Folyamat és termék szennyeződések
A mAb-gyártási folyamatban számos szennyeződés van jelen, vagy keletkezik a gyártási folyamat során, beleértve a folyamat vagy a termék szennyeződéseit, amelyek kisiklathatják a bioterápia fejlesztési programját. Szerencsére többéves tapasztalattal rendelkezünk a K+F és GMP környezetben végzett vizsgálatok elvégzésében, támogatva az adatigényeket a fejlesztési ciklus minden fázisában. A legmodernebb műszerekkel és gyors átfutási idővel megbízható eredményeket biztosítunk, hogy projektjét előrevigyük.
A technológiai szennyeződések értékelése
A következő technológiai szennyeződések vizsgálatára vonatkozó vizsgálati igények kielégítésére kínálunk vizsgálati családokat, amelyek a technológiai szennyeződésekre, a gazdasejt fehérjére és DNS-re, valamint a technológiai adalékanyagokra terjednek ki.
Gazdasejt szennyeződések: A mAb gyártása során a hatóanyag kifejezésére használt gazdasejtből technológiai szennyeződések keletkezhetnek. A bioterápiákban ppm-szinten jelen lévő gazdasejtfehérje (HCP) szennyeződések jelentős immunogenitási kockázatot jelentenek, mivel kiszámíthatatlan immunválaszt válthatnak ki a betegekben. Összetett és változatos természetük miatt nehéz kimutatni vagy nyomon követni őket. Mivel a gazdaszervezet maradék DNS-ére vonatkozó elfogadási kritériumokat általában nagyon alacsony szinten határozzák meg (gyakran ≤1,0 pg DNS per mg hatóanyag), a hatékony eltávolítási technikák és az érzékeny kimutatási módszerek kritikus fontosságúak.
Gyártási adalékanyagok: A mAb fejlesztése és gyártása során a gyártási adalékanyagok széles skáláját kell nyomon követni. Ezek közé tartoznak a detergensek, a Protein A, a transzfekciós reagensek, az antibiotikumok, a habzásgátlók és a növekedési faktorok."
Mikrobiális akkumulátor: Sok mAb-t mikrobiális szervezetekben állítanak elő a gyors növekedési sebesség és a nagy hozam érdekében, ezért fontos a mikrobiális szennyeződések jelenlétének nyomon követése és ellenőrzése. A Gram-negatív baktériumok sejtfalának endotoxinnak nevezett összetevője a láztól és hidegrázástól a halálos szeptikus sokkig terjedő reakciókat vált ki. Ennek eltávolítása a mAb-ből nem csak kritikus, hanem szabályozási követelmény is. A biológiai terheltség vizsgálatát a teljes mAb-gyártási folyamat során alkalmazni kell, és a sterilitás vizsgálata is fontos a mAb-gyártás integritásának tájékoztatásához.
A termék szennyeződések értékelése
A következő termék szennyeződések vizsgálati igényeinek kielégítése érdekében a termék szennyeződések vizsgálati családjaink méretváltozatok, töltésváltozatok vagy mikrobiológia (életképes vagy nem életképes) szerint vannak felépítve.
Töltési variánsok: A gyártási folyamat során a poszttranszlációs módosítások (PTM) eredményeként, vagy a tisztítás és tárolás során bekövetkező kémiai módosítások miatt előforduló töltési variánsok jelentős hatással lehetnek a mAb biológiai aktivitására és farmakokinetikájára. A töltésváltozatok elemzése a mAb-kre vonatkozó szabályozási követelmény, olyan technikák alkalmazásával, mint a kationcserés kromatográfia (CEX) és a kapilláris izoelektromos fókuszálás (cIEF).
Méreteloszlás: A kezdeti gyártási anyag gyakran tartalmaz méretváltozatokat, például aggregátumokat, fragmentumokat és további könnyű láncokat mutató biomolekulákat. Mivel ezek potenciálisan befolyásolhatják az immunogenitást és a hatékonyságot, fontos jelenlétük nyomon követése. A méretkizárásos kromatográfia (SEC) a leggyakrabban használt módszer a méreteloszlás értékelésére, de az olyan technikák, mint a dinamikus fényszórás (DLS) és a kapilláris elektroforézis nátrium-dodecil-szulfát gél (CE-SDS) is rendkívül informatívak.
Molekulasúly-elemzés: A molekulasúly a mAb-azonosság egyik fő mutatója, amelyet a könnyű és nehéz láncok jellege, valamint a PTM-ek befolyásolnak. A mAb molekulatömegét általában intakt tömeg (IM) elemzéssel értékelik, de a mAb molekulatömegét a nehézláncok deglikozilálásával is vizsgálni lehet, hogy a fehérje heterogenitásának egyik fő forrását eltávolítsák.
Szekvencia-térképezés: A mAb-azonosság meghatározására széles körben alkalmazott szekvencia-térképezési technika, a peptidtérképezés az egy enzimből álló peptidtérképek létrehozásától az olyan összetettebb elemzésekig terjed, mint az ütközéssel aktivált disszociációs (CAD) módszerek adatfüggő felvétele (DDA). Ez az információ N- vagy C-terminális szekvenálással vagy ionmobilitási spektrometriával bővíthető.
Módosítási elemzés: A gyártási folyamat során bekövetkező módosítások megismerése és ellenőrzése segít a konzisztens mAb-termék előállításában. Például az N-glikán feltérképezése tájékoztatást adhat a mAb stabilitásáról, bioaktivitásáról és immunogenitásáról, míg a szialinsav mennyiségi meghatározása kulcsfontosságú a túlzott szialiláció megelőzésében. Bölcs dolog a diszulfid-térképezést is elvégezni, mivel a gyártás által indukált diszulfid-redukció közismerten rossz hozamot eredményez a mAb-gyüjtés során.
Fizikai tulajdonságok vizsgálata: A gyártás során a mAb számos különböző fizikai tulajdonságát kell vizsgálni. Ezek közé tartozik a pH, a koncentráció és az ozmolalitás, amelyek mindegyike lényeges tulajdonság a konzisztens gyógyszerkészítmény előállításához.
Kapcsolódó termékforrások
Webinar: Webinar: Folyamatos szennyeződések: Ne hagyja, hogy a PEI vagy a HCP kisiklassa a bioterápiát
Az alábbi űrlap kitöltésével megbeszélheti szennyeződésvizsgálati igényeit, és megteheti a következő lépést bioterápiája jövőjének biztosítása érdekében.
Kapcsolódó videók
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?