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Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase (G6P-DH)

from Leuconostoc mesenteroides

• Synonym(e): G6P-DH, Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase
• EC-Nummer: 1.1.1.49 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSC-Code: 12352204

Eigenschaften

• Biologische Quelle: bacterial (Leuconostoc mesenteroides)
• Qualitätsniveau: 100
• Form: solution; suspension
• Spezifische Aktivität: ~550 units/mg protein (At 25 °C (650 U/mg at 30 °C) with glucose-6-P and NAD as the substrates.)
• Mol-Gew.: dimer 110 kDa
• Verpackung: pkg of 1 mL (1,000 U)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Konzentration: ≥0.1-1.0 % (w/w)
• Methode(n): activity assay: suitable
• Farbe: white
• Optimaler pH-Wert: 7.0-8.5(maximal activity at 7.8)
• Löslichkeit: water: miscible
• NCBI-Hinterlegungsnummer: AAA25265
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P11411
• Anwendung(en): life science and biopharma
• Fremdaktivität: 6-PGDH <0.001%; CK <0.001%; GR <0.01%; HK <0.05%; NADH oxidase <0.02%; PGI <0.01%
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: 2-8°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase (G6PD) ist ein ubiquitäres Enzym, das bei der Produktion von Pentose als Katalysator wirkt. Außerdem produziert es NADPH für verschiedenste Biosynthese- und Entgiftungsreaktionen. Manchmal bietet G6PD eine Alternative zum Hauptglycolyseweg für die Glucoseverwertung. Zudem kommt es als DNA-Marker auf dem X-Chromosom zum Einsatz.1

Spezifität

Spezifität: Bei einem pH-Wert von 7,8 und einer Temperatur von 25 °C: G6P-DH von Leuconostoc (LG6PDH) ist hochspezifisch für D-Glucose-6-phosphat (K_m = 36 μM, NADP als Coenzym; 64 μM, NAD als Coenzym), wird aber entweder NADP (K_m = 7,4 μM; relative Rate 1,0) oder NAD (K_m = 115 μM; relative Rate 1,8) als Coenzym nutzen.
LG6P-DH reagiert nicht mit Fructose-6-phosphat, Fructose-1,6-biphosphat, Glucose-1-phosphat oder Ribose-1-phosphat. LG6P-DG oxidiert 2-Deoxy-Glucose-6-phosphat mit NADP, nicht jedoch mit NAD als Coenzym. Eine langsame Reaktion mit D-Glucose findet statt.
Hitzeinaktivierung: Die Ammoniumsulfat-Suspension wird bei einer Erwärmung auf Temperaturen ≤ 50 °C für eine Dauer von 10 Minuten nicht inaktiviert. Bei Temperaturen > 60 °C wird das Enzym rasch inaktiviert.

Anwendung

Bestandteil von Cofactor-recycelnden Systemen für NADPH.

Es wurde in der enzymatischen Bestimmung der C6-Phosphorylierung von Glycogen verwendet.

Qualität

Verunreinigungen: <0,001 % CK, <jeweils 0,01 % GR und PGI, <0,02 % „NADH-Oxidase“, <0,05 % HK, <0,001 % 6-PGDH

Einheitendefinition

Umrechnung der Einheiten: Eine Einheit (U) [+25 °C] ≈ 1,18 U [+30 °C] ≈ 1,45 U [+37 °C], alle mit NAD als Coenzym

Definition einer Einheit: Eine Einheit (U) LG6P-DH oxidiert 1 Mol Glucose-6-phosphat und reduziert bei +25 °C und pH 7,8 1 Mol NAD in 1 Minute.

Physikalische Form

Lösung von 1.000 U in 1 ml 3,2-M-Ammoniumsulfatlösung, pH-Wert ca. 6

Angaben zur Herstellung

Aktivator: HCO^3- (≤ 0,3 M) aktiviert leicht.

Hinweis zur Analyse

Absorbanz des aufgereinigten Enzyms: 1,15 (1 mg Enzym/ml, 280,5 nm)

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash