緩衝參考中心

• 選定生物緩衝液的 pH 值範圍圖 (25 °C, 0.1 M)
• Tris 或 Trizma^® Buffer Preparation - pH vs.溫度
• 磷酸緩衝液製備 - 0.2 M 溶液
• Citric Acid - Na₂HPO₄ Buffer Preparation, pH 2.6-7.6
• 柠檬酸 - 柠檬酸钠缓冲液制剂，pH 3.0-6.2
• 醋酸鈉 - 醋酸緩衝液製劑，pH 3.7-5.6
• Na₂HPO₄ - NaH₂PO₄ Buffer Preparation, pH 5.8-8.0 at 25 °C
• Imidazole (glyoxaline) - HCl Buffer Preparation, pH 6.2-7.8 at 25 °C
• 碳酸鈉 - 碳酸氫鈉緩衝液製劑，pH 9.2-10.8
• 緩衝液製備公式和方程式

選擇正確的生物緩衝液

根據您的 pH 值要求以及 pKa（一種酸強度計量方法，考慮了 pH 值、濃度和溫度）來選擇緩衝液。此外，還應該考慮您的確切應用的法規或純度需求。以下表格可協助您根據 pH 值和 pKa 來製備許多常見的緩衝液。

除了以下表格之外，我們還開發了幾個 緩衝液配方計算機，以協助您製備緩衝液。

用於凝膠電泳的TBE和TAE的配方稍微複雜一些。

什麼是緩衝液等級？

緩衝液等級表示適合不同用途的品質和雜質等級。我們提供六種等級的緩衝液，分別適用於一般實驗室用途、最終藥物配方和製造，以及可能需要痕量金屬測試或特定純度材料的兩者之間的應用。

選定生物緩衝液的有用 pH 值範圍圖表 (25 °C, 0.1 M)

可用 pH 值範圍	pKa (at 20 °C)	pKa (at 25 °C)	pKa (at 25 °C)	pKa	pKa (at 37 °C)	試劑級<	生物性能認證級
MES	5.5-6.7	6.16	6.10	5.97	M8250	M2933
Bis-Tris	5.8-7.2	n/a	6.50	6。36	B9754	B4429
ADA	6.0-7.2	6.65	6.59	6.46	A9883	n/a
ACES	6.1-7.5	6.88	6.78	6.54	A9758	A3594
管徑	6.1-7.5	6.80	6.76	6.66	P6757	P1851
MOPSO	6.2-7.6	n/a	6.90	6.75	M8389	n/a
Bis-Tris Propane	6.3-9.5	n/a	6.8, 9.0	n/a	B6755	B4679
BES	6.4-7.8	7.17	7.09	6.90	B9879	B4554
MOPS	6.5-7.9	7.28	7.20	7.02	M1254	M3183
TES	6.8-8.2	7.50	7.40	7.16	T1375	T5691
HPES	6.8-8.2	7.55	7.48	7.31	H3375	H4034
DIPSO	7.0-8.2	n/a	7.60	7.35	n/a	n/a
MOBS	6.9-8.3	n/a	7.60	n/a	M3295	n/a
TAPSO	7.0-8.2	n/a	7.60	7.39	T9269	n/a
Tris 或 Trizma®	7.0-9.0	8.20	8.06	7.72	T1503	T6066
HEPPSO	7.1-8.5	n/a	7.80	6.66	n/a	n/a
POPSO	7.2-8.5	n/a	7.80	7.63	P3405	n/a
TEA	7.3-8.3	n/a	7.80	n/a	n/a	n/a
EPPS	7.3-8.7	n/a	8.00	n/a	E9502
EPPS	7.3-8.7	n/a	8.E0276
Tricine	7.4-8.8	8.16	8.05	7.80	T0377	T5816
Gly-Gly	7.5-8.9	n/a	8.20	n/a	G1002	G3915
Bicine	7.6-9.0	8.35	8.26	8.04	B3876	n/a
HEPBS	7.6-9.0	n/a	8.30	n/a	H6903<	n/a
TAPS	7.7-9.1	8.49	8.40	8.18	T5130	T5316
AMPD	7.8-9.7	n/a	8.80	n/a	A9754	n/a
TABS	8.2-9.6	n/a	8.90	n/a	n/a	n/a
AMPSO	8.3-9.7	n/a	9.00	9.10	A6659	n/a
CHES	8.6-10.0	9.55	9.49	9.36	C2885	n/a
CAPSO	8.9-10.3	n/a	9.60	9.43	C2278	n/a
AMP	9.0-10.5	n/a	9.70	n/a	n/a	n/a
CAPS	9.7-11.1	10.56	10.40	10.02	C2632	n/a
CABS	10.0-11.4	n/a	10.70	n/a	C5580	n/a

Tris 或 Trizma^® 緩衝液製備表 - pH 與溫度的關係

。

pH at Temperature
5 °C	25 °C	37 °C
7.76	7.20	6.91
7.89	7。30	7.02
7.97	7.40	7.12
8.07	7.50	7.22
8.18	7.60	7.30
8.26	7.70	7.40
8。37	7.80	7.52
8.48	7.90	7.62
8.58	8.00	7.71
8.68	8.10	7.80
8.78	8.20	7.91
8.88	8.30	8.01
8.98	8.40	8.10
9.09	8.50	8.22
9。18	8.60	8.31
9.28	8.70	8.42
9.36	8.80	8.51
9.47	8.90	8.62
9.56	9.00	8.70

g/L for 0.05 M 溶液
Trizma® HCL	Trizma® Base
7.02	0.67
6.85	0.80
6.61	0.97
6.35	1.18
6.06	1.39
5.72	1.66
5.32	1。97
4.88	2.30
4.44	2.65
4.02	2.97
3.54	3.34
3.07	3.70
2.64	4.03
2.21	4。36
1.83	4.65
1.50	4.90
1.23	5.13
0.96	5.32
0.76	5.47

磷酸緩衝液製備表 - 0.2 M 溶液  

Potassium  Phosphate Monobasic Anhydrous g/L	Sodium Phosphate Dibasic Heptahydrate g/L	23 °C pH
22.4	3.49	5.7
22.08	4.29	5.8
21.60	5.37	5.9
21.05	6.60	6.0
20.40	8.05	6.1
19.56	9.93	6.2
18.60	12.07	6.3
17.64	14.22	6.4
16.44	16.90	6.5
15.00	20.12	6.6
13.56	23.34	6.7
12.24	26.29	6.8

Potassium Phosphate Monobasic Anhydrous g/L	Sodium Phosphate Dibasic Heptahydrate g/L	23 °C pH
10.80	29.51	6.9
9.36	32.73	7.0
7.92	35.95	7.1
6.72	38.63	7.2
5.52	41.31	7.3
4.56	43.46	7.4
3.84	45.07	7.5
3.12	46.68	7.6
2.52	48.55	7.7
2.04	49.09	7.8
1.68	49.89	7.9
1.27	50.81	8.0

Citric Acid - Na₂HPO₄ Buffer Preparation, pH 2.6-7.6¹

一水檸檬酸，C₆H₈O₇ - H₂O，MW 210.14；0.1 M 含 21.01 g/L。Na₂HPO₄, MW 141.98; 0.2 M 含 28.40 g/L, 或 Na₂HPO₄ - 2H₂O, MW 178.05; 0.2 M 含 35.61 g/L.

x mL 0.1 M-檸檬酸和 y mL 0.2 M-Na₂HPO₄ 混和

pH	x mL 0.1 M-citric acid	y mL 0.2-Na2HPO4
2.6	89.10	10.90
2.8	84.15	15.85
3.0	79.45	20.55
3.2	75.30	24.70
3.4	71.50	28.50
3.6	67.80	32.20
3.8	64.50	35.50
4.0	61.45	38.55
4.2	58.60	41.40
4.4	55.90	44.10
4.6	53.25	46.75
4.8	50.70	49.30
5.0	48.50	51.50
5.2	46.40	53.60
5.4	44.25	55.75
5.6	42.00	58.00
5.8	39.55	60.45
6.0	36.85	63.15
6.2	33.90	66.10
6.4	30.75	69.25
6.6	27.25	72.75
6.8	22.75	77.25
7.0	17.65	82.35
7.2	13.05	86.95
7.4	9.15	90.85
7.6	6.35	93.65

Citric Acid - Sodium Citrate Buffer Preparation, pH 3.0-6.2¹

一水檸檬酸，C₆H₈O₇ - H₂O，MW 210.14；0.1 M 含 21.01 g/L。二水檸檬酸三鈉，C₆H₅O₇Na₃ - 2H₂O，MW 294.12; 0.1 M 含 29.41 g/L.

