D5319

デオキシリボヌクレアーゼI ウシ

recombinant, expressed in Pichia pastoris, buffered aqueous glycerol solution, ≥5,000 units/mg protein

• 別名: DNAse I, デオキシリボ核酸5'-オリゴヌクレオチド-ヒドロラーゼ
• Enzyme Commission number: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• MDL番号: MFCD00130918
• UNSPSCコード: 12352204
• NACRES: NA.54

特性

• 由来生物: bovine
• 品質水準: 200
• リコンビナント: expressed in Pichia pastoris
• アッセイ: ≥95%
• フォーム: buffered aqueous glycerol solution
• 比活性: ≥5,000 units/mg protein
• 分子量: ~39 kDa
• テクニック: DNA extraction: suitable
• 適合性: suitable for molecular biology
• アプリケーション: diagnostic assay manufacturing
• その他の活性: RNAse and protease, free
• 輸送温度: dry ice
• 保管温度: −20°C

詳細

アプリケーション

SigmaのDNAse Iは、1つの研究において単一ヌクレオソームを得るための核溶解液の処理のために使用されました[1]。また、マウス乳腺の準備と回収のためにも使用されてきました。[2]

タンパク質サンプルからDNAを除去する際に使用されます。

デオキシリボヌクレアーゼI（ウシ）は、脾臓デオキシリボヌクレアーゼと膵臓デオキシリボヌクレアーゼの初期作用を比較するための研究で使用されています。デオキシリボヌクレアーゼI（ウシ）は、ウシ膵臓デオキシリボヌクレアーゼの合成基質としてのデオキシチミジン3′, 5′-ジ-p-ニトロフェニルリン酸塩を調べるための研究でも使用されています。

生物化学的／生理学的作用

DNase Iは、（ピリミジンに隣接する）ホスホジエステル結合に作用して、5′末端にリン酸を持つポリヌクレオチドを生成するエンドヌクレアーゼです。最適pHは7～8であることが分かっています。Mn²⁺、Ca²⁺、Co²⁺、Zn²⁺などの二価陽イオンはこの酵素を活性化させます。5 mM濃度のCa²⁺は、タンパク質消化に対してこの酵素を安定化させます[3]。2-メルカプトエタノール、キレート剤、ドデシル硫酸ナトリウム（SDS）[4]およびアクチン[5]はその酵素活動を阻害することが分かっています。

一本鎖DNAおよび二本鎖DNAを切断して、5'末端にリン酸、3'末端にOH基を有するモノヌクレオチドとオリゴヌクレオチドの混合物を生じます。その触媒活性は、二価イオン依存性です。Mg²⁺存在下で、DNase Iは二本鎖DNAの各鎖をランダムかつ別々に加水分解します。Mn²⁺存在下で、両方の鎖を切断することが可能です。

特徴および利点

• DNAを除去してRNAを精製できます。
• ニックトランスレーション用のDNAを調製できます¹。
• DNA-タンパク質相互作用を評価するためのフットプリント法が行えます²。

単位の定義

1 unitは、pH 5.0、25°C、1分間に、ウシ胸腺由来DNAを用いて、反応液1 mLあたりΔA₂₆₀=0.001となる酵素量です。

物理的形状

4 mg/mLグリシン(pH 5.0)、5 mM酢酸カルシウム、50% グリセロールで調製した溶液。

調製ノート

動物細胞や動物由来の材料を使用せずに製造。

安全性情報

• 保管分類コード: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 1
• 引火点(°F): Not applicable
• 引火点(℃): Not applicable