Both Cas9-GFP and eSpCas9-GFP exhibit similar transfection rates in terms of efficiency. However, in terms of editing activity, Cas9-GFP has greater activity than eSpCas9-GFP. The eSpCas9-GFP variant, while more specific, compromises on activity, particularly noticeable with difficult-to-edit targets. The eSpCas9 variant is suitable when high specificity is a priority, the target is relatively easy to modify, and the model system can effectively recover after transfection to enable the isolation of a decreased population of edited cells.
ECAS9GFPPR
eSpCas9-GFPタンパク質
from Streptococcus pyogenes with mutations conferring enhanced specificity, fused with enhanced GFP, recombinant, expressed in E. coli, 3X NLS
別名:
eSpCas9-EGFP, eSpCas9-GFP
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50 μG
￥47,600
250 μG
￥95,700
About This Item
UNSPSCコード:
12352202
NACRES:
NA.51
おすすめの製品
リコンビナント
expressed in E. coli
アッセイ
≥90% (SDS-PAGE)
フォーム
lyophilized powder
包装
pkg of 1 kit (3 components)
レポーター遺伝子
GFP
輸送温度
wet ice
保管温度
−20°C
詳細
特異性が向上したStreptococcus pyogenes由来の遺伝子組換えCas9-GFPタンパク質（約192 KD）は、ゲノム編集実験にすぐに使用できる試薬です。標的特異的なガイドRNAと併用すると、eSpCas9-GFPタンパク質は、培養細胞のトランスフェクションや、一細胞胚注入を介する遺伝子改変動物の迅速作成に適した、標的ヌクレアーゼとして働きます。
励起ピークが488 nm、発光ピークが509 nmのN末端に融合した増強型緑色蛍光タンパク質により、フローサイトメトリーアプリケーションの実用性に加えて、トランスフェクトされたRNP複合体を可視化できます。 本タンパク質は、最適な活性のために配置された3つの異なる核局在配列も含みます。
励起ピークが488 nm、発光ピークが509 nmのN末端に融合した増強型緑色蛍光タンパク質により、フローサイトメトリーアプリケーションの実用性に加えて、トランスフェクトされたRNP複合体を可視化できます。 本タンパク質は、最適な活性のために配置された3つの異なる核局在配列も含みます。
アプリケーション
- 機能ゲノミクス
- ターゲットバリデーション
- ゲノム編集
- 蛍光顕微鏡検査
- フローサイトメトリー
特徴および利点
- 野生型Cas9よりも強化された特異性
- 高活性
- 注入／トランスフェクトにすぐ使用できます
包装
50 μg（≥260 pmol）入り
250 μg（≥1300 pmol）入り
250 μg（≥1300 pmol）入り
構成
各キットは以下で構成されています：
- 凍結乾燥したeSpCas9-GFP遺伝子組換えタンパク質の1バイアル
- 1 mLの1倍希釈バッファー1バイアル
- 1 mLのグリセロール含有ヌクレアーゼフリー水1バイアル
原理
CRISPR/Cas系は、細菌および古細菌において、侵入するウイルスやプラスミドに対する防御として働いています。近年、単一Cas9タンパク質とノンコーディングのガイドRNA（gRNA）という2つの分子成分を用いて、真核細胞系で機能する、細菌Streptococcus pyogenes由来のII型CRISPR/Cas系が作られています。Cas9エンドヌクレアーゼを単一gRNAによりプログラムして、希望するゲノム位置でDNA二本鎖切断（DSB）を発生させることができます。ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ZFN）によって誘導されるDSBと同様に、細胞は続いて、非相同末端結合（NHEJ）または相同組換え修復（HDR）のいずれかの内因性DNA修復過程を活性化し、標的DSBを修復します。
新たに遺伝子操作されたeSpCas9 (1.1)は確立されたCRISPRシステムの効率的なターゲット遺伝子の編集を可能にし、オフターゲット効果減少のベネフィットが得られます。Slaymakerらが述べたとおり、SpCas9の染色体結合モチーフでの点変異（K848A/K1003A/R1060A）はオンターゲットのフィデリティを向上させ、切断効率を低下させません。
新たに遺伝子操作されたeSpCas9 (1.1)は確立されたCRISPRシステムの効率的なターゲット遺伝子の編集を可能にし、オフターゲット効果減少のベネフィットが得られます。Slaymakerらが述べたとおり、SpCas9の染色体結合モチーフでの点変異（K848A/K1003A/R1060A）はオンターゲットのフィデリティを向上させ、切断効率を低下させません。
再構成
特異性が向上した凍結乾燥S. pyogenes eSpCas9-GFPタンパク質は、希望する濃度になるまで溶解液に再懸濁してください。チューブを穏やかに叩いて凍結乾燥粉末を完全に溶解させ、氷上で10分間インキュベートし、チューブを遠心して材料をチューブの底に移動させます。
その他情報
gRNAの注文には、弊社のCRISPR選択ツールをご使用ください
弊社の他のMISSION® Cas9 Proteins（ミッションCas9タンパク質）については、SigmaAldrich.com/CRISPRproteinsでご確認ください。
弊社の他のMISSION® Cas9 Proteins（ミッションCas9タンパク質）については、SigmaAldrich.com/CRISPRproteinsでご確認ください。
保管分類コード
11 - Combustible Solids
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
毒物及び劇物取締法
キットコンポーネントの情報を参照してください
PRTR
キットコンポーネントの情報を参照してください
消防法
キットコンポーネントの情報を参照してください
労働安全衛生法名称等を表示すべき危険物及び有害物
キットコンポーネントの情報を参照してください
労働安全衛生法名称等を通知すべき危険物及び有害物
キットコンポーネントの情報を参照してください
カルタヘナ法
キットコンポーネントの情報を参照してください
Jan Code
キットコンポーネントの情報を参照してください
最新バージョンのいずれかを選択してください：
試験成績書（COA）
Lot/Batch Number
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資料
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プロトコル
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アクティブなフィルタ
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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