COLLD-RO
Roche
Colagenase D
from Clostridium histolyticum
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About This Item
Produtos recomendados
fonte biológica
Clostridium histolyticum
Nível de qualidade
esterilidade
non-sterile
forma
lyophilized
collagenase activity
>0.15 U/mg lyophilizate
embalagem
pkg of 100 mg (11088858001)
pkg of 2.5 g (11088882001)
pkg of 500 mg (11088866001)
fabricante/nome comercial
Roche
concentração
(working concentration: 0.5 - 2.5 mg/ml)
técnica(s)
tissue processing: suitable
cor
light brown
pH ideal
6.0-8.0
solubilidade
water: soluble
nº de adesão NCBI
aplicação(ões)
cell analysis
atividade externa
Clostripain 0.060 U/mg
Proteases 8 U/mg ( Azocoll)
Trypsin <0.2 U/mg (with BAEE)
temperatura de armazenamento
2-8°C
Categorias relacionadas
Descrição geral
A colagenase D é preparada a partir de culturas de Clostridium histolyticum por filtração, precipitação de sulfato de amônio, diálise e liofilização.
Especificidade
A colagenase degrada o colágeno nativo. Clostripain, enzimas como a tripsina e proteases neutras também degradam outras proteínas.
Aplicação
A colagenase de C. histolyticum é amplamente usada para desagregação de vários tipos de tecidos (p. ex.,, pulmão, coração, músculos, ossos, tecido adiposo, fígado, rins, cartilagem. glândulas mamárias, placenta, vasos sanguíneos, cérebro, tumores) e para o preparo de suspensões de célula única para o estabelecimento de sistemas de cultura celular primária. A colagenase D é recomendada quando a funcionalidade e a integridade das proteínas de superfície celular são importantes.
A colagenase de Clostridium da Roche foi usada para preparar células de vários tipos de tecido, como hepatócitos, adipócitos, ilhotas pancreáticos, células epiteliais, células musculares, células endoteliais, etc. Contudo, a adequação de cada lote da enzima para perturbação de um tecido específico deve ser determinada empiricamente.
A colagenase de Clostridium da Roche foi usada para preparar células de vários tipos de tecido, como hepatócitos, adipócitos, ilhotas pancreáticos, células epiteliais, células musculares, células endoteliais, etc. Contudo, a adequação de cada lote da enzima para perturbação de um tecido específico deve ser determinada empiricamente.
Características e benefícios
Conteúdo
Liofilizado, não estéril
Liofilizado, não estéril
Definição da unidade
A colagenase da Roche é medida em unidades Wünsch (1 μmol de produto formado por minuto a +25 °C com substrato Wünsch).
Frequentemente, as atividades da colagenase são representadas em unidades de Mandl (1 μmol de leucina liberada do colágeno em 5 horas a +37 ºC).
Infelizmente, não existe um fator de consistente entre as duas unidades de atividade, uma vez que a unidade de Mandl depende, em parte, da concentração de proteases contaminantes no preparo da colagenase, uma variável indefinível. Um preparado de colagenase mais puro resultaria, na verdade, em uma atividade específica menor em unidades de Mandl do que o preparado bruto. Preparados de Clostridium tipicamente geram fatores de conversão de cerca de 1:1800 (p. ex., um determinado lote de colagenase de Clostridium continha cerca de 0,15 Wünsch U/mg e 250 Mandl U/mg).
Frequentemente, as atividades da colagenase são representadas em unidades de Mandl (1 μmol de leucina liberada do colágeno em 5 horas a +37 ºC).
Infelizmente, não existe um fator de consistente entre as duas unidades de atividade, uma vez que a unidade de Mandl depende, em parte, da concentração de proteases contaminantes no preparo da colagenase, uma variável indefinível. Um preparado de colagenase mais puro resultaria, na verdade, em uma atividade específica menor em unidades de Mandl do que o preparado bruto. Preparados de Clostridium tipicamente geram fatores de conversão de cerca de 1:1800 (p. ex., um determinado lote de colagenase de Clostridium continha cerca de 0,15 Wünsch U/mg e 250 Mandl U/mg).
forma física
Liofilizado, não estéril.
Nota de preparo
Ativador: Ca2+
Concentração de trabalho: 0,5-2,5 mg/ml
Condições de armazenamento (solução de trabalho): -15 ºC a -25 °C
A Roche recomenda reconstituir apenas a quantidade de liofilizado necessária para uso imediato. A solução reconstituída pode ser armazenada a -15 ºC a -25 °C por até uma semana. Evite o congelamento e descongelamento repetido, uma vez que a atividade diminui após cada reconstituição.
Inibidores:
Inibidores de colagenase: EDTA, EGTA, Cis, His, DTT, 2-mercaptoetanol
A colagenase não é inibida pelo soro.
Inibidores de clostripain: TLCK
Inibidores da tripsina: aprotinina, inibidor da tripsina (clara de ovos, soja)
Atividade enzimática:
Atividade da colagenase: >0,15 U/mg (segundo Wünsch) (+25 °C, 4-fenil-azobenzil-oxicarbonil-Pro-Leu-Gli-Pro-D-Arg como o substrato)
Atividades enzimáticas contaminantes: tripsina, clostripain e atividade proteolítica total
A colagenase D tem uma atividade de colagenase de normal a alta e atividade tríptica muito baixa) (em geral <0,2 unidades/mg, BAEE como substrato).
Concentração de trabalho: 0,5-2,5 mg/ml
Condições de armazenamento (solução de trabalho): -15 ºC a -25 °C
A Roche recomenda reconstituir apenas a quantidade de liofilizado necessária para uso imediato. A solução reconstituída pode ser armazenada a -15 ºC a -25 °C por até uma semana. Evite o congelamento e descongelamento repetido, uma vez que a atividade diminui após cada reconstituição.
Inibidores:
Inibidores de colagenase: EDTA, EGTA, Cis, His, DTT, 2-mercaptoetanol
A colagenase não é inibida pelo soro.
Inibidores de clostripain: TLCK
Inibidores da tripsina: aprotinina, inibidor da tripsina (clara de ovos, soja)
Atividade enzimática:
Atividade da colagenase: >0,15 U/mg (segundo Wünsch) (+25 °C, 4-fenil-azobenzil-oxicarbonil-Pro-Leu-Gli-Pro-D-Arg como o substrato)
Atividades enzimáticas contaminantes: tripsina, clostripain e atividade proteolítica total
A colagenase D tem uma atividade de colagenase de normal a alta e atividade tríptica muito baixa) (em geral <0,2 unidades/mg, BAEE como substrato).
Reconstituição
Reconstituição em solução salina balanceada (p. ex., HBSS)
Armazenamento e estabilidade
Armazenar ao abrigo da luz.
Outras notas
Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.
Palavra indicadora
Danger
Frases de perigo
Declarações de precaução
Classificações de perigo
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Órgãos-alvo
Respiratory system
Código de classe de armazenamento
11 - Combustible Solids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 1
Ponto de fulgor (°F)
does not flash
Ponto de fulgor (°C)
does not flash
Certificados de análise (COA)
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