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DUO92013

Sigma-Aldrich

Duolink® In-situ-Detektionsreagenzien Tiefrot

Synonym(e):

in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise
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About This Item

UNSPSC-Code:
12352200
NACRES:
NA.32

Produktlinie

Duolink®

Qualitätsniveau

200

Methode(n)

proximity ligation assay: suitable

Fluoreszenz

λex 644 nm; λem 669 nm (Cyanine 5, Zeiss Filter set 50)

Eignung

suitable for fluorescence

Versandbedingung

dry ice

Lagertemp.

−20°C

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Allgemeine Beschreibung

Die Duolink® In-situ-Detektionsreagenzien Far Red (Tiefrot) enthalten alle notwendigen Duolink In-situ-Reagenzien zur Amplifikation und Detektion gebundener PLA®-Sonden. Die Detektionssonden enthalten ein Fluorophor (lex = 644 nm und lem = 669 nm), das mit dem gleichen Filter wie Cy®5 visualisiert werden kann. Experimente mit den Duolink In-situ-Reagenzien ermöglichen Nachweis und Visualisierung von Protein-Interaktionen, Proteinexpressionswerten und posttranslationalen Modifikationen auf Einzelmolekülebene in fixierten Zellen und Gewebeproben.

Anwendung

Der Duolink®Proximity Ligation Assay (PLA®) ermöglicht die endogene Detektion von Protein-Interaktionen, posttranslationalen Modifikationen und Proteinexpressionswerten auf Einzelmolekülebene in fixierten Zellen und Gewebeproben.

Folgen Sie dem Duolink® In-situ-Fluoreszenzprotokoll zur Anwendung dieses Produkts. Eine Kurzanleitung ist ebenfalls erhältlich.

Besuchen Sie unser Duolink® PLA-Informationszentrum für Anleitungen zur Durchführung von Duolink®-Versuchen, Anwendungen, Fehlersuchen und mehr.

Zur Durchführung eines kompletten Duolink® PLA In-situ-Versuchs benötigen Sie zwei Primärantikörper (PLA-, IHC-, ICC- oder IF-validiert), die zwei Zielepitope erkennen. Andere benötigte Reagenzien sind ein Paar PLA-Sonden von verschiedenen Spezies (eine PLUS und eine MINUS), Detektionsreagenzien, Waschpuffer und Eindeckmittel. Beachten Sie bitte, dass die Primärantikörper von den gleichen Spezies stammen müssen wie die Duolink® PLA-Sonden. Die Analyse wird mit Standardgeräten für Immunfluoreszenz-Assays durchgeführt.

Spezifität
Tiefrotfluoreszenz-Nachweisreagenzien werden oftmals mit dem Cyanin5-Filter verwendet.

Anwendungshinweis
Es werden zwei Primärantikörper aus unterschiedlichen Spezies benötigt. Testen Sie Ihre Primärantikörper (IgG-Klasse, monoklonal oder polyklonal) in einem gebräuchlichen Immunfluoreszenz- (IF), immunhistochemischen (IHC) oder immunzytochemischen (ICC) Assay, um die optimalen Fixierungs-, Blockierungs- und Titerbedingungen zu bestimmen. Duolink® In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung an fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, formalinfixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet. Es ist keine minimale Zellzahl erforderlich.

Wir können Ihnen die Arbeit abnehmen! Informieren Sie sich über unser kundenspezifisches Serviceprogramm zur Beschleunigung Ihrer Duolink®-Projekte

Komplette Duolink®-Produktliste
Spezifität
FarRed-Fluoreszenz-Nachweisreagenzien werden oft mit Cyanine-5-Filter verwendet.

Anwendungshinweis
Es werden zwei Primärantikörper aus unterschiedlichen Spezies benötigt. Testen Sie Ihre Primärantikörper (IgG-Klasse, monoklonal oder polyklonal) in einem gebräuchlichen Immunfluoreszenz-(IF-), immunhistochemischen (IHC-) oder immunzytochemischen (ICC-)Assay, um die optimalen Fixierungs-, Blockierungs- und Titerbedingungen zu bestimmen. Duolink®-In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung auf fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, Formalin-fixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet. Es ist keine Mindestanzahl von Zellen erforderlich.

Wir können Ihnen Arbeit abnehmen! lnformieren Sie sich über unser kundenspezifisches Serviceprogramm zur Beschleunigung der Duolink®-Projekte

Sehen Sie sich die vollständige Duolink®-Produktliste an

Leistungsmerkmale und Vorteile

  • Keine Überexpression oder genetische Manipulation erforderlich
  • Hohe Spezifität (weniger falsch-positive Ergebnisse)
  • Einzelmolekül-Sensitivität durch RCA (Rolling Circle Amplification)
  • Relative Quantifizierung möglich
  • Keine Spezialgeräte erforderlich
  • Schneller und einfacher als FRET
  • Höhere Präzision als co-IP
  • Publikationsreife Ergebnisse

Komponenten

  • 5x Ligation - Enthält Oligonukleotide, die an die PLA-Sonden und alle für die Ligation benötigten Komponenten außer der Ligase hybridisieren
  • 1x Ligase (1 Einheit/μl)
  • 1x Polymerase (10 Einheiten/μl)
  • 5x Amplifikation Far Red (Tiefrot) - Enthält alle Komponenten, die für die Rolling Circle Amplification (RCA) erforderlich sind, außer der Polymerase. Es enthält außerdem Oligonukleotid-Sonden, die mit einem Fluorophor markiert sind, das an das RCA-Produkt hybridisiert.
Weitere Informationen entnehmen Sie bitte dem Datenblatt.

Nicht im Detektionskit enthalten:

Primärantikörper, PLA-Sonden, Waschpuffer, Eindeckmittel

Angaben zur Herstellung

Lagerung und Stabilität: Komponenten bei -20 °C aufbewahren. Die Enzyme müssen kontinuierlich eingefroren sein (-20 °C). Beim Entfernen aus dem Gefrierschrank einen Gefrierblock verwenden.

Rechtliche Hinweise

Cy is a registered trademark of Cytiva
Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Piktogramme

Health hazard
GHS08

Signalwort

Danger

H-Sätze

H334

Gefahreneinstufungen

Resp. Sens. 1

Lagerklassenschlüssel

10 - Combustible liquids

Analysenzertifikate (COA)

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Protokolle

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Duolink® PLA Fluorescence Protocol

This protocol describes how to perform immunofluorescent detection of proteins in cells and tissue.

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