újrahasznosított polietilénből készült.
- A csomagolás nem tartalmaz olyan anyagokat, amelyek a SMASH-irányelveinkben meghatározottak szerint gátolják az újrahasznosítást.
mPAGE® Lux Casting System forgalmazása és termékfelhasználás
A szükséges fogyóeszközök csökkentése és bizonyos reagensek elhagyása a szállítással kapcsolatos hatások jelentős csökkenését eredményezi. A rendszeresen szállított alkatrészek és a kapcsolódó csomagolás tömegének csökkenése legalább 24%-os a műszer minimális élettartama alatt.
Míg a hozzáadott műszer működés közben energiát igényel, az mPAGE® Lux Casting Stationt az energiahatékonyság szem előtt tartásával tervezték. A LED-világítás és az egyszerű, de intuitív felhasználói felület használatával az általános energiafogyasztás figyelemre méltóan alacsony marad. Az 1000 gél kikeményítéséhez szükséges összesített energiafogyasztás mindössze 1,65 kWh, ami körülbelül 33 óra laptop-használatnak felel meg. A gélöntési munkafolyamat során keletkező egyszer használatos műanyaghulladék mennyisége legalább 25%-kal csökken. Ezenkívül az mPAGE® Lux reagensek a környezeti megvilágítás hatására önpolimerizálódnak, így a hulladékáramba kerülő, nem polimerizált akrilamidmaradványok megszűnnek.
Azáltal, hogy szükség szerint friss, használatra kész géleket öntünk, megszűnik annak kockázata, hogy a géleket előzetesen előkészítsük, amelyek felhasználatlanul maradnak. Az mPAGE® Lux System segítségével nincs szükség reagens-készletek készletezésére vagy különböző százalékos arányban előre öntött gélek készletezésére, ami csökkenti az összetevők lejárta miatt keletkező hulladék mennyiségét. Az mPAGE® Lux pácolóállomás elektronikus berendezés, és mint ilyen, az összes vonatkozó előírásnak megfelelően kell ártalmatlanítani. Az elektronikus hulladékok ártalmatlanításával kapcsolatos további információkért látogasson el WEEE-megfelelőség oldalunkra.
Ez a termék a termék teljes életciklusa során jelentős javulást mutatott az alaprendszerhez képest, és Zöldebb Alternatív Terméknek minősült. További információért látogasson el a Design for Sustainability keretrendszerünkről és a zöldebb alternatív termékekről szóló oldalunkra.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?