LIBTM-RO
Roche
Liberase™ TM grado ricerca
medium Thermolysin concentration
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About This Item
Codice UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.28
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Prodotti consigliati
Livello qualitativo
Stato
lyophilized
Confezionamento
pkg of 10 mg (05401119001 [2 x 5 mg])
pkg of 100 mg (05401127001 [2 x 50 mg])
Produttore/marchio commerciale
Roche
Parametri
35-37 °C optimum reaction temp.
tecniche
single cell analysis: suitable
tissue processing: suitable
Colore
white
pH ottimale
7.4
Solubilità
water: soluble
Compatibilità
suitable for flow cytometry
applicazioni
life science and biopharma
sample preparation
Attività estranea
Endotoxin 1 EU/mg
Condizioni di spedizione
dry ice
Temperatura di conservazione
−20°C
Descrizione generale
La miscela di enzimi Liberase TM, grado ricerca contiene collagenasi I e collagenasi II altamente purificate. Queste due isoforme di collagenasi sono miscelate in un rapporto preciso tra di loro e con Thermolysin, una proteasi neutra non clostridica aggiunta ad una concentrazione media.
Applicazioni
La miscela enzimatica Liberase™(Thermolysin Medium) grado ricerca, viene utilizzata per la dissociazione di un'ampia gamma di tessuti. L'elevato grado di purezza degli enzimi che la compongono consente di ottenere rese elevate in termini di quantità e vitalità cellulare.[1][2][3] I sottoprodotti di origine batterica, come le endotossine, sono presenti in quantità molto limitate, nell′ordine di diverse migliaia di volte inferiore rispetto alle collagenasi comunemente utilizzate.
Caratteristiche e vantaggi
- Massima resa in termini di vitalità e quantità delle cellule isolate: grazie a una miscela di enzimi che possiede una minore attività di clostripaina e tripsina, oltre ad un contenuto ridotto di endotossine.
- Maggiore attività specifica della miscela enzimatica: grazie ad una maggiore purezza delle Collagenasi I + II (determinata mediante analisi HPLC).
- Migliore riproducibilità sperimentale: grazie alla maggiore uniformità da lotto a lotto.
- Maggiore sicurezza: grazie a un enzima che non contiene materie prime derivate da tessuti di mammiferi o uccelli.
Nota sulla preparazione
Stabilizzanti: calcio
Concentrazione di lavoro: concentrazione di lavoro di Liberase grado ricerca
Gli enzimi contenuti nella miscela Liberase hanno attività specifiche significativamente più elevate rispetto alle collagenasi tradizionali. Ciò significa che la concentrazione di lavoro degli enzimi purificati della miscela Liberase grado ricerca, espressa in mg/ml, sarà inferiore a quella della collagenasi tradizionale. Per orientarsi sulla concentrazione da utilizzare in una specifica applicazione verificare se l'applicazione è presente nell'elenco delle applicazioni Roche su www.collagenase.com e utilizzare la concentrazione consigliata.
Nel caso l'applicazione non fosse inclusa nell′elenco, per individuare la concentrazione iniziale da utilizzare si consiglia di partire da una concentrazione di Liberase TM grado ricerca di 0.08–0.28 Wünsch units/ml. L′obiettivo è quello di determinare la miglior concentrazione iniziale delle miscele enzimatiche Liberase grado ricerca. Tale concentrazione va considerata un punto di partenza: la concentrazione ottimale potrà variare a seconda della procedura utilizzata e delle differenze tra un lotto e l′altro a livello di collagenasi tradizionale.
Concentrazione di lavoro della collagenasi
Moltiplicare la concentrazione di lavoro della collagenasi precedente (in mg/ml) per la sua attività specifica (unità di Wünsch/mg, [come determinato sopra]), per ottenere le unità Wünsch/ml. Per calcolare la quantità di miscela enzimatica Liberase grado ricerca da utilizzare, moltiplicare innanzitutto la concentrazione di lavoro della collagenasi (in unità di Wünsch/mL) per il volume totale della soluzione enzimatica di lavoro, per ottenere l'attività totale della collagenasi necessaria (unità di Wünsch). Dividere quindi l'attività totale della collagenasi richiesta per la concentrazione dello stock di Liberase grado ricerca (“Ricostituzione e conservazione”). Il risultato ottenuto indica i millilitri di soluzione madre di miscela enzimatica Liberase grado ricerca da usare per la soluzione enzimatica di lavoro.
Condizioni di conservazione (soluzione di lavoro): Conservare la soluzione concentrata inutilizzata in aliquote monodose a temperature da -15 to -25 °C.
Nota: evitare congelamenti e scongelamenti ripetuti!
Concentrazione di lavoro: concentrazione di lavoro di Liberase grado ricerca
Gli enzimi contenuti nella miscela Liberase hanno attività specifiche significativamente più elevate rispetto alle collagenasi tradizionali. Ciò significa che la concentrazione di lavoro degli enzimi purificati della miscela Liberase grado ricerca, espressa in mg/ml, sarà inferiore a quella della collagenasi tradizionale. Per orientarsi sulla concentrazione da utilizzare in una specifica applicazione verificare se l'applicazione è presente nell'elenco delle applicazioni Roche su www.collagenase.com e utilizzare la concentrazione consigliata.
