COLLDISP-RO

Colagenase/Dispase^®

lyophilized, non-sterile, optimum pH 7.0-8.0

• Sinônimo(s): colagenase
• Código UNSPSC: 12352204

Propriedades

• fonte biológica: enzyme from Bacillus polymyxa ( Dispase ); enzyme from bacterial ( Collagenase from Vibrio alginolyticus)
• Nível de qualidade: 100
• esterilidade: non-sterile
• forma: lyophilized
• collagenase activity: >0.1 U/mg lyophilizate, 25 °C (4-phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg as substrate)
• atividade específica: >0.8 U/mg lyophilizate, pH 7.5, 37 °C (casein as substrate, Dispase)
• embalagem: pkg of 100 mg (10269638001); pkg of 500 mg (11097113001)
• fabricante/nome comercial: Roche
• concentração: 1 mg/mL (Collagenase: 0.1U/mL, Dispase: 0.8U/mL)
• técnica(s): tissue processing: suitable
• cor: light yellow to brown
• pH ideal: 7.0-8.0
• solubilidade: water: soluble
• nº de adesão UniProt: P43154
• aplicação(ões): life science and biopharma; sample preparation
• atividade externa: proteolytic activities <0.1 U/mg (hemoglobin as the substrate)
• temperatura de armazenamento: 2-8°C

Descrição

Descrição geral

A Dispase é uma protease neutra e suave que age rapidamente para separar a epiderme intacta da derme. Ela também separa células epiteliais cultivadas intactas do substrato. Ela cliva a zona de membrana basal e deixa as células epiteliais intactas. A colagenase é uma protease que cliva a proteína em tripla-hélice chamada colágeno. Há três tipos de colagenases teciduais e estas pertencem à família das metaloproteinases de matriz (MMP). A colagenase obtida de Clostridium histolyticum tem uma atividade muito forte, uma vez que digere colágeno das duas extremidades, em temperaturas que chegam a 4-10 °C.

Especificidade

A colagenase degrada o colágeno nativo. A Dispase^® é uma protease não específica.

Aplicação

A Colagenase/Dispase^® é usada para preparar células provenientes de uma ampla variedade de tecidos e órgãos.

Componentes

EC 3.4.24.4 e 3.4.24.3

Definição da unidade

Uma unidade é a atividade enzimática que libera, em condições de ensaio e em 1 minuto, aminoácidos positivos para o reagente Folin e peptídeos correspondentes a 1 μmol de tirosina.

Nota de preparo

Ativador: Ca²⁺

Concentração de trabalho: Aproximadamente 1 mg/ml (Colagenase: 0,1 U/ml, Dispase: 0,8 U/ml)

Atividade enzimática:
Colagenase: 0,1 unidades de Wünsch/mg de liofilizado (+25 °C, 4-fenil-azobenzil-oxicarbonil-Pro-Leu-Gli-Pro-D-Arg como substrato)
Dispase^®: 0,8 unidades de Wünsch/mg de liofilizado (+37 °C, caseína como substrato, pH 7,5)
Atividades proteolíticas contaminantes: <0,1 U/mg de liofilizado (hemoglobina como substrato)

Solução de trabalho: Preparo da solução de trabalho Dissolva a enzima em água para uma concentração final de 100 mg/ml. Dilua com PBS (live de Ca²⁺/Mg²⁺) para uma concentração final de 1 mg/ml e filtre através de um filtro de membrana estéril de 0,2 μm.
Concentração de enzimas na solução estéril: Colagenase, 0,1 U/ml de PBS; Dispase^®, 0,8 U/ml de PBS.

Inibidores:
Inibidores de colagenase: EDTA, EGTA
A colagenase/dispase não é inibida pelo soro.

Condições de armazenamento (solução de trabalho): -15 ºC a -25 °C
A solução reconstituída é estável a -15 ºC a -25 °C.
Observação: Armazene em alíquotas adequadas e evite o congelamento e descongelamento repetido!

Reconstituição

Reconstituir em água (100 mg/ml). Diluição adicional com PBS (solução salina tamponada com fosfato) (livre de Ca²⁺/Mg²⁺).

Armazenamento e estabilidade

Armazenar seco

Outras notas

Colagenase de Vibrio alginolyticus, Dispase^® de Bacillus polymyxa

Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.

Informações legais

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.

Informações de segurança

• Pictogramas: GHS07,GHS08
• Palavra indicadora: Danger
• Frases de perigo: H315 - H319 - H334 - H335
• Declarações de precaução: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Classificações de perigo: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Órgãos-alvo: Respiratory system
• Código de classe de armazenamento: 11 - Combustible Solids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 1
• Ponto de fulgor (°F): does not flash
• Ponto de fulgor (