Pyrogen tesztelés
A pirogénvizsgálat meghatározza a pirogének jelenlétét vagy hiányát a parenterális gyógyszerkészítményekben, és számos szervezet, például az Élelmiszer- és Gyógyszerügyi Hivatal (FDA), az Egyesült Államok Gyógyszerkönyve (USP) vagy az Európai Gyógyszerkönyv (EP) szabványai szabályozzák. Egy termék sterilitása nem jelenti azt, hogy az mentes a pirogénektől. Ezért a sterilnek mondott gyógyszereket is meg kell vizsgálni pirogénekre, hogy megelőzzék a betegek lázas reakcióit.
A pirogénszennyeződés előfordulhat a gyógyszerek, bioterápiás készítmények és orvostechnikai eszközök gyártása vagy alkalmazása során, de a pirogének jelenléte a termék velejárója is lehet, mint például a vakcinák adjuvánsai vagy a szintetikus lipopeptidek.
Kapcsolódó műszaki cikkek
- GYIK a bakteriális endotoxinszennyezéssel kapcsolatban, részletek az endotoxin vizsgálatáról a LAL-teszt segítségével, valamint tippek a sejtkultúrákban történő szennyezés elkerülésére.
- Mindent látni (2)
BIOSAFETY TESTING SERVICES
Cellavonal-karakterizálási szolgáltatások a sejtvonalak faji eredetének és történetének megerősítésére, valamint a sejtvonalak identitásának, genetikai stabilitásának és tisztaságának jellemzésére és tesztelésére (beleértve a pirogén tesztelést is).
Mi a pirogén?
A pirogén olyan anyag, amely a veleszületett immunrendszer aktiválása révén hőemelkedést (lázreakciót) okoz az emberben vagy az állatban. A szennyező anyagok heterogén csoportját alkotják, amely mikrobiális és nem mikrobiális anyagokat tartalmaz. A pirogének két csoportba sorolhatók: endotoxinok és nem endotoxin pirogének (NEP). Az endotoxinok Gram-negatív baktériumokban található anyagok. A nem endotoxin pirogének más mikrobiális anyagok, beleértve a Gram-pozitív baktériumokból vagy vírusokból származó anyagokat, valamint az élesztőgombákból és gombákból származó pirogéneket. A nem mikrobiális pirogén anyagok származhatnak gumirészecskékből, mikroszkopikus műanyag részecskékből vagy elasztomerekben lévő fémvegyületekből is.
A pirogének kimutatására több vizsgálati módszer is rendelkezésre áll. Ezek az alábbi táblázatban leírtak szerint osztályozhatók az általuk kimutatott szennyezőanyag típusa és a vizsgálat elvégzéséhez szükséges állati anyagok alapján:
NYULAK PYROGÉN Vizsgálata
A nyúl pirogén teszt (RPT) során a vizsgált termék intravénás injekcióját követően a nyulak hőmérsékletének emelkedését mérik. Az RPT minőségi eredményeket ad, és az érzékenysége meglehetősen alacsony. A vizsgálat robusztussága is korlátozott, mivel a nyulak többszöri injekció beadása után kialakul a nyulak pirogéntoleranciája, illetve a vizsgálat elvégzésekor a nyulak stresszhatása miatt.
Monocyta aktivációs teszt
A Monocita aktivációs teszt (MAT) az állat alapú módszerek alternatívája mind az endotoxin, mind a nem endotoxin pirogének kimutatására. A monocita aktivációs teszt a humán immunreakciót utánozza a monocitáknak a vizsgált mintával való inkubálásával. Ha pirogének vannak jelen, a monociták aktiválódnak és gyulladásos molekulákat, citokineket termelnek, amelyek a lázas reakcióért felelősek. A citokinek kimutatása ezután egy immunológiai próbával (ELISA) történik, amely specifikus antitesteket és egy enzimatikus színreakciót foglal magában.
Kérem, vegye figyelembe: Az Európai Gyógyszerkönyv (Ph. Eur.) Bizottság úgy döntött, hogy elindul azon az úton, amely végül a nyúl pirogén teszt (RPT) teljes felváltásához vezet a Ph. Eur, körülbelül 5 éven belül.
A cikk elolvasása és beszélgessen tovább szakértőinkkel, hogy elindulhasson a lépés.
Bakteriális endotoxinvizsgálat (LAL-teszt)
Az endotoxinvizsgálat legelterjedtebb módszere a Limulus amőbocita lizátum teszt (LAL-teszt); a patkósrák véréből származó amőbociták lizátumán alapuló vizsgálat. A patkósrák vérsejtjeiből származó lizátum természetes módon reagál a bakteriális endotoxinokkal egy koagulációs reakció során. Ez a módszer nagy érzékenységgel rendelkezik az endotoxinok mennyiségi meghatározására, de a nem endotoxin pirogének kimutatására nem alkalmas.
Rekombináns C faktor (r).FC) vizsgálata
A rekombináns C faktor egy genetikailag módosított fehérje, amely általában a Limulus amebocita lizátum kaszkádjában található. Ebben a tesztben a C faktor reagál endotoxinnal, és egy markerrel párosulva egy számszerűsíthető, fluoreszcens végterméket eredményez. A rekombináns C faktor teszt ugyanazt az elvet alkalmazza, mint a LAL teszt, de nincs szükség állati eredetű anyagra.
Kapcsolódó webináriumok
Ez a webinárium arról szól, hogy a PyroMAT® rendszerrel végzett monocita aktivációs tesztek hogyan mutatják ki az endotoxin és nem endotoxin pirogéneket.
Megbeszéljük, hogyan lehet a PyroMAT® rendszerrel végzett monocita aktivációs teszteket elvégezni.
Tudja meg, hogy a PyroMAT® rendszerünk hogyan nyújt robusztus megoldást a gyógyszeripari in vitro pirogén teszteléshez egy azonnal használható készlettel.
Ez az előadás megtanulja, hogyan vizsgálja a pirogéneket (beleértve a nem endotoxin pirogéneket is) a gyógyszermintákban, melyek a létező módszerek a kontrollált folyamat érdekében.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?