Pyrogen tesztelés
A pirogének vizsgálata kritikus lépés a parenterális gyógyszeripari termékek és orvostechnikai eszközök biztonságának biztosításában. Ez része a kötelező felszabadítási vizsgálatoknak a pirogén anyagok által kiváltott életveszélyes lázreakciók elkerülése érdekében. A monocita aktivációs teszt (MAT) képes mind az endotoxin, mind a nem endotoxin pirogének kimutatására egyetlen in vitro tesztben.
Bővebben
Monocyta aktivációs teszt (MAT)
Az endotoxinok és a nem endotoxin pirogének kimutatására használt MAT a parenterális termékekben, például gyógyszerekben és orvostechnikai eszközökben, ad an in vitro alternatívát nyújt a hagyományos állatkísérletek helyett a szabályozási irányelveknek megfelelően.
A nyúl pirogén tesztet és a Limulus amőbocita lizátum (LAL) tesztet széles körben használják a pirogének kimutatására. Mindkét módszerhez állatokat használnak, és bizonyos korlátokat mutatnak. A nyúl pirogén teszt nem eléggé megbízható, mivel az állati reakció nagymértékben eltérhet az emberi reakciótól. A LAL-teszt során csak az endotoxinokat mutatják ki, ami biztonsági kockázatot jelent, mivel figyelmen kívül hagyja a vizsgált mintában esetlegesen jelen lévő nem endotoxin pirogéneket.
Ezek a korlátok kiküszöbölése érdekében 2010-ben az Európai Gyógyszerkönyvbe bevezették a Monocita-aktivációs tesztet (MAT), mint a nyúl pirogén tesztet felváltó kompendialis módszert (EP 2.6.30. fejezet), és az FDA iparnak szóló útmutatója is említi.
Kérem, vegye figyelembe: Az Európai Gyógyszerkönyv Bizottság a 3R-elvvel összhangban úgy döntött, hogy megszünteti a nyúl pirogén tesztet, tekintve, hogy a MAT a legjobb alternatív lehetőség.
olvassa el a cikket és beszélgessen tovább szakértőinkkel a lépés elindításához.
PyroMAT® in vitro in vitro teszt endotoxin és nem endotoxin pirogének kimutatására
A PyroMAT® rendszer a Mono-Mac-6 sejtvonalon és az IL-6 leolvasáson alapul. A monocita-aktivációs teszt minden előnyét kínálja a sejtvonal használatának előnyeivel kombinálva.
- A pirogének széles körének kimutatása: A betegbiztonságot a pirogének teljes körének vizsgálata biztosítja. A nyúl pirogénteszthez (RPT) hasonlóan a MAT is hatékony mind az endotoxin, mind a nem endotoxin pirogének kimutatására.
- A vizsgálható termékek körének bővítése: a leggyakrabban alkalmazott módszerek, az RPT, a bakteriális endotoxin teszt (BET) vagy a LAL korlátozottak az általuk vizsgálható terméktípusok tekintetében. A MAT nagyobb rugalmasságot kínál az alkalmazások tekintetében.
- In vitro vizsgálat, amely az emberi immunreakciót utánozza: a robusztus előrejelző modellhez, amely csökkenti az állatok fogyasztását.
- Megfelelés a nemzetközi előírásoknak és irányelveknek: összhangban az ipar és a szabályozó hatóságok etikai trendjeivel, hogy csökkentsék az állatokon végzett vizsgálatok használatát.
- Standardizált reaktivitás és nagy érzékenység (LOD 0,05 EU/mL). A használatra kész sejtvonal kényelme csökkenti a munkaigényes laboratóriumi munkát, és elkerüli a sejttenyésztő laboratórium szükségességét.
- Kvalifikált sejtek: amellett, hogy a MAT nemzetközi validálásában idézik, a Mono-Mac-6 sejtek az összes felszíni Toll-szerű receptor (TLR) kifejeződésére minősítettek, így biztosítva a pirogének széles körének kimutatását.
Bővebben az Non-endotoxin Pyrogen Positive Controls-ról
.Non-endotoxin pirogén pozitív kontrollok
Az Európai Gyógyszerkönyv 2.6.30. fejezete (Monocita aktivációs teszt) előírja, hogy az előkészítő vizsgálatnak tartalmaznia kell "legalább 2 nem endotoxin ligandumot a toll-szerű receptorokhoz [...]. Az alkalmazott nem endotoxin pirogének kiválasztásának tükröznie kell a vizsgált készítmény legvalószínűbb szennyeződését (szennyeződéseit)."
Az e követelménynek való megfelelés érdekében a pozitív kontrollok kibővített választékát biztosítjuk:
- A gyógyszeripari gyártási folyamatokban általában előforduló többféle szennyeződést (Gram-negatív és Gram-pozitív baktériumok, vírusok és mikoplazma) tükröző pozitív kontrollok.
