DN25

Desossiribonucleasi I

lyophilized powder, Protein ≥85 %, ≥400 Kunitz units/mg protein

• Sinonimo/i: Desossiribonucleasi, DNasi I, Desossi-ribonucleato 5′-oligonucleotido-idrolasi
• Numero CAS: 9003-98-9
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• EC Number: 232-667-0
• MDL number: MFCD00130918
• Numero CE: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• Specific activity: ≥400 Kunitz units/mg protein
• Biological source: bovine pancreas

Proprietà

• biological source: bovine pancreas
• Quality Segment: 300
• form: lyophilized powder
• specific activity: ≥400 Kunitz units/mg protein
• mol wt: ~31 kDa
• composition: Protein, ≥85%
• technique(s): DNA extraction: suitable
• solubility: 0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, hazy
• suitability: suitable for molecular biology
• application(s): diagnostic assay manufacturing
• foreign activity: RNase ≤0.02%
• shipped in: wet ice
• storage temp.: −20°C

Descrizione

General description

DNase I, or Deoxyribonuclease I, is an endonuclease isolated from bovine pancreas.

• Our DNase I Digests double str and single stranded DNA into oligo and mononucleotides.
• La DNasi pancreatica bovina esiste sotto forma di quattro isozimi con punti isoelettrici (per A, B, C e D): 5,2, 4,96, 5,06 e 4,78. La forma predominante è la A, con quantità minori di B e C e minime di D.
• DNase I structure resembles the structure of to exonuclease III. It includes two central β sheets. ββ Questa struttura è circondata dalle regioni dell′ansa estesa e dell′α-elica. La struttura di questo enzima è simile a quella dell′esonucleasi III.^[1]

Application

• Decreases viscosity providing better yields by removing DNA in primary cell isolation:
• Incorporating labelled bases into DNA: DNA nick
• Radioactive labelling
• Bioprocessing applications: DNA removal
• Eliminating genomic DNA from RNA preparations before RT-PCR
• Nick translation
• DNase footprinting
• Actin regulation of actin polymerization in cells, and cell apoptosis
• UV crosslinking of proteins to nucleic acids

Usato per rimuovere DNA da campioni di proteine.

Biochem/physiol Actions

La DNasi I è un′endonucleasi che agisce sui legami fosfodiesterici adiacenti alle pirimidine per produrre polinucleotidi con fosfati 5′-terminali. In presenza di Mg²⁺, la DNasi taglia ciascun filamento di DNA indipendentemente e i siti di clivaggio sono casuali. Invece, in presenza di Mn²⁺ i due filamenti di DNA vengono tagliati approssimativamente alla stessa altezza. Cationi bivalenti come Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺, e Zn²⁺ sono attivatori dell′enzima. Una concentrazione di Ca²⁺ 5 mM stabilizza l′enzima contro la digestione proteolitica. Il pH ottimale è fra 7 e 8. La DNasi I da pancreas bovino consiste di quattro componenti, A, B, C, e D, distinguibili cromatograficamente, i primi tre in rapporto molare 4:1:1. Si trova solo una piccola quantità di D.[1] 2-Mercaptoetanolo, chelanti, sodio dodecilsolfato (SDS)[2] e actina[3] sono noti inibitori dell′attività enzimatica.

Features and Benefits

Our Deoxyribonuclease DNAse I,is essentially RNAse free product, which support the product application.

Physical form

Preparazione grezza, contiene cloruro di calcio

Preparation Note

Una soluzione di DNAsi I 10 mg/mL in NaCl 0,15 M può perdere <10% della sua attività quando conservata per una settimana in aliquote a −20 °C. Le stesse soluzioni conservate a 2-8 °C possono perdere circa il 20% dell′attività. Rimane attiva fino a cinque ore a 60 °C a pH fra 5 e 7 e perde la sua attività in <10 minuti a 68 °C. L′attività decade del 6% all′ora in tampone acetato (a pH 5,0) e tris (a pH 7,2) alla concentrazione di 1 mg/mL.

Analysis Note

Proteine determinate con il metodo del biureto.

Other Notes

Un′unità Kunitz produrrà una variazione in A₂₆₀ pari a 0,001 per minuto per mL a pH 5,0 e 25 °C, usando DNA tipo I o III come substrato.

Informazioni sulla sicurezza

• pictograms: GHS08
• signalword: Danger
• hcodes: H334
• pcodes: P261 - P284 - P501
• Hazard Classifications: Resp. Sens. 1
• Classe di stoccaggio: 11 - Combustible Solids
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)