Nel caso l'applicazione non fosse inclusa nell′elenco, per individuare la concentrazione iniziale da utilizzare si consiglia di partire da una concentrazione di Liberase TM grado ricerca di 0.08–0.28 Wünsch units/ml. L′obiettivo è quello di determinare la miglior concentrazione iniziale delle miscele enzimatiche Liberase grado ricerca. Tale concentrazione va considerata un punto di partenza: la concentrazione ottimale potrà variare a seconda della procedura utilizzata e delle differenze tra un lotto e l′altro a livello di collagenasi tradizionale.
Concentrazione di lavoro della collagenasi
Moltiplicare la concentrazione di lavoro della collagenasi precedente (in mg/ml) per la sua attività specifica (unità di Wünsch/mg, [come determinato sopra]), per ottenere le unità Wünsch/ml. Per calcolare la quantità di miscela enzimatica Liberase grado ricerca da utilizzare, moltiplicare innanzitutto la concentrazione di lavoro della collagenasi (in unità di Wünsch/mL) per il volume totale della soluzione enzimatica di lavoro, per ottenere l'attività totale della collagenasi necessaria (unità di Wünsch). Dividere quindi l'attività totale della collagenasi richiesta per la concentrazione dello stock di Liberase grado ricerca (“Ricostituzione e conservazione”). Il risultato ottenuto indica i millilitri di soluzione madre di miscela enzimatica Liberase grado ricerca da usare per la soluzione enzimatica di lavoro.
Condizioni di conservazione (soluzione di lavoro): Conservare la soluzione concentrata inutilizzata in aliquote monodose a temperature da -15 to -25 °C.
Nota: evitare congelamenti e scongelamenti ripetuti!
Ricostituzione
Ricostituire l′enzima liofilizzato con acqua sterile iniettabile o tampone di dissociazione tissutale. Al tampone di dissociazione non vanno aggiunti né siero né altri componenti, quali l′albumina o gli inibitori delle proteasi. La stabilità dell'enzima si riduce con l'aumentare della concentrazione e della temperatura (4 °C). Tali condizioni sono quindi entrambe da evitare
Ricostituire l'intero flaconcino. Non pesare singole aliquote di liofilizzato. L′attività enzimatica viene ridotta dall′entrata di umidità nella fiala.
Per reidratare l'enzima liofilizzato mettere il flacone in ghiaccio
Agitare delicatamente la fiala a 2-8 °C fino a completa dissoluzione dell'enzima (max.30 min).
A seconda del tipo di tampone di dissociazione tissutale utilizzato per risospendere le miscele enzimatiche purificate Liberase grado ricerca, si può formare del precipitato. Questo si dissolve con facilità nella soluzione di lavoro diluita e non ha alcuna influenza sull'attività enzimatica.
Per preparare la soluzione di lavoro utilizzare un'aliquota della soluzione madre.
Volume di ricostituzione
2 mL (1 flacone da 5 mg, - 10 mg a confezione ), 10 mL (1 flacone da 50 mg, - 100 mg a confezione
Unità di collagenasi Wünsch (unità/mL)
13 (1 flacone da 5 mg, - 10 mg a confezione), 26 (1 flacone da 50 mg, - 100 mg a confezione)
Concentrazione totale collagenasi [mg/mL]
2,5 (1 flacone da 5 mg, - 10 mg a confezione), 5,0 (1 flacone da 50 mg, - 100 mg a confezione)
Ricostituire l'intero flaconcino. Non pesare singole aliquote di liofilizzato. L′attività enzimatica viene ridotta dall′entrata di umidità nella fiala.
Per reidratare l'enzima liofilizzato mettere il flacone in ghiaccio
Agitare delicatamente la fiala a 2-8 °C fino a completa dissoluzione dell'enzima (max.30 min).
A seconda del tipo di tampone di dissociazione tissutale utilizzato per risospendere le miscele enzimatiche purificate Liberase grado ricerca, si può formare del precipitato. Questo si dissolve con facilità nella soluzione di lavoro diluita e non ha alcuna influenza sull'attività enzimatica.
Per preparare la soluzione di lavoro utilizzare un'aliquota della soluzione madre.
Volume di ricostituzione
2 mL (1 flacone da 5 mg, - 10 mg a confezione ), 10 mL (1 flacone da 50 mg, - 100 mg a confezione
Unità di collagenasi Wünsch (unità/mL)
13 (1 flacone da 5 mg, - 10 mg a confezione), 26 (1 flacone da 50 mg, - 100 mg a confezione)
Concentrazione totale collagenasi [mg/mL]
2,5 (1 flacone da 5 mg, - 10 mg a confezione), 5,0 (1 flacone da 50 mg, - 100 mg a confezione)
Stoccaggio e stabilità
Tenere il contenitore ben chiuso in luogo asciutto e ben ventilato.
Altre note
Esclusivamente per ricerche di life science. Non usare a scopo diagnostico.
Note legali
Liberase is a trademark of Roche
Comunemente ordinati con questo prodotto
N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Classi di pericolo
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Organi bersaglio
Respiratory system
Codice della classe di stoccaggio
11 - Combustible Solids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Punto d’infiammabilità (°F)
does not flash
Punto d’infiammabilità (°C)
does not flash
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