Tris
Tris, określany również jako THAM (Tris(hydroksymetylo)aminometan), jest białym krystalicznym proszkiem. Bufor Tris ma pKa około 8,1 w temperaturze 25°C, co czyni go dobrym wyborem dla większości procesów biologicznych w zakresie pH 7-9. W porównaniu do innych specjalistycznych buforów, takich jak HEPES, proszek tris jest opłacalną i bardziej wytrzymałą opcją.
Roztwory buforowe tris są przygotowywane poprzez rozpuszczenie zasady tris w wodzie i dostosowanie pH za pomocą kwasu, zazwyczaj kwasu solnego lub kwasu siarkowego. Powstały roztwór służy jako niezawodny regulator pH i stabilizator w różnych warunkach eksperymentalnych, w tym w biochemii białek, biologii molekularnej i enzymologii, a także w technikach takich jak elektroforeza, Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) i procesy chromatograficzne. Również w hodowli komórkowej bufor tris pomaga w utrzymaniu optymalnego środowiska pH niezbędnego do wzrostu komórek, proliferacji i utrzymania warunków fizjologicznych w podłożach do hodowli komórkowej.
Bufor Tris jest dostępny w różnych formach, w tym w postaci gotowych roztworów lub proszku, dzięki czemu jest wygodny do użytku laboratoryjnego.
Tris HCl
Tris HCl lub chlorowodorek tris (znany również jako Trizma HCl) to środek buforujący (bufor kwasowy) powszechnie stosowany w biologii molekularnej i biochemii do regulacji pH roztworu lub stabilizacji pH. Podobnie jak zasada tris, tris HCl jest również białym krystalicznym proszkiem o wzorze cząsteczkowym C4H12ClNO3 i nieco wyższej masie cząsteczkowej 157,60. Kluczowe rozróżnienie polega na dodaniu kwasu solnego do zasady tris, w wyniku czego powstaje Tris HCl. Podczas gdy zasada Tris ma pKa około 8,1, co pozwala jej działać jako bufor w zakresie pH 7-9, Tris HCl zawiera już kwas solny. Ten dodatek obniża pH, dzięki czemu Tris HCl nadaje się do buforowania w zakresie pH 7,0-8,6,
Zasada Tris służy jako wszechstronny bufor w szerokim zakresie pH, podczas gdy Tris HCl oferuje bardziej specyficzny zakres pH ze względu na zawartość kwasu solnego. Wybór między Tris i Tris HCl zależy od pożądanego zakresu pH i konkretnych potrzeb eksperymentalnych lub aplikacyjnych.
Sól fizjologiczna buforowana Tris (TBS)
Sól fizjologiczna buforowana Tris (TBS) jest buforem powszechnie używanym w zastosowaniach biologicznych i biochemicznych. Zazwyczaj zawiera Tris(hydroksymetylo)aminometan lub w skrócie Tris, środek buforujący, który utrzymuje stałe pH, oraz chlorek sodu, który zapewnia niezbędną siłę jonową. TBS ma stosunkowo neutralne pH (około 7,4) i jest szeroko stosowany w aplikacjach takich jak Western blotting, immunohistochemia i testy ELISA. TBS jest również używany jako bufor płuczący do usuwania niezwiązanych przeciwciał lub innych odczynników z próbki. Stężenie Tris i chlorku sodu może się różnić w zależności od konkretnego zastosowania, ale powszechnie stosowanym składem jest 50 mM Tris i 150 mM chlorku sodu.
Bufor octanowy Tris EDTA (TAE)
Bufor TAE jest kolejnym powszechnie stosowanym buforem w biologii molekularnej, elektroforezie oraz do blottingu północnego i południowego. W buforze TAE tris działa jako środek buforujący, kwas octowy przyczynia się do zdolności buforowania, a EDTA (kwas etylenodiaminotetraoctowy) działa jako środek chelatujący. TAE jest szeroko stosowany jako bufor roboczy w elektroforezie w żelu agarozowym, analizie fragmentów DNA, elektroforezie w żelu pulsacyjnym (w celu określenia wielkości fragmentów DNA), elektroforezie RNA i transferze kwasów nukleinowych.
Bufor Tris Borate EDTA (TBE)
Bufor TBE jest szeroko stosowany do rozdzielania i analizy fragmentów DNA, szczególnie w celu uzyskania wyższej rozdzielczości w rozdzielaniu mniejszych fragmentów DNA. W buforze TBE kwas borowy odgrywa znaczącą rolę w utrzymaniu zdolności buforowania roztworu. Bufor TBE znajduje zastosowanie w różnych technikach, w tym w elektroforezie w żelu agarozowym, sekwencjonowaniu DNA, analiza produktu reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR), analiza oligonukleotydów, elektroforeza w żelu denaturującym i elektroforeza w żelu natywnym.
Bufor tris-glicyny
Bufor tris-glicyny jest powszechnie stosowanym systemem buforowania w biologii molekularnej, szczególnie w elektroforezie białek. W buforze tris-glicynowym glicyna znacząco przyczynia się do zdolności buforowania roztworu i pomaga w osiągnięciu pożądanego poziomu pH. Wartość pH buforu można regulować poprzez dodanie HCl. Bufor tris-glicynowy jest stosowany do ponownego zawieszania próbek białek, rozcieńczania ekstraktów białkowych do późniejszej analizy lub przechowywania i jest szczególnie przydatny w technikach elektroforezy białek niedenaturujących, w których kluczowe znaczenie ma utrzymanie natywnej konformacji białek. Służy również do ogniskowania izoelektrycznego i działa jako środek buforujący w różnych eksperymentach z białkami.
Bufor tris-glicyna-siarczan dodecylu sodu (SDS)
Bufor tris-glicyna-SDS służy jako standardowy bufor do SDS-PAGE, techniki wykorzystywanej do rozdzielania i analizy białek na podstawie ich masy cząsteczkowej. Bufor ten jest stosowany do kwantyfikacji białek, denaturacji białek, western blottingu oraz jako część procesu przygotowania próbki do późniejszej analizy.
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?