Gélelektroforézis mPAGE^® gélekkel

mPAGE^® bis-tris előregyártott gélek biztosítják a publikációkész eredményekhez szükséges nagy felbontást, anélkül, hogy a költségvetést megrongálnák. Ez a megfizethető árú megoldás rövidebb futási idővel (akár 15 perc) azonos fehérje-szeparációt ér el, és kompatibilis a legtöbb elektroforézis-tartállyal. Váltson még ma az mPAGE^® előregyártott gélekre, hogy anélkül spóroljon, hogy feláldozná azt, amire a leginkább szüksége van. 

• Publikációs felbontás a költségek töredékéért
• Kompatibilis a népszerű elektroforézis-tartályokkal
• Mintánként akár 80 μl minta (10 lyukú gélek esetén)
• Hatékony nedves és félszáraz Western blot transzfer
• Még 15 perccel rövidebb futási idő
• Semleges pH megakadályozza a fehérjék módosulását

• Proteinszétválasztás és membrán-transzfer mPAGE-vel^® előregyártott gélekkel
• How to Select mPAGE<sup>® Precast Gels
• mPAGE^® gélek kereszthivatkozási útmutatója
• Beszerzési információk: mPAGE^® gélek, pufferek és tartozékok

Proteinszeparáció és membrán transzfer a mPAGE^® előregyártott gélekkel

A poliakrilamid gélelektroforézis (PAGE) egy mindenütt elterjedt technika, amelyet a fehérjék elektroforetikus mobilitás általi elválasztására használnak. Míg a fehérjék natív (vagy összehajtott) állapotukban is elválaszthatók natív-PAGE segítségével, addig a fehérjéket az elválasztás előtt általában kémiai úton denaturálják (vagy kibontják) nátrium-dodecil-szulfát (SDS) és redukálószer, például ditiotreitol (DTT) segítségével. Az SDS PAGE géleket a fehérjék molekulatömegük alapján történő elválasztására használják, a mintákat ismert molekulatömegű fehérjéket tartalmazó standardokkal (létrákkal) összehasonlítva.

A szétválasztás

A gélelektroforézis futási ideje a géltől és a futási körülményektől függően változó. Az mPAGE^® bis-tris előregyártott gélekről bebizonyosodott, hogy rövidebb futási idővel rendelkeznek (akár 15 percig), mint a piacon kapható hasonló előregyártott gélek (1. ábra), anélkül, hogy a felbontás csökkenne - ezzel időt és pénzt takaríthat meg.

Competitor T
50 perces üzemidő

mPAGE^® előregyártott gél
  35 perces futási idő

1. ábra A fehérjék elválasztása MOPS futópufferrel az mPAGE^® Bis-Tris precast gél (4-12%) és egy konkurens precast bis-tris gél összehasonlítása. Minták: festetlen fehérjemarker és E.coli kivonat sorozatos hígítása.

Transzfer membránokra

Az elválasztás után a fehérjéket egy membránra viszik át, jellemzően Western blotting (immunoblotting) vagy más kimutatási technikához. A Western blotting protokollokban a fehérjéket leggyakrabban elektroforetikusan viszik át, vagy nedves (tartályos), vagy félszáraz transzfer módszerrel. Az mPAGE^® bis-tris előregyártott gélek hatékony fehérjetranszfert biztosítanak mind a nedves, mind a félszáraz transzferhez (2. ábra).

Nedves átvitel

Félszáraz transzfer

2. ábra. Az A431-sejtek lizátumának sorozatos hígításai mPAGE^® 4-12%-os gélre töltve és Immobilon^®-P membránra átvinni a standard módszerekkel. A blotokat EGFR (180 kDa), AKT1 (60 kDa) és hiszton (17 kDa) elleni antitestekkel szondáztuk. Az antitesteket peroxidáz-konjugált másodlagos antitestekkel és Immobilon^® Forte kemilumineszcens szubsztráttal detektáltuk.

How to select mPAGE.sup>® precast gélek

Az SDS-PAGE-hez használt precast gélek kiválasztása az elválasztandó fehérjék mérete alapján történik. Az előregyártott gélek különböző fix akrilamid százalékos arányban, vagy gradiensben kaphatók, ahol a százalékos arány a gélben változik. Általában az alacsonyabb százalékos géleket a nagy molekulatömegű fehérjék felbontására, a magas százalékos géleket pedig az alacsony molekulatömegű fehérjék felbontására használják. A gradiens gélekkel szélesebb fehérjetartományokat lehet elválasztani, mint a fix százalékos gélekkel. A MOPS vagy MES futópuffer kiválasztásával tovább lehet hangolni az elválasztást. A MOPS jobb elválasztást biztosíthat a gél magasabb tartományában, a MES pedig javíthatja az elválasztást a gél alacsonyabb tartományában. Használja a MOPS (3. ábra) és a MES puffer (4. ábra) migrációs táblázatokat az elektroforézis alkalmazásához legmegfelelőbb mPAGE^® gél és puffer kiválasztásához.

3. ábra. Migrációs diagram az mPAGE^® előregyártott gélekhez Tris-MOPS SDS futópuffer használatával

4. ábra. Migrációs diagram mPAGE^® előregyártott gélekhez MES SDS futópuffer használatával

mPAGE^® gélek keresztreferencia útmutatója<

Az mPAGE^® gélek kereszthivatkozási dokumentumunk ajánlásokat tartalmaz a tipikus TruPAGE™ termékek helyettesítését kereső ügyfelek számára.

TruPAGE™ Mini gélek (10 x 10 cm és 10 x 8 cm-es formátumban)
leírás	Termékszám.		Megnevezés	Mélyedés térfogata (µL)	Menny/Pk	Termékszám.
TruPAGE™ Precast Gels 10%, 10x10, 12 lyuk**<<	PCG2001		mPAGE®	mPAGE®, Bis-Tris, 10x8, 10%, 12 lyuk	60	10	MP10W12
mPAGE®<, Bis-Tris, 10x8, 8%, 12 lyuk	60		10	<>	MP8W12
TruPAGE™ Előregyártott gélek 10%, 10x10, 17 lyuk**	PCG2005		mPAGE®, Bis-Tris, 10x8, 10%, 15 lyuk	40		MP10W15
			mPAGE®, Bis-Tris, 10x8, 8%, 15 lyuk	40	10	MP8W15
TruPAGE™ Előregyártott gélek 10%, 10x8, 12 lyukú**	PCG2009			mPAGE®, Bis-Tris, 10x8, 10%, 12 lyukú	60	10	MP10W12
mPAGE®, Bis-Tris, 10x8, 8%, 12 lyuk	60		10	MP8W12
TruPAGE™ Előregyártott gélek 10%, 10x8, 17 lyuk	PCG2013		mPAGE®, Bis-Tris, 10x8, 10%, 15 lyuk		40	10		MP10W15
mPAGE
mPAGE®, Bis-Tris, 10x8, 8%, 15 lyuk	40		10	10	MP8W15
TruPAGE™ Előregyártott gélek 12%, 10x10, 12 lyukú**	PCG2002		mPAGE	60	10		MP12W12
TruPAGE™ Előregyártott gélek 12%, 10x10, 17 lyukú**	PCG2006		mPAGE	40	10	MP12W15
TruPAGE™ Előregyártott gélek 12%, 10x8, 12 lyukú	PCG2010		mPAGE	60	10		td>MP12W12
TruPAGE™ Előregyártott gélek 12%, 10x8, 17 lyuk	PCG2014	mPAGE®, Bis-Tris, 10x8, 12%, 15 lyuk	40	10		MP12W15
TruPAGE™. Előregyártott gélek 4-12%, 10x10, 12 lyuk**		PCG2003	mPAGE®, Bis-Tris, 10x8, 4-12%, 12 lyuk	60	10		MP41G12
TruPAGE™ Előregyártott gélek 4-12%, 10x10, 17 lyukú**	PCG2007	mPAGE	40	10	MP41G15
TruPAGE™ Előregyártott gélek 4-12%, 10x8, 12 lyukú	PCG2011	mPAGE	60	10	MP41G12
TruPAGE™ Előregyártott gélek 4-12%, 10x8, 17 lyuk	PCG2015	mPAGE	40	10		MP41G15
TruPAGE™ Előregyártott gélek 4-20%, 10x10, 12 lyukú**	PCG2004	mPAGE	60	10	MP42G12
TruPAGE™ Előregyártott gélek 4-20%, 10x10, 17 lyukú**	PCG2008	mPAGE	80	10	MP12W12
TruPAGE™ Előregyártott gélek 4-20%, 10x8, 12 lyukú	PCG2012	mPAGE	40	10	MP42G15
TruPAGE™ Előregyártott gélek 4-20%, 10x8, 17 lyukú	PCG2016	mPAGE	80	10	MP12W12
TruPAGE™ Előregyártott gélek 4-8%, 10x10, 12 lyukú**	PCG2017	mPAGE	60	10	MP8W12
TruPAGE™ Előregyártott gélek 4-8%, 10x8, 12 lyuk	PCG2019	mPAGE®, Bis-Tris, 10x8, 8%, 12 lyuk	60	10