11333151001

マウスIgG ELISA

• 別名: ハイブリドーマ定量キット|ハイブリドーマの定量 |モノクローナルの定量
• UNSPSCコード: 12352200

特性

• 使用法: sufficient for ≤400 tests
• メーカー／製品名: Roche
• テクニック: ELISA: suitable
• 輸送温度: wet ice
• 保管温度: 2-8°C

詳細

詳細

ハイブリドーマ-培養上清中のイムノグロブリン濃度の正確な測定は、ハイブリドーマの増殖に対する薬物または物理的パラメータの影響、あるいはイムノグロブリン分泌レベルを研究するためには、不可欠です。
アッセイ所要時間：約2.5～4.5時間
サンプル物質：ハイブリドーマ上清、腹水、マウス血清および精製されたIgG調製物（このアッセイは、例えば、アフィニティークロマトグラフィーマトリックスからの溶出時等に、変性作用が強い緩衝液によって精製されたIgG 調製物の定量には適用できません）
感度：約10 ng IgG/mL

マウスハイブリドーマ上清および腹水中のマウスIgGを測定するための酵素イムノアッセイ。

免疫グロブリンG（IgG）は免疫グロブリンファミリーに属し、広く発現される血清抗体です。[1]免疫グロブリンは、ジスルフィド結合により連結された2本の重鎖および2本の軽鎖を有します。これは主に免疫防御を支援します。[2]IgGは糖タンパク質です。マウスIgGは、さらに4つのクラス、すなわち、IgG1、IgG2a、IgG2bおよびIgG3に分類されます。[3]

特異性

マウス IgG ELISAは、マウス又はウシIgG (<0.1%) の他のIgクラスとは、交差反応性を示しません。

アプリケーション

このキットは、ハイブリドーマ上清、腹水、マウス血清などに含まれるマウスIgGの測定に使用されます。[4]

生物化学的／生理学的作用

免疫グロブリンG（IgG）は、II型およびIII型の過敏反応に関与しています。[5]IgG2aは細胞向性を示し、IgG2分子には補体系活性化能があります。[6]IgGは、オプソニン化、補体結合および抗体に依存した細胞媒介性の細胞毒性に寄与します。[3]

特徴および利点

• 信頼できる: キットによって提供される特異性の高い抗体
• 容易: 標準ELISAプロトコールに従ってください
• 迅速: 2～4時間で結果が得られます
• 高感度: 10 ng/mlまで、検出します
• 高特異性: FBSとの交差反応性なし

包装

1 のキットに 9構成要素が含まれています。

原理

マウスIgG ELISAは、標準サンドイッチELISAプロトコールに従ってください。先ず、特別な捕捉抗体をマイクロプレートのウェルに結合させます。使用される抗体は、免疫吸着により精製されたヒツジ由来のポリクローナル抗マウスIgGの最適化された混合物であり、全てのIgGサブクラス(IgG3を含む)に対する等価なアフィニティーを有します。ポスト-コーティング緩衝液によるブロッキングの後、アッセイ対象の試料(例えば、ハイブリドーマ上清、腹水希釈物)に含まれるマウスIgGが捕捉抗体に結合されます。次に、抗-マウス-λ- 及び抗-マウス-κ-抗体のバランスされた混合物 (免疫吸着により精製されたFabフラグメント)であってPODに接合しているもの、が添加されて、マウス IgGと結合します。次のステップにおいて、このPOD基質ABTSが添加され、代謝されて、着色した反応生成物を形成します。試料の吸光度は、マイクロプレート(ELISA) リーダーによって測定され、次に標準曲線と比較されます。較正曲線を作成するための標準溶液は、キットにより提供されます。

調製ノート

標準溶液: 標準の調製溶液

• 凍結乾燥物の損失を防ぐため、標準は、注意深く開封すること。正確に 500 μlの2回蒸留水を加えます。注: バイアル5のラベルには、バイアル1本分あたりのIgG含有量がmg/fl (フラスコ) で表示されています。バイアルの内容物は0.5 mlに溶解されるので、再調製後に、IgG濃度は (mg/mlで) ラベルに印刷された値に対し正確に2倍となります。

• ボトルを注意深く閉めます。15～25 °Cで30分間、ボトルを平衡化させます。次に、ボトルを穏やかに回転させて、内容物を完全に溶解します。注: 泡の形成を避けてください。また振らないでください。

再調製が完了したら、10のアリコット (それぞれ、50 μl) を残りの10の空のバイアルにピペットで入れ、しっかりと閉じます。
保存条件 (標準溶液): 標準溶液

Sアリコットの状態で-15～-25 °Cで保存した場合、数か月間安定です;3回を超える凍結/融解の繰り返しは避けてください。

その他情報

生命科学研究用途に限ります。診断措置において使用しないでください。

キットの構成要素のみ

• Coating Antibody, anti-mouse-IgG
• Coating Buffer Concentrate
• Detergent
• Blocking Reagent
• Standard
• Conjugate, optimized mixture of anti-mouse-k-POD antibody and anti-mouse-l-POD antibody
• Substrate Buffer
ABTS Substrate Tablets
20 empty vials, for the preparation of the standard dilutions

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安全性情報

• ピクトグラム: GHS05,GHS07
• シグナルワード: Danger
• 危険有害性情報: H317,H318,H412
• 注意書き: P261 - P273 - P280 - P305 + P351 + P338 + P310 - P333 + P313 - P362 + P364
• 危険有害性の分類: Aquatic Chronic 3 - Eye Dam. 1 - Skin Sens. 1
• 保管分類コード: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 2
• 引火点(°F): 230.0 °F
• 引火点(℃): 110 °C