Cytológia és citodiagnosztika
A citológia a sejtek szerkezetének és működésének tanulmányozása, míg a citodiagnosztika a citológia diagnosztikai eszközként való alkalmazása. A citodiagnosztika jól bevált, rendkívül specifikus festékekre és protokollokra támaszkodik, hogy megkönnyítse a sejtek rendellenességeinek mikroszkópos azonosítását. A humán citodiagnosztikában a citológiának két területe van (nőgyógyászati és nem nőgyógyászati), amelyekben a mintákat rosszindulatú és rosszindulatú sejtek jelenlétére vizsgálják.
Kapcsolódó műszaki cikkek
- Study tumor metastasis via various migration and invasion assays like Boyden chamber assay, Millicell® µ-Migration Assay, and scratch assay.
- Celluláris apoptózis vizsgálatok a programozott sejthalál kimutatására Annexin V, kaszpáz és TUNEL DNS-fragmentációs vizsgálatok segítségével.
- For good cell attachment the hydrophobic polystyrene surface must be modified to a more hydrophilic surface. This allows cell attachment proteins (vitronectin and fibronectin) found in the serum containing culture medium to adhere and spread on the vessel bottom providing a better surface for cells to attach
- For microbiologists the most fundamental stain was developed in 1884 by the Danish bacteriologist Hans Christian Gram.
- Overview of primary cells and media usage in biomedical culture applications highlights differences from cell lines.
- Mindent látni (9)
Kapcsolódó protokollok
- Assay protocol for the colorimetric detection of Hydroxyproline in biological samples using the Hydroxypoline assay kit.
- A Percoll-gradiens elkészítéséhez a Percoll ozmolalitását sóoldattal vagy sejttenyésztő közeggel kell beállítani, hogy a Percoll izotóniás legyen a fiziológiás sóoldatokkal.
- Trypsin is commonly used for dissociating adherent cells from surfaces. A wide variety of trypsin solutions are available to meet your specific cell line requirements.
- Cell culture protocol for passaging and splitting adherent cell lines using trypsin EDTA. Free ECACC handbook download.
- Mindent látni (7)
További cikkek és protokollok keresése
Citológiai mintavétel
A citodiagnosztikában a sejteket a szövettömegből vagy a mintafolyadékból nyerik ki, és citológiai tárgylemezre viszik át, megfestik, megvizsgálják és értékelik. Az eredeti szövet felépítése felismerhetetlenné válik, és nem segítheti az értékelési folyamatot. Az olyan mintaanyagokat, mint a köpet, a vizelet, a testüregek váladékai és a lavage-anyag, centrifugálják, majd az üledéket mikroszkópos tárgylemezre kenik. Az emlőből, pajzsmirigyből, nyirokcsomókból, prosztatából, agy-gerincvelői folyadékból és más helyekről származó képi asszipációs biopszia (FNAB) anyagát gondosan felkenik a tárgylemezre. A festési módszertől függően a felkent mintákat vagy azonnal fixálják (Papanicolaou-festés), vagy a hematológiai vagy bármely más festés előtt alaposan megszárítják levegőn.
Fixálás a citológiához
.
A pontos citológiai diagnózis előfeltétele a mintaanyag tökéletes rögzítése. A mintákat a gyűjtés után azonnal rögzíteni kell, hogy a sejtek ne száradjanak ki és ne zsugorodjanak össze. Az azonnali rögzítés megőrzi a minta szerkezeti jellemzőit az egyértelmű festés és differenciálás érdekében. A túl későn rögzített minták esetében a festési műtermékek zavarhatják a diagnózist. A rögzítés klasszikus módszere az, hogy a tárgylemezt 30 percre 96%-os etanolba mártjuk. Hatékonyabb módszer a sejtek rögzítése spray-fixálószerrel. A spray-fixálószerek polietilénglikolt (PEG) tartalmazó vizes-alkoholos oldatok. Alkalmasak a Papanicolaou-módszerrel festett citológiai anyagok minden típusához.
Cytodiagnosis festési módszerek
A festék kiválasztása nagymértékben függ a minta eredetétől, valamint a vizsgáló tapasztalatától és preferenciáitól. A Papanicolaou-festési technikát például nemcsak nőgyógyászati kenetek, például PAP kenetek esetében használják, hanem rutinszerűen alkalmazzák a nem nőgyógyászati anyagok, például köpet, agy-gerincvelői folyadék, ízületi folyadék és vizelet esetében is. A Giemsa-festést széles körben használják a nyirokcsomókból vett FNAB-mintákhoz. A Pappenheim-festést vizeletüledékek, folyadékgyülemek, hörgőlavage-anyagok és különböző helyekről (pl. emlő, pajzsmirigy, agy-gerincvelői folyadék) származó FNAB-anyagok esetében használják. A Wright-festés egy hematológiai festék, amely a vérsejttípusok megkülönböztetésére használható. A festett sejteket a mikroszkópiához a szokásos alkohol/xilén dehidratálás, tisztítás és montírozás segítségével készítik elő. A kézi festési módszerek mellett mechanikus és automatizált festési rendszerek is használhatók nagyszámú minta előkészítéséhez. Ezután egy teljesen automatizált kiértékelő rendszer használható szűrésre, amelyben a festett mintákat kiértékelik, az abnormális sejteket vagy sejtcsoportokat megjelölik, és a képeket egy galériába mentik a visszakeresés és a további vizsgálat céljából.
Cytodiagnosztikai értelmezés
Az anyag mikroszkópos vizsgálata az alkalmazott fixálási, előkészítési és festési technikáktól függően azonnal elvégezhető. Ez a tulajdonság teszi alkalmassá a citodiagnosztikát nagy volumenű szűrésekhez, például méhnyakszűrésekhez. A citodiagnosztika egyik kritikus pontja, hogy a citológiai vizsgálatok eredményei közvetlenül ahhoz a helyhez kapcsolódnak, ahonnan a mintát vették. A hatékonyság érdekében a mintavételi és előkészítési technikákat alaposan el kell sajátítani és ellenőrizni kell. Minden egyes alkalmazásnál megfelelő ellenőrzéseket kell alkalmazni a téves eredmény elkerülése érdekében."
A diagnosztikus citológia sikerét és hatékonyságát azon a képességén mérik, hogy képes-e a betegség korai állapotváltozásainak kimutatására (érzékenység), és ezzel egyidejűleg a téves pozitív diagnózisok megelőzésére (specificitás). Az érzékenység és a specificitás a megfelelő mintavételen, fixáláson, festésen és értelmezésen alapul. Az olyan képalkotó eljárások mellett, mint a röntgenképalkotás, a komputertomográfia (CT), az ultrahang, a nukleáris spin tomográfia és a pozitronemissziós tomográfia (PET); a citológia a diagnózis elengedhetetlen része.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?