DN25
Desossiribonucleasi I
lyophilized powder, Protein ≥85 %, ≥400 Kunitz units/mg protein
Sinonimo/i:
Desossiribonucleasi, DNasi I, Desossi-ribonucleato 5′-oligonucleotido-idrolasi
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About This Item
Prodotti consigliati
Origine biologica
bovine pancreas
Forma fisica
lyophilized powder
Attività specifica
≥400 Kunitz units/mg protein
PM
~31 kDa
Composizione
Protein, ≥85%
tecniche
DNA extraction: suitable
Solubilità
0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, hazy
Compatibilità
suitable for molecular biology
applicazioni
diagnostic assay manufacturing
diagnostic assay manufacturing
Attività estranea
RNase ≤0.02%
Condizioni di spedizione
wet ice
Temperatura di conservazione
−20°C
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Descrizione generale
DNase I, or Deoxyribonuclease I, is an endonuclease isolated from bovine pancreas.
- Our DNase I Digests double str and single stranded DNA into oligo and mononucleotides.
- La DNasi pancreatica bovina esiste sotto forma di quattro isozimi con punti isoelettrici (per A, B, C e D): 5,2, 4,96, 5,06 e 4,78. La forma predominante è la A, con quantità minori di B e C e minime di D.
- DNase I structure resembles the structure of to exonuclease III. It includes two central ß sheets. ββ Questa struttura è circondata dalle regioni dell′ansa estesa e dell′α-elica. La struttura di questo enzima è simile a quella dell′esonucleasi III.[1]
Applicazioni
- Decreases viscosity providing better yields by removing DNA in primary cell isolation:
- Incorporating labelled bases into DNA: DNA nick
- Radioactive labelling
- Bioprocessing applications: DNA removal
- Eliminating genomic DNA from RNA preparations before RT-PCR
- Nick translation
- DNase footprinting
- Actin regulation of actin polymerization in cells, and cell apoptosis
- UV crosslinking of proteins to nucleic acids
Usato per rimuovere DNA da campioni di proteine.
Azioni biochim/fisiol
La DNasi I è un′endonucleasi che agisce sui legami fosfodiesterici adiacenti alle pirimidine per produrre polinucleotidi con fosfati 5′-terminali. In presenza di Mg2+, la DNasi taglia ciascun filamento di DNA indipendentemente e i siti di clivaggio sono casuali. Invece, in presenza di Mn2+ i due filamenti di DNA vengono tagliati approssimativamente alla stessa altezza. Cationi bivalenti come Mn2+, Ca2+, Co2+, e Zn2+ sono attivatori dell′enzima. Una concentrazione di Ca2+ 5 mM stabilizza l′enzima contro la digestione proteolitica. Il pH ottimale è fra 7 e 8. La DNasi I da pancreas bovino consiste di quattro componenti, A, B, C, e D, distinguibili cromatograficamente, i primi tre in rapporto molare 4:1:1. Si trova solo una piccola quantità di D. 2-Mercaptoetanolo, chelanti, sodio dodecilsolfato (SDS) e actina sono noti inibitori dell′attività enzimatica.
Caratteristiche e vantaggi
Our Deoxyribonuclease DNAse I,is essentially RNAse free product, which support the product application.
Definizione di unità
Un′unità Kunitz produrrà una variazione in A260 pari a 0,001 per minuto per mL a pH 5,0 e 25 °C, usando DNA tipo I o III come substrato.
Stato fisico
Preparazione grezza, contiene cloruro di calcio
Nota sulla preparazione
Una soluzione di DNAsi I 10 mg/mL in NaCl 0,15 M può perdere <10% della sua attività quando conservata per una settimana in aliquote a −20 °C. Le stesse soluzioni conservate a 2-8 °C possono perdere circa il 20% dell′attività. Rimane attiva fino a cinque ore a 60 °C a pH fra 5 e 7 e perde la sua attività in <10 minuti a 68 °C. L′attività decade del 6% all′ora in tampone acetato (a pH 5,0) e tris (a pH 7,2) alla concentrazione di 1 mg/mL.
Risultati analitici
Proteine determinate con il metodo del biureto.
Inibitore
N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Classi di pericolo
Resp. Sens. 1
Codice della classe di stoccaggio
11 - Combustible Solids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 3
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
Dispositivi di protezione individuale
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
Certificati d'analisi (COA)
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Protocolli
To standardize a procedure for the enzymatic assay of Deoxyribonuclease I.
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