R6513

リボヌクレアーゼA ウシ膵臓由来

for molecular biology, ≥70 Kunitz units/mg protein, lyophilized

• 別名: RNアーゼ, RNアーゼA, リボヌクレアーゼI, リボ核酸 3′-ピリミジノオリゴヌクレオチドヒドロラーゼ, 膵臓リボヌクレアーゼ
• CAS番号: 9001-99-4
• Enzyme Commission number: 3.1.27.5 (BRENDA, IUBMB)
• EC Number: 232-646-6
• MDL番号: MFCD00132181
• UNSPSCコード: 12352204
• NACRES: NA.53

特性

• グレード: for molecular biology
• 品質水準: 300
• 形状: lyophilized
• 比活性: ≥70 Kunitz units/mg protein
• 分子量: 13.7 kDa; ~13,700
• その他の活性: Exonuclease and endonuclease, none detected; NICKase and DNase, none detected
• 保管温度: −20°C
• InChI: 1S/C9H14N4O3/c10-2-1-8(14)13-7(9(15)16)3-6-4-11-5-12-6/h4-5,7H,1-3,10H2,(H,11,12)(H,13,14)(H,15,16)
• InChI Key: CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N

詳細

詳細

RNアーゼA は、ピリミジンヌクレオチドの 3′OH リン酸をアタックするエンドリボヌクレアーゼです。配列pG-pG-pC-pA-pGが切断されて、pG-pG-pCpとA-pGになります。一本鎖RNAに対して最も高い活性を示します。

RNアーゼA、すなわちリボヌクレアーゼAは、ピリミジンヌクレオチドの後でホスホジエステル結合の一本鎖RNAを切断するエンドリボヌクレアーゼです。RNアーゼAは3′リン酸末端を攻撃します（たとえば、pG-pG-pC-pA-pGが切断されて、pG-pG-pCpとA-pGになります)。一本鎖RNAに対して最も高い活性を示します。RNアーゼAは、4箇所でジスルフィド架橋された一本鎖ポリペプチドです。RNアーゼBとは異なり、糖タンパク質ではありません。DNAは環状中間体の形成に必要な2′-OH基を持たないため、リボヌクレアーゼはDNAを加水分解しません。また、RNアーゼAは、タンパク質サンプル中のRNAを加水分解できます。RNアーゼAは、His12とHis119のアルキル化によって阻害され、カリウム塩およびナトリウム塩によって活性化されます。RNアーゼは、重金属イオン存在下で阻害されます。また、RNアーゼは、DNAによって競争的に阻害されます。

RNアーゼAは、4箇所でジスルフィド架橋された一本鎖ポリペプチドで、124個のアミノ酸から構成されています。RNアーゼBとは異なり、RNアーゼAは糖タンパク質ではありません。RNアーゼＡは、RNアーゼの活性部位に存在するHis¹²あるいはHis¹¹⁹のアルキル化によって阻害できます。RNアーゼA は、カリウムやナトリウム塩によって活性化されます。

アプリケーション

• RNアーゼAは、DNAプラスミド調製物、ゲノムDNA調製物およびタンパク質サンプルからRNAを除去するために使用されます。
• また、RNアーゼは、RNAの配列解析や保護アッセイにも使用されます。
• RNアーゼは、コンピューター支援薬物設計のためのツールとして使用されています。
• RNアーゼAは、RNA配列解析に役立ちます。
• RNアーゼAは、タンパク質サンプル中のRNAを加水分解します。
• DNA精製にRNアーゼAが寄与します。

ウシ脾臓由来のリボヌクレアーゼAは、以下の用途に使用されています：

• プラスミドDNAの精製
• 核の染色中に二本鎖RNAの染色を消化・回避するため
• 免疫ペルオキシダーゼおよび免疫蛍光検出
• フローサイトメトリーに供する細胞を処理するため
• In situハイブリダイゼーション後にFFPE組織セクションを洗浄するためのハイブリダイゼーション後バッファーの成分として
• 外膜タンパク質（OMP）抽出物の調製中に細胞を処理するため
• RNアーゼ保護アッセイ
• 非特異的に結合したRNAの除去
• RNA配列の解析
• タンパク質サンプルに含まれるRNAの加水分解

特徴および利点

安定性が高いメルクのリボヌクレアーゼA（RNアーゼA）は、RNA除去、RNAシーケンシング、およびDNA精製に適しています。

アナリシスノート

Eにより測定したタンパク質。

その他情報

RNアーゼA の主なアプリケーションは、プラスミド DNA サンプルからの RNA の除去です。このアプリケーションでは、DNアーゼ フリー RNアーゼA が、最終濃度 10 μg/mL で使用されます。

残存 DNアーゼ の不活化のために本 RNアーゼA 製品の煮沸ストック溶液は必要なく、RNアーゼ の沈殿や酵素活性の損失を引き起こす場合があります。RNアーゼA 溶液を中性 pH で加熱した場合、沈殿が生じます。より低い pH で加熱した場合は、存在するタンパク質不純物により、多少の沈殿が生じることがあります。

RNアーゼA は、カリウムやナトリウム塩によって活性化されます。 RNアーゼA は、His12 または His119 のアルキル化によって阻害されます。

安全性情報

• ピクトグラム: GHS08
• シグナルワード: Danger
• 危険有害性情報: H334
• 注意書き: P261 - P284 - P501
• 危険有害性の分類: Resp. Sens. 1
• 保管分類コード: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• 引火点(°F): Not applicable
• 引火点(℃): Not applicable
• 個人用保護具 (PPE): Eyeshields, Gloves, type N95 (US)