Poli-L-lizin sejtmegkötési protokoll

A sejtek rögzítése egy felülethez poli-lizin segítségével

A poli-L-lizin a sejtek nem specifikus kötődési faktora, és hasznos a sejtek szilárd szubsztrátokhoz való tapadásának elősegítésére a sejtmembrán negatív töltésű ionjai és a tenyésztési felület közötti elektrosztatikus kölcsönhatás fokozásával. A tenyésztési felületre történő felszívódás után a poli-lizin növeli a pozitív töltésű sejtkötőhelyek számát. Az alábbi protokoll a P4707*, P4832*, P7280, P6407, P7405, P9155, P6282 és P5899 termékszámúakra vonatkozik. 

Az optimális feltételeket minden sejtvonal és alkalmazás esetében meg kell határozni.

1. Adjon 50 ml steril szövettenyésztési minőségű vizet 5 mg poli-lizinhez.
2. Aseptikusan vonja be a tenyésztési felületet 1,0 ml/25 cm²2  (csak). Óvatosan ringassa, hogy biztosítsa a tenyésztési felület egyenletes bevonatát.
3. 5 perc elteltével szívással távolítsa el az oldatot, és alaposan öblítse le a felületet steril szövettenyésztési minőségű vízzel.
4. A sejtek és a táptalaj bevezetése előtt legalább 2 órán át hagyja száradni.

*JEGYZET: Az 1. lépés nem szükséges a poli-lizin oldatok (P4707 és P4832) esetében.