Sejtszeparációs médiumok kutatási, diagnosztikai és gyógyszeripari alkalmazásokhoz

Bővebben

CELL SEPARATION WITH ACCUSPIN™ SYSTEM-HISTOPAQUE^® MEDIA

A népszerű ACCUSPIN™ System with Histopaque^®-1077 rendszerben sugárfertőtlenített centrifugacsöveket használnak, amelyeket úgy terveztek, hogy két különálló kamrát hozzanak létre porózus, nagy sűrűségű polietilén gátlóval ("frit"). Ez a rendszer lehetővé teszi az antikoagulált teljes vér hozzáadását a felső kamrába anélkül, hogy az alsó kamrában lévő Histopaque^® elválasztó közeggel keveredne. A Histopaque^® sűrűségű közeg lehetővé teszi a limfociták és a mononukleáris sejtek (azaz a monociták) egyértelmű elkülönítését. Az eritrociták aggregálódnak és a granulociták enyhén hipertonossá válnak, ami növeli szedimentációs sebességüket, ami az ACCUSPIN™ cső alján pelletálódást eredményez. Az elválasztási folyamat befejezése után az izolált sejtek tovább jellemezhetők, tenyészthetők, elemezhetők, vagy felhasználhatók olyan downstream alkalmazásokban, mint az áramlási citometria, sejtalapú vizsgálatok, molekuláris analízis, gyógyszeripari vagy sejtterápiás fejlesztés.

HISTOPAQUE^® JÓDIÁLT GRÁDIÁLT MÉDIA

A Histopaque^® médiumot a különböző sejttípusok sűrűségük alapján történő elkülönítésére tervezték, és a gyógyszerészeti és orvosbiológiai kutatásokban általában specifikus sejtpopulációk izolálására és tisztítására használják. A Histopaque^® médiumok poliszukróz és nátrium-diatrizoát steril-szűrt, endotoxin-tesztelt oldatai, amelyeket pontos sűrűségre állítanak be. Ezek a használatra kész elválasztó közegek megkönnyítik az életképes sejtek gyors és optimális kinyerését kis mennyiségű teljes vérből. A Histopaque^® elválasztó közegeket jellemzően az alábbi alkalmazásokban használják: Perifériás vér mononukleáris sejtek (PBMC) izolálása: A Histopaque^® médiumokat gyakran alkalmazzák PBMC-k izolálására teljes vérmintákból. A PBMC-k limfocitákból, monocitákból és egyéb sejtmagvú sejtekből állnak. A Histopaque^® közegnek a vérminta és egy centrifugacső közé történő rétegezésével a centrifugálás hatására a PBMC-k elkülönülnek a vér egyéb összetevőitől, például a vörösvértestektől és a vérlemezkéktől. Sejtfrakcionálás: A Histopaque^® táptalaj arra használható, hogy a kevert sejtpopulációkat sűrűségük alapján különböző rétegekre frakcionáljuk. Az elválasztó közeg centrifugacsőben történő rétegezésével és a sejtszuszpenzió óvatos hozzáadásával a centrifugálás hatására különböző sejttípusokat képviselő, elkülönülő rétegek alakulnak ki. Ez a technika hasznos a sejtek elválasztására és tisztítására további elemzés vagy kísérletezés céljából. Speciális sejttípusok izolálása: A Histopaque^® szeparációs közegek felhasználhatók specifikus sejtpopulációk izolálására azok sűrűsége vagy specifikus markerei alapján. A szeparációs közeg és a sejtszuszpenzió gondos rétegezésével a centrifugálás elválasztja az érdeklődésre számot tartó sejteket a nem kívánt sejtektől. Ez a technika különösen értékes a specifikus sejttípusokat vizsgáló vagy ritka sejtpopulációkat dúsítani kívánó kutatók számára. Az ISO  9001 minőségirányítás alatt gyártott, tétel-specifikus teljesítményvizsgálattal rendelkező Histopaque^® termékek következetesen szelektív vérsejtvonalak elválasztását, az életképes, torzítatlan sejtek optimális elválasztását és minimális idegen sejtinterferenciát biztosítanak.

PERCOLL^® KOLLOIDÁLIS SZILIKA MÉDIÁK

A kolloid szilika médiumok 15-30 nm átmérőjű, polyvinilpirrolidonnal (PVP) bevont szilika részecskék kolloid szuszpenziói, amelyeket jellemzően az orvosbiológiai és gyógyszerészeti kutatásokban használnak sejtek elválasztására és tisztítására. A PVP csökkenti a részecskék biológiai anyaggal való kölcsönhatásait, és stabilizálja a kolloidot izotóniás sóoldatban. Sűrűsége a Percoll^® oldat koncentrációjának változtatásával állítható, így a kutatók a gradienst a sajátos elválasztási igényeikhez igazíthatják. Percoll^® kolloid közegünk rendkívül alacsony ozmotikus erővel rendelkezik, amely a sűrűséggel alig változik. Emellett a centrifugálással kialakított gradiensek ozmolalitása könnyen beállítható megfelelő mennyiségű szacharóz vagy pufferoldat hozzáadásával. A Percoll^® gradiensek ideálisak sejtek, organellák, membránvezikulák, sőt egyes vírusok izopiknikus elválasztására.

IONOS SÓK

Az ionos gradiens közegeket, más néven ionos gradienseket vagy ionos oldatokat a sejtelválasztási technikákban a sejtek felületi töltésük vagy elektromos tulajdonságaik alapján történő elválasztására használják. Ezek a közegek elektrosztatikus mezőt vagy töltéskülönbséget hoznak létre, ami lehetővé teszi a különböző felületi töltéssel rendelkező sejtek elválasztását. Az ionos gradiens közegeket alkalmazó sejtelválasztási technikák közé tartozik például az elektroforézis, a dielektroforézis (DEP) és az izoelektromos fókuszálás (IEF). A hordozó és a technika konkrét kiválasztása az elválasztandó sejtek jellegétől, a kívánt elválasztási mechanizmustól és az általános kísérleti céloktól függ. A koncentrált nehézfémsókból álló ionos gradiens közegeinket kizárólag nukleinsavak izopiknikus elválasztására használjuk. A cézium-klorid és a cézium-szulfát a legszélesebb körben használt nehézfémsók, amelyek gradiens sűrűsége akár 1,91 g/cm³ is lehet. Más használt sók közé tartozik a nátrium-jodid, a nátrium-bromid és a rubídiumsók. Az ionos gradiens közegek és technikák kiválasztása és megtervezése olyan tényezők gondos figyelembevételét igényli, mint a pH, a vezetőképesség, a puffer összetétele és a vizsgált sejtek elektromos tulajdonságai.

NONIONOS JÓDOS SÖTÉTSÉGGARADIENTES KÖZEGEK

A nemionos jódos sűrűséggradiens közegek olyan speciális anyagok, amelyeket elválasztási és tisztítási technikákhoz használnak különböző területeken, beleértve a biológiát, biokémiát és klinikai diagnosztikát. Ezek a közegek jellemzően jódozott vegyületeken alapulnak, amelyek sűrűséggradienst képeznek, lehetővé téve a részecskék sűrűségük alapján történő elválasztását. A nemionos jódozott sűrűséggradiens közegek a sűrűséggradiens centrifugálás elvén működnek. A népszerű sűrűséggradiens médiumokban használt legtöbb jódozott vegyület szerkezete olyan jódozott vegyületeken alapul, mint a tri-jódbenzoesav, amelyekhez hidrofil csoportot csatoltak az oldhatóságuk növelése érdekében, hogy vizes oldatban folyamatos sűrűséggradienst képezzenek. Mi sűrűbb iohexol-oldatokat (pl. Nycodenz^® és Histodenz™) biztosítunk, amelyek minimalizálják a biológiai részecskék dehidratálódását. Az iohexol nem mérgező, és az emlőssejtek nem metabolizálják.

POLÍRSZERES ALKOHOLOK

A polihidrikus alkoholok nem ionos gradiens közegeit tartalmazó portfóliónkban szacharóz gradiensek találhatók, amelyeket széles körben használnak makromolekulák sebesség-zónás elválasztására, valamint vírusok és sejtorganellák izopiknikus elválasztására. Előnyeik közé tartozik stabil jellegük, inertitásuk és alacsony költségük; hátrányuk viszont az oldat koncentrált és hipertonikus jellege. Glicerinoldatot is kínálunk, amely kisebb sűrűségű, mint a megfelelő szacharózoldatok, ezáltal megakadályozza bizonyos enzimek aktivitását, miközben vákuummal könnyen eltávolítható.

POLISZAKARIDOK

A szacharózoldatok használatakor felmerülő magas ozmotikus erősségű problémák megkerülésére a leggyakrabban használt poliszacharid közeget, a Ficoll^®-t kínáljuk. A Ficoll^® szintetikus polimerek polivinilpirrolidon bevonatú poli(etilénglikol) (PEG), amelyet általában sűrűséggradiens oldatok készítésére használnak. A Ficoll^® oldatokat széles körben használják különböző biológiai és biokémiai alkalmazásokban, különösen sejtek elválasztására és izolálására. Ez Az oldatot szacharózmolekulák epiklórhidrinnel történő polimerizációjával állítják elő, hogy egy 400 000 átlagos molekulatömegű poliszacharidot kapjanak. A 20% alatti (w/v) Ficoll^® oldatok sűrűsége 1,07 g/cm3 és ozmotikusan inertnek tekinthetők. A Ficoll^® oldat fő hátránya abban rejlik, hogy viszkózusabb, mint a hasonló szacharózoldatok. A Ficoll^® oldatok jelentős szerepet játszanak a különböző gyógyszeripari kutatási és fejlesztési folyamatokban, megkönnyítve a sejtek, vírusok és más biológiai összetevők izolálását, tisztítását és jellemzését, ezáltal hozzájárulva a gyógyszerkutatás, az immunterápia és más gyógyszeripari alkalmazások fejlődéséhez. Általánosan alkalmazzák őket a sejtelválasztási technikákban, különösen a mononukleáris sejtek perifériás vérből vagy más sejtforrásokból történő izolálására. A sejtszuszpenzió Ficoll^® sűrűséggradiensre történő rétegzésével és centrifugálással az érdeklődésre számot tartó sejtek, például limfociták vagy monociták, elválaszthatók más sejttípusoktól és nem kívánt összetevőktől, például vörösvértestektől és granulocitáktól. A Ficoll^® oldatokat sűrűséggradiens centrifugálásban is használják, amely olyan technika, amely a részecskéket vagy molekulákat a felhajtóerő sűrűségük alapján választja szét. A centrifugálás során a részecskék vagy sejtek a Ficoll^® gradiensben vándorolnak, és a megfelelő sűrűségüknek megfelelő pozíciókban telepednek le. Ez lehetővé teszi a heterogén keverékben jelen lévő különböző komponensek elválasztását és frakcionálását.