x mL 0.1 M-檸檬酸和 y mL 0.1 M-檸檬酸三鈉混合

pH	x mL 0.1 M-citric acid	y mL 0.1 M-檸檬酸三鈉
3.0	82.0	18.0
3.2	77.5	22.5
3.4	73.0	27.0
3.6	68.5	31.5
3.8	63.5	36.5
4.0	59.0	41.0
4.2	54.0	46.0
4.4	49.5	50.5
4.6	44.5	55.5
4.8	40.0	60.0
5.0	35.0	65.0
5.2	30.5	69.5
5.4	25.5	74.5
5.6	21.0	79.0
5.8	16.0	84.0
6.0	11.5	88.5
6.2	8.0	92.0

醋酸鈉 - 醋酸緩衝液製劑，pH 3.7-5.6¹

三水醋酸钠，CH₃COONa - 3H₂O，MW 136.09；0.2 M 含 27.22 g/L.

x mL 0.2 M-NaOAc 和 y mL 0.2 M-HOAc 混合

。

pH, 18 °C	x mL 0.2 M-NaOAc	y mL 0.2 M-HOAc
3.7	10.0	90.0
3.8	12.0	88.0
4.0	18.0	82.0
4.2	26.5	73.5
4.4	37.0	63.0
4.6	49.0	51.0
4.8	59.0	41.0
5.0	70.0	30.0
5.2	79.0	21.0
5.4	86.0	14.0
5.6	91.0	9.0

Na₂HPO₄ - NaH₂PO₄ Buffer PREPARATION, pH 5.8-8.0 at 25 °C¹

Na₂HPO₄ - 2H₂O，MW 178.05；0.2 M 含 35.61 g/L。Na₂HPO₄ - 12H₂O，MW 358.22；0.2 M 含 71.64 g/L。NaH₂PO₄ - H₂O，MW 138.01；0.2 M 含 27.6 g/L。NaH₂PO₄ - 2H₂O, MW 156.03; 0.2 M 含 31.21 g/L.

x mL 0.2 M-Na₂HPO₄, y mL 0.2 M-NaH₂PO₄; 用 H₂O 稀釋至 100 mL

。

pH, 25 °C	x mL 0.2 M-Na2HPO4	y mL 0.2 M-NaH2PO4
5.8	4.0	46.0
6.0	6.15	43.85
6.2	9.25	40.75
6.4	13.25	36.75
6.6	18.75	31.25
6.8	24.5	25.5
7.0	30.5	19.5
7.2	36.0	14.0
7.4	40.5	9.5
7.6	43.5	6.5
7.8	45.75	4.25
8.0	47.35	2.65

Imidazole (glyoxaline) - HCl Buffer PREPARATION, pH 6.2-7.8 at 25 °C¹

咪唑，C₃H₄N₂，MW 68.08

25 mL 0.2 M-咪唑（13.62 g/L），x mL 0.2 M-HCl，用 H₂O 稀釋至 100 mL

。

pH, 25 °C	x mL 0.2 M-HCl
6.2	21.45
6.4	19.9
6.6	17.75
6.8	15.2
7.0	12.15
7.2	9.3
7.4	6.8
7.6	4.65
7.8	3.0

Sodium Carbonate - Sodium Bicarbonate Buffer PREPARATION, pH 9.2-10.8¹

Na₂CO₃ - 10H₂O，MW 286.2；0.1 M 含 28.62 g/L。NaHCO₃, MW 84.0; 0.1 M 含 8.40 g/L.

x mL 0.1 M-Na₂CO₃ 和 y mL 0.1 M-Na₂HCO₃ 混合

x mL 0.

20 °C	37 °C
x mL 0.1 M-Na2CO3	y mL 0.1 M-Na2HCO3
9.2	8.8	10	90
9.4	9.1	20	80
9.5	9.4	30	70
9.8	9.5	40	60
9.9	9.7	50	50
10.1	9.9	60	40
10.3	10.1	70	30
10.5	10.3	80	20
10.8	10.6	90	10

緩衝液製備公式與方程式

重量百分比 (w/v)

(所需緩衝液百分比 / 100) × 緩衝液最終體積 (mL) = 所需起始材料的克數。

摩爾溶液

所需摩爾數 × 配方重量 × 溶液最終體積 (L) = 所需克數

Henderson-Hasselbach 方程

參考資料

1. Dawson R, Elliot D, Elliot W, Jones KM. 1986. Data for Biochemical Research. 3rd ed.. Oxford Science Publ..