- Tárcsáznak több monocitikus útdíjszerű receptort (TLR)
- A pirogének széles spektrumának kimutatása: A nyúl pirogénteszthez (RPT) hasonlóan a MAT mind az endotoxinokat, mind a NEP-eket kimutatja.
- A vizsgálható termékek kibővített köre: a leggyakrabban alkalmazott módszerek, az RPT, a bakteriális endotoxin teszt (BET) és a LAL korlátozottan alkalmazható terméktípusok. A MAT nagyobb rugalmasságot kínál az alkalmazások tekintetében.
- Az emberi immunreakciót utánzó in vitro vizsgálat: egy robusztus előrejelző modellhez, amely csökkenti az állatok fogyasztását.
- Megfelelés a nemzetközi szabályozásoknak és irányelveknek: összhangban az ipar és a szabályozó hatóságok etikai trendjeivel, hogy csökkentsék az állatokon végzett kísérletek használatát.
- 8 donorból származó kriokonzervált vér összevontan: hogy a lehető legközelebb álljon a pirogénekre adott emberi immunreakcióhoz.
Optimalizálja vagy egyszerűsítse pirogén tesztelési módszerét a könnyű validálás és a költséghatékony tesztelés érdekében szolgáltatási ajánlatainkkal:
- Alkalmazási szolgáltatások
- Validálási szolgáltatások
- Képzési szolgáltatások
A nyúl, LAL és MAT pirogén tesztek összehasonlítása |
|---|
Hiányos erőforrások a MAT végrehajtásához és érvényesítéséhez. Mi megtesszük Önnek!
Megvalósíthatósági tanulmány, módszerfejlesztés, validálás & képzési szolgáltatások a pirogén tesztelés megvalósításának támogatására, beszélje meg Pyrogen Testing Experts.
.Kapcsolódó termékforrások
- Brochure: PyroMAT® and PyroDetect
Used to detect a broad range of pyrogens in parenteral products such as pharmaceuticals, biopharmaceuticals or medical devices, the MAT gives an in vitro alternative to conventional animal testing in accordance with regulatory guidelines.
- Article: Pyrogen Contamination Risk by Dr. Tim Sandle
Unlike the LAL test, the MAT is a powerful in vitro test for the detection of both endotoxin and non-endotoxin pyrogens (NEPs) acting via the toll-like receptors (TLRs) pathway.
- Data Sheet: Validation Method - PyroMAT® System
The Monocyte Activation Test (MAT) was introduced in the European Pharmacopeia (Chapter 2.6.30) in 2010, as a compendial method that can be used to replace the Rabbit Pyrogen Test (RPT).
- Infographic: MAT Implementation Workflow
Implementation of our Monocyte Activation Test (MAT), the PyroMAT® system.
- Poster: Pyrogen Detection in Pharma QC: Moving Away from the RPT
We have demonstrated that the MM6 cells are suitable for the detection of various NEPs targeting different monocytic toll-like receptors, making MM6 cell line-based MAT suitable for RPT replacement.
- Application Note: Detection of NEP by MAT Using the PyroMAT® System
The monocyte activation test (MAT) is the human in vitro alternative to the rabbit pyrogen test, and allows the detection of the full range of pyrogens, including endotoxins and non-endotoxin pyrogens (NEPs).
- Application Note: Detection of Pyrogens in Vaccines with PyroMAT® System
The PyroMAT™ System uses cryo-preserved Mono-Mac-6 (MM6) human monocytic cells as a source of monocytes. The response to pyrogenic substances is determined by measurement of Interleukin-6 (IL-6) produced by the MonoMac 6 cells.
- White Paper: MAT Statistical Analysis
The use of different sources of monocytes (blood vs cell line) leads to a different reactivity profile that requires the use of different regression models for each of these solutions.
- Questions & Answers about MAT. Dr. Tim Sandle Reponds
Risk considerations for the presence of pyrogens and the need for the MAT test in pharmaceutical processing.
- White Paper: Monocyte Activation Test
In this context, the in vitro pyrogen test based on human cells offers a valuable alternative to the rabbit pyrogen test.
- Application Note: Detection of Pyrogens in Hormone-based Drugs
For the quantification of the pyrogenic load of a sample, method A in accordance with the European Pharmacopeia can be conducted.
- Application Note: Detection of Pyrogens in FBS with PyroMAT® System
The response to pyrogenic substances is determined by measurement of Interleukin-6 (IL-6) produced by the Mono-Mac-6 cells. For this purpose, the ELISA-microplate supplied in the kit is coated with an antibody specific to IL-6.
Kapcsolódó videók
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?