D4513
Desoxirribonuclease I
Type II-S, lyophilized powder, Protein ≥80 %, ≥2,000 units/mg protein
Sinônimo(s):
DNase I, Desoxirribounucleato 5′-oligonucleotídeo-hidrolase
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About This Item
Produtos recomendados
fonte biológica
bovine pancreas
esterilidade
sterile-filtered
tipo
Type II-S
forma
lyophilized powder
atividade específica
≥2,000 units/mg protein
peso molecular
~31 kDa
purificado por
chromatography
composição
Protein, ≥80%
embalagem
vial of ≥10.0 mg protein
técnica(s)
DNA purification: suitable
Impurezas
endotoxin, tested
solubilidade
0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear(lit.)
adequação
suitable for molecular biology
aplicação(ões)
diagnostic assay manufacturing
diagnostic assay manufacturing
atividade externa
Chymotrypsin ≤0.01%
Protease ≤0.005%
RNase ≤0.01%
temperatura de armazenamento
−20°C
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Categorias relacionadas
Aplicação
A DNAse I da Sigma foi comparada ao inibidor de interleucina 1 derivada de urina humana por sua capacidade de hidrolisar [14C]DNA [14C]DNA. Também foi usada para clivar um fragmento de restrição Hind III/Nci I de 139 pares de base para investigar a estabilidade da enzima para uso em experimentos de “footprinting”. A DNase I é amplamente usada como agente de “footprinting” para estudar a ligação medicamentos e proteínas ao DNA.
A desoxirribonuclease I de pâncreas bovino foi usada em um estudo que investigou uma nova abordagem para obter RNase, DNase, colesterol esterase e tripsina de alta atividade derivadas de pâncreas bovino. A desoxirribonuclease I de pâncreas bovino também foi usada em um estudo para investigar o isolamento e posterior caracterização de DNase de fígado de carpa.
Usado para remoção de DNA de amostras proteicas.
Ações bioquímicas/fisiológicas
A DNase I é uma endonuclease que age nas ligações fosfodiéster adjacente às pirimidinas para produzir polinucleotídeos com fosfatos nas terminações 5′ Na presença de Mg2+, a DNase I cliva cada fita de DNA de forma independente, e os sítios de clivagem são aleatórios. As duas fitas de DNA são clivadas aproximadamente no mesmo sítio na presença de Mn2+. O pH ideal é entre 7 e 8. Cátions bivalentes como Mn2+, Ca2+, Co2+ e Zn2+ são ativadores da enzima. Uma concentração de Ca2+ 5 mM estabiliza a enzima contra digestão proteolítica. A DNase I do pâncreas bovino consiste em quatro componentes diferenciáveis por meio de cromatografia, A, B, C e D, com razões molares de 4:1:1, respectivamente. São encontradas apenas pequenas quantidades de D. 2-Mercaptoetanol, quelantes, dodecil sulfato de sódio (SDS) e actina são inibidores conhecidos da atividade enzimática.
Definição da unidade
Uma unidade Kunitz produz um ΔA260 de 0,001 por minuto por ml em pH 5,0 a 25 °C, usando DNA, tipo 1 ou III, como substrato. (1 unidade = 1 unidade Kunitz)
forma física
Pó liofilizado contendo cloreto de cálcio
Nota de preparo
O pó de enzima pode ser reconstituído em água ou qualquer tampão em pH 4,0-9,0, exceto tampão fosfato. Quelantes de cálcio devem ser evitados. A solução de 10 mg/ml de DNase I em NaCl 0,15 M pode perder <10% de sua atividade quando armazenada em alíquotas por uma semana a −20 °C. As mesmas soluções armazenadas em alíquotas a 2-8 °C podem perder cerca de 20% de atividade. Ela continua ativa por até cinco horas a 60 °C entre pH 5 e 7, e perde a atividade em <10 minutos a 68 °C. Ela perde a atividade a uma taxa de 6%/hora em tampão acetato (pH 5,0) e tampão tris (pH 7,2) em uma concentração de 1 mg/ml.
Nota de análise
Proteínas determinadas por biureto.
inibidor
Nº do produto
Descrição
Preços
Palavra indicadora
Danger
Frases de perigo
Declarações de precaução
Classificações de perigo
Resp. Sens. 1
Código de classe de armazenamento
11 - Combustible Solids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 3
Ponto de fulgor (°F)
Not applicable
Ponto de fulgor (°C)
Not applicable
Equipamento de proteção individual
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
Certificados de análise (COA)
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To standardize a procedure for the enzymatic assay of Deoxyribonuclease I.
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