C6885

Colagenase

suitable for release of physiologically active rat epididymal adipocytes, Type II, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid, ≥125 CDU/mg solid

• Sinônimo(s): Clostridiopeptidase A
• Número CAS: 9001-12-1
• Número da licença da enzima: 3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
• Número CE: 232-582-9
• Número MDL: MFCD00130830
• Código UNSPSC: 12352204
• NACRES: NA.54

Propriedades

• fonte biológica: Clostridium histolyticum
• Nível de qualidade: 200
• forma: powder
• atividade específica: ≥125 CDU/mg solid; 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
• adequação: suitable for release of physiologically active rat epididymal adipocytes
• aplicação(ões): diagnostic assay manufacturing
• Condições de expedição: wet ice
• temperatura de armazenamento: −20°C

Descrição

Descrição geral

Clostridium histolyticum é um clostridium patogênico que produz colagenase. Essa é uma mistura enzimática que contém colagenase, proteases não específicas e clostripaína.

Aplicação

A colagenase pode ser usada:

• no preparo de tecido arterial para estudar produtos finais de glicosilação avançada (AGE)
• para uso junto com outras proteases para desagregação de tumor humano, rim de camundongo, cérebro humano, epitélio pulmonar e muitos outros tecidos.
• em estudos de perfusão hepática e renal, digestão de pâncreas e isolamento de hepatócitos não parenquimais
• no preparo de hepatócitos viáveis a partir de fígado de ratos e no isolamento de adipócitos a partir de tecido adiposo de ratos

Ações bioquímicas/fisiológicas

A colagenase é ativada por quatro gramas de átomos de cálcio por mol de enzima. Ela é inibida por ácido etileno glicol-bis(β-aminoetil éter)-N, N, N′,N′-tetracético, β-mercaptoetanol, glutationa, ácido tioglicólico e 8-hidroxiquinolina. As enzimas colagenase e a protease neutra têm um papel importante na liberação eficiente de células teciduais. A colagenase reconhece a sequência -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-, onde X geralmente é um aminoácido neutro.

A colagenase é ativada por quatro gramas de átomos de cálcio por mol de enzima. Ela é inibida por ácido etileno glicol-bis(beta-aminoetil éter)-N, N, N′,N′-tetracético, beta-mercaptoetanol, glutationa, ácido tioglicólico e 8-hidroxiquinolina.

Atenção

Como fornecido, este produto é estável por um ano a -20 °C. Não há perdas na atividade de FALGPA ou protease em 30 dias a 37 °C, 50 °C e -20 °C. As soluções de colagenase bruta são estáveis se forem congeladas rapidamente em alíquotas (a 10 mg/ml) e mantidas congeladas a -20 °C. Ciclos adicionais de congelamento/descongelamento danificam a solução. O produto retém 100% de atividade ao longo de 7 horas se mantido em gelo.

Definição da unidade

Uma unidade de digestão de colágeno (CDU) libera peptídeos de colágeno do tendão de Aquiles bovino que equivalem em cor de ninidrina a 1,0 μmol de leucina em 5 horas em pH 7,4 a 37 °C na presença de íons de cálcio. Uma unidade de hidrólise de FALGPA hidrolisa 1,0 μmol de furilacriloil-Leu-Gli-Pro-Ala por min a 25 °C. Uma unidade de protease neutra hidrolisa caseína para produzir cor equivalente a 1,0 μmol de tirosina por 5 h em pH 7,5 a 37 °C. Uma unidade de clostripaína hidrolisa 1,0 μmol de BAEE por min em pH 7,6 a 25 °C na presença de DTT.

Nota de preparo

De modo geral, as soluções são preparadas a 1-2 mg/ml em tampão TESCA (que contém TES 50 mM, cloreto de cálcio 0,36 mM, pH 7,4 a 37 °C).
Este produto também contém atividade de clostripaína, protease neutra não específica e tríptica.

Informações de segurança

• Pictogramas: GHS08,GHS07
• Palavra indicadora: Danger
• Frases de perigo: H315,H319,H334,H335
• Declarações de precaução: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Classificações de perigo: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Órgãos-alvo: Respiratory system
• Código de classe de armazenamento: 11 - Combustible Solids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 1
• Ponto de fulgor (°F): Not applicable
• Ponto de fulgor (°C): Not applicable
• Equipamento de proteção individual: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves