Ugrás a tartalomra
Merck
KezdőlapProductsAnalitikai kémiaAnalitikai kromatográfiaHPLC pufferek

HPLC pufferek

Halom puffer só kristályok

A pufferek egy gyenge sav és konjugált bázisának, vagy egy gyenge bázis és konjugált savának oldatai. Az analitikai kémiában a puffereket általában a fordított fázisú nagy teljesítményű folyadékkromatográfiában (RP-HPLC) használják, amikor a minta savas vagy bázikus funkciós csoportokat tartalmaz. A pufferek mérséklik a hidrogén/hidrónia és a hidroxidionok hatását, ezáltal csökkentik a pH-ingadozást.   

  • Mobilfázis-pufferek
  • <.a href="#Factors-to-be-Considered-While-Choosing-a-HPLC-Buffer">Factors to be Considered-While-Choosing-a-HPLC-Buffer

Kapcsolódó források

  • Brochure: LC-MS Resource Guide

    A Comprehensive Portfolio for Consistent Results in Routine and Advanced LC-MS applications

  • HPLC módszerátviteli számológép

    Könnyen átviheti a módszert a HPLC-oszlopok között (skálázás a mikrofurat és a preparatív tartomány között), a 2 oszlop mérete és az aktuális módszertani feltételek alapján.

Mobil fázisú pufferek

A pufferek megfelelő kiválasztása a pufferfajták, az ionerősség és a pH tekintetében a legkritikusabb lépés az RP-HPLC módszerfejlesztés során ionos analitok esetében. Az ionos analit visszatartását az RP-HPLC-ben alapvetően befolyásolja a mozgófázis pH-ja. Ezért a mobilfázis pH-jának szabályozása az RP-HPLC-ben az egyik legfontosabb paraméter a hatékony analit-elválasztáshoz.

A szilícium-dioxid-alapú oszlopokon végzett fordított fázisú elválasztások tipikus pH-tartománya 2 és 8 között van. A puffer pKa értékének közel kell lennie a kívánt pH-hoz, mivel a pufferek pKa értéküknél szabályozzák legjobban a pH-t. Ökölszabályként ideális olyan puffert választani, amelynek pKa értéke <2 egységgel nagyobb, mint a kívánt mobilfázis pH-ja. HPLC minőségű puffereket kínálunk széles pH-tartományban, minden laboratóriumi kromatográfiás követelményhez.

A HPLC-puffer kiválasztásakor figyelembe veendő tényezők

Kémiai tisztaság.

A mobilfázis adalékanyagok (pufferek, sók, savak és bázisok) minőségét a HPLC-kísérletben használt szerves oldószerekkel együtt a detektor érzékenységéhez és az elúciós protokollhoz kell igazítani. Az optimális kromatográfiához kiváló minőségű oldószerek és reagensek használata ajánlott.

Kémiai kompatibilitás

A puffer összetételét a mobilfázis pH-jával együtt az oszlopház anyagával és az állófázis jellegével összhangban kell megválasztani. Ezáltal elkerülhető az oszlop hardverének és ágyának károsodása.

Pufferoldhatóság

A puffer alapvetően teljesen vízoldható legyen, és ne csapódjon ki. A puffer koncentrációját gondosan kell megválasztani, hogy elkerülhető legyen a csapadék kicsapódása magasabb koncentrációknál, amikor a puffer a szerves oldószerrel keveredik. Ha elhanyagoljuk, ez működési problémákat okozhat a szivattyúkban és a HPLC-oszlop eltömődését idézheti elő.

Puffer erőssége

Az állófázissal gyenge kölcsönhatást mutató eluens csak a gyengén kötött analiteket képes eluálni az oszlopról, míg az erős kölcsönhatás az erősen kötött mintamolekulák eluálását okozza. A különböző oldószerek elúciós vagy oldószererőssége az alkalmazott állófázis típusától függ. Az elúciós erősség után a puffer viszkozitása és UV-abszorbanciája játszik fontos szerepet a HPLC-elemzésekre való alkalmasság szempontjából. 

Kapcsolódó termékkategóriák
HPLC oszlopok
Érjen el precíz elválasztásokat széles HPLC-oszlopgyűjteményünkkel. Növelje a visszatartást, a felbontást és a szelektivitást. Rendeljen még ma.
Analitikai fiolák
Pontos elemzés biztosítása: Inert, tanúsított fiolák megakadályozzák az extrahálható, kioldható anyagokat. Csökkentse a kockázatot a Supelco® autosampler, általános célú fiolákkal HPLC, GC/MS, LC/MS számára.
Analitikai reagensek
Analitikai reagensek és oldószerek nedves kémiához, kromatográfiához, spektroszkópiához, titráláshoz, mikrobiológiához, mikroszkópiához, gravimetriához, vízelemzéshez és ionérzékelőkhöz.
Oldószerek
Az Ön oldószerforrása: Találja meg a megfelelőt a Supelco®, SigmaAldrich®, & SAFC® márkák között, amelyek lefedik az analitikai, laboratóriumi és biofarmáciai felhasználásokat. Rendeljen online.
Sók
Fedezze fel a Supelco®, a Sigma-Aldrich® és a SAFC® portfóliójában a különböző alkalmazásokhoz szükséges különféle sókat. Adja le rendelését most.
Savak
Fedezze fel a három portfólió keretében kínált savak átfogó választékát a legkülönbözőbb alkalmazásokhoz: Supelco® termékek az analitikai kémiához, Sigma-Aldrich® anyagok laboratóriumi és gyártási célokra, SAFC® termékek a biofarmáciai és gyógyszeripari fejlesztéshez és gyártáshoz.
Lúgos lúgok és bázisok
Három portfóliónk márkája lúgos lúgokat és lúgokat kínál az Ön egyedi alkalmazásainak különböző követelményeihez. Supelco® termékek az analitikai kémiához, Sigma-Aldrich® anyagok laboratóriumi és gyártási célokra, SAFC® termékek a biofarmáciai és gyógyszeripari fejlesztéshez és gyártáshoz.
Kapcsolódó alkalmazások
Kis molekulák HPLC
A kismolekulák olyan ionok és vegyületek, amelyek molekulatömege általában 900 daltonnál kisebb. Ezek a vegyületek hatékonyan elválaszthatók és elemezhetők HPLC, UHPLC és LC-MS segítségével, főként szilika részecskék vagy monolitikus állófázisok használatával, az oszlopok kémiai összetételének (módosításainak) széles skálájával.
Nagy molekulájú HPLC
A HPLC a nagy biomolekulákat, például a fehérjéket és peptideket úgy választja szét és azonosítja, hogy a mintát egy szorbenssel töltött oszlopon keresztül pumpálja.
Nedves kémiai elemzés
A nedves kémiai elemzés során a folyékony mintában lévő kívánt elemeket többféle mérési technikával azonosítják és számszerűsítik. A kémiai reagensekkel az analit arányosan átalakít egy festéket, amely vizuálisan vagy fotometrikusan leolvasható.
Tömegspektrometria
A tömegspektrometria (MS) olyan analitikai eszköz, amelyet a vegyületek azonosítására, a kémiai szerkezet meghatározására és az izotópok mennyiségének értékelésére használnak. Az MS során a mintákat ionizálják, és a keletkező ionokat a tömeg-töltés arányuk (m/z) alapján azonosítják.
Mintaelőkészítés szűréssel
A szűrés az anyagok szétválasztásával csökkenti a minta összetettségét és növeli az analitok tisztaságát, javítva ezzel az analitikai eredményeket.
Mintatisztítás
A tisztítási módszerek a downstream analízishez csökkentik a minta összetettségét, eltávolítják az interferenciákat, és koncentrálják az analiteket a pontosabb eredmények érdekében.
QuEChERS minta előkészítési módszer
A QuEChERS egy "gyors, egyszerű, olcsó, hatékony, robusztus és biztonságos" mintatisztítási módszer, amelyet az élelmiszer- és mezőgazdasági minták peszticidvizsgálatra való előkészítésére használnak. A QuEChERS a szilárd fázisú extrakciós (SPE) mintaelőkészítési technikán alapul.
A folytatáshoz jelentkezzen be

Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.

Még nem rendelkezik fiókkal?