Zobrazovací analýza a zobrazování živých buněk
Zobrazování a analýza živých buněk umožňuje vědcům studovat dynamické buněčné děje v reálném čase a získat tak jedinečné poznatky o biologii. Tyto techniky jsou na rozdíl od PCR, průtokové cytometrie a imunocytochemie a barvení tkání pomocí protilátek, které analyzují buněčné děje jako snímek. Zdokonalení kamer, fluorescenčních barviv pro živé buňky, fluorescenčních proteinů, komprese videa a časosběrné mikroskopie dnes posunulo naši schopnost vizualizovat a analyzovat živé buňky, jejich mezibuněčné interakce a subcelulární procesy s pozoruhodnými detaily a věrností.
Související technické články
- Buněčné testy pro buněčnou proliferaci (BrdU, MTT, WST1), životaschopnost buněk a experimenty cytotoxicity pro aplikace v oblasti rakoviny, neurověd a výzkumu kmenových buněk.
- Světluška luciferáza je citlivým reportérem pro genové studie, protože se v savčích buňkách nebo tkáních nevyskytuje.
- PKH and CellVue® Fluorescent Cell Linker Kits provide fluorescent labeling of live cells over an extended period of time, with no apparent toxic effects.
- Fluorescent calcium indicators and dyes to measure Ca+ flux used in calcium imaging experiments. Calcium ions (Ca2+) play vital cellular physiology roles in signal transduction pathways, in neurotransmitter release, in contraction of all muscle cell types, as enzyme cofactors, and in fertilization.
- Lipophilic cell tracking dyes enable cancer biologists to track tumor and immune cell functions both in vitro and in vivo. Read the article to choose a right membrane dye kit for cell tracking and proliferation monitoring.
- Zobrazit vše (36)
Související protokoly
- PKH dyes label exosomes for tracking experiments in vitro and in vivo, detailed protocol provided.
- Cell staining can be divided into four steps: cell preparation, fixation, application of antibody, and evaluation.
- ICC Cell Capture Imaging Reagent simplifies imaging, ideal for rare cell and low cell count samples.
- Toluidine blue selectively stains nuclear material and acidic tissue components, aiding in histological staining for tissues rich in DNA/RNA.
- This protocol covers 3 modes for the microscopic examination of cell samples.
- Zobrazit vše (6)
Další články a protokoly
Systémy pro zobrazování živých buněk
K vizualizaci složitých struktur a chování buněk se používá řada technik. Při statických analýzách se buňky fixují a barví, což vyžaduje usmrcení buněk, a tedy zachycení jediného okamžiku v buněčném čase. Statické techniky jsou sice pro některé aplikace vhodné, ale neposkytují vhled do buněčných aktivit. Dynamické přístupy založené na živých buňkách usnadňují vizualizaci struktury, chování nebo složení živých buněk bez tradičního barvení. Tyto techniky jsou ideální pro aplikace, které musí napodobit podmínky in vivo, a také pro vývoj prediktivních testů pro screening léčiv.
Systémy pro zobrazování živých buněk využívají pokročilou optiku, kontrolu prostředí a činidla, která umožňují dlouhodobé studie savčích, bakteriálních a kvasinkových buněk. Kultivační a zobrazovací systémy, které rovněž využívají mikrofluidiku, umožňují přesnou kontrolu mikroprostředí kultury, jako je průtok, směs plynů a teplota, a zároveň omezují fyzickou zátěž buněk. Zobrazování a analýza živých buněk je vhodná pro celou řadu aplikací, včetně hypoxie, buněčné migrace, 3D buněčných kultur, dynamiky cytoskeletu a obchodu s proteiny. Pokročilé systémy automatizují kultivační podmínky, podávání a odebírání ošetření a intervaly zobrazování a vytvářejí snímky, které lze prezentovat jako statické snímky nebo videodata.
Reagencie pro zobrazování živých buněk
Média a doplňky pro zobrazování živých buněk jsou navrženy tak, aby chránily buňky před poškozením způsobeným světlem během časosběrných experimentů. Tato činidla jsou také vyvinuta tak, aby měla nízkou autofluorescenci a fotobleaching, což výrazně zvyšuje kvalitu fluorescenčních snímků živých buněk.
K dispozici je řada barviv pro barvení živých buněk, která umožňují studovat dynamické procesy v živých buňkách. Fluorescenční barviva pro živé buňky umožňují selektivní barvení specifických organel, jako je buněčná membrána, jádro, cytoplazma, mitochondrie, lysozomy, endoplazmatické retikulum (ER), Golgiho aparát a proteiny cytoskeletu, a to vše bez zvýšené cytotoxicity. Použití organelových barviv jako protibarviv při zobrazování živých buněk je užitečné také při funkčních studiích.
Biosenzory s GFP a RFP lze použít k detekci specifického proteinu i subcelulárního umístění tohoto proteinu v živých buňkách buď pomocí fluorescenční mikroskopie, nebo časosběrného videozáznamu. Lentivirální vektorové systémy jsou oblíbeným nástrojem pro zavádění genů a genových produktů do buněk, který má oproti transfekci založené na chemických látkách mnoho výhod. Kromě detekce organel se barviva propustná pro živé buňky používají pro aplikace, jako je detekce apoptózy, životaschopnosti buněk, zdraví buněk, hypoxie, studium reaktivních forem kyslíku, zobrazování indikátorů vápníku a experimenty s nervovými nebo kmenovými buňkami.
Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet.
Nemáte účet?