蛋白質濃度與緩衝液交換

蛋白濃縮和緩衝液交換常用於蛋白質和抗體純化、生物處理和蛋白組分析工作流程中。蛋白質、酵素、抗體和病毒等大分子溶液的樣品製備過程中,通常會在緩衝液中產生大量與下游製程或檢測不相容的稀釋蛋白質和其他生物大分子。在樣品萃取後,稀釋的蛋白質通常需要在分析或使用前進行濃縮和澄清。
功能分類
蛋白質濃縮
蛋白質濃縮有幾種方法,包括使用多孔膜過濾器過濾、在高滲透溶液中透析,以及沉澱/鹽析。超濾提供了一種方便的方法,利用半透膜在壓力或離心力下濃縮蛋白質,將蛋白質的變性、失活和降解降至最低。使用此技術,多餘的液體可通過過濾器,而目標蛋白質則被保留下來,藉由減少樣品體積增加蛋白質濃度。
蛋白質濃縮
在蛋白質濃縮過程中,生物樣品中特定群組或類型的蛋白質會被濃縮,以便進一步分析。蛋白質富集方法可用於分離低豐度蛋白質並降低樣本的複雜性。富集可分離並濃縮目標蛋白質,以改善下游蛋白組分析。
緩衝液交換和脫鹽
富集的蛋白質通常需要轉移到合適的緩衝液中進行進一步分析。緩衝液交換、脫鹽和去洗劑的方法包括:
- 透析:根據鹽分、洗滌劑、溶劑等小滲透分子和其他雜質通過膜的能力來去除它們。
- 柱層析:使用凝膠過濾柱去除鹽分,該柱依靠尺寸排除進行分離。
- 過濾:在壓力或離心力作用下,使用多孔超濾膜,根據分子大小去除鹽分、清潔劑和其他雜質。
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