DUO92014

Duolink^® In-situ-Detektionsreagenzien Grün

• Synonym(e): in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent
• UNSPSC-Code: 12352200
• NACRES: NA.32

Eigenschaften

• Produktlinie: Duolink^®
• Qualitätsniveau: 200
• Methode(n): proximity ligation assay: suitable
• Fluoreszenz: λ_ex 495 nm; λ_em 527 nm (green) (FITC (Cyanine 2), Zeiss Filter set 38)
• Eignung: suitable for fluorescence
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Die Duolink^® In-situ-Detektionsreagenzien Grün enthalten alle notwendigen Duolink In-situ-Reagenzien zur Amplifikation und Detektion gebundener PLA^® Sonden. Die Detektionssonden enthalten ein Fluorophor (lex = 495 nm und lem = 527 nm), das mit dem gleichen Filter wie Cy^®2 oder FITC visualisiert werden kann. Experimente mit den Duolink In-situ-Reagenzien ermöglichen Nachweis und Visualisierung von Protein-Interaktionen, Proteinexpressionswerten und posttranslationalen Modifikationen auf Einzelmolekülebene in fixierten Zellen und Gewebeproben.

Spezifität

Grüne Fluoreszenz-Nachweisreagenzien werden oftmals mit FITC-Filter verwendet.

Anwendung

Der Duolink^®Proximity Ligation Assay (PLA^®) ermöglicht die endogene Detektion von Protein-Interaktionen, posttranslationalen Modifikationen und Proteinexpressionswerten auf Einzelmolekülebene in fixierten Zellen und Gewebeproben.

Duolink^® In-situ-Detektionsreagenzien werden verwendet beim Proximity Ligation Assay (PLA) von:

• Vasopressin- und Gonadotropin-Releasing-Hormon (GnRH) von tiefgefrorenen Rattenhirnschnitten
• humanen embryonalen Nierenzellen 293 (HEK)
• Hypophysegeweben

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Keine Überexpression oder genetische Manipulation erforderlich
• Hohe Spezifität (weniger falsch-positive Ergebnisse)
• Einzelmolekül-Sensitivität durch RCA (Rolling Circle Amplifikation)
• Relative Quantifizierung möglich
• Keine Spezialgeräte erforderlich
• Schneller und einfacher als FRET
• Höhere Präzision als co-IP
• Publikationsreife Ergebnisse

Komponenten

• 5x Ligation - Enthält Oligonukleotide, die an die PLA-Sonden und alle für die Ligation benötigten Komponenten außer der Ligase hybridisieren
• 1x Ligase (1 Einheit/μL)
• 1x Polymerase (10 Einheiten/μL)
• 5x Amplification Grün - Enthält alle Komponenten, die für die Rolling Circle Amplification (RCA) erforderlich sind, außer der Polymerase. Es enthält außerdem Oligonukleotid-Sonden, die mit einem Fluorophor markiert sind, das an das RCA-Produkt hybridisiert.

Weitere Informationen entnehmen Sie bitte dem Datenblatt.

Nicht im Detektionskit enthalten:

Primärantikörper, PLA-Sonden, Waschpuffer, Eindeckmittel

Angaben zur Herstellung

Zur Durchführung eines kompletten Duolink^® PLA In-situ-Versuchs benötigen Sie zwei Primärantikörper (PLA-, IHC-, ICC- oder IF-validiert), die zwei Zielepitope erkennen. Andere benötigte Reagenzien sind ein Paar PLA-Sonden von verschiedenen Spezies (eine PLUS und eine MINUS), Nachweisreagenzien, Waschpuffer und Eindeckmittel. Beachten Sie bitte, dass die Primärantikörper von den gleichen Spezies stammen müssen wie die Duolink^® PLA-Sonden. Die Analyse wird mit Standardgeräten für Immunfluoreszenz-Assays durchgeführt.

Lagerung und Haltbarkeit

Komponenten bei -20 °C aufbewahren. Die Enzyme müssen kontinuierlich eingefroren sein (-20 °C). Beim Entfernen aus dem Gefrierschrank einen Gefrierblock verwenden.

Sonstige Hinweise

Folgen Sie dem Duolink^® In-situ-Fluoreszenzprotokoll zur Anwendung dieses Produkts. Eine Kurzanleitung ist ebenfalls erhältlich.

Besuchen Sie unser Duolink^® PLA-Informationszentrum, wo Sie Anleitungen zur Durchführung von Duolink^® Versuchen, Anwendungen und Fehlerbehebungen und anderes finden können.
Wir können Ihnen Arbeit abnehmen! Informieren Sie sich über unser kundenspezifisches Serviceprogramm zur Beschleunigung Ihrer Duolink^® Projekte

Komplette Duolink^® Produktliste

Rechtliche Hinweise

Cy is a registered trademark of Cytiva

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H334
• P-Sätze: P261 - P284 - P501
• Gefahreneinstufungen: Resp. Sens. 1
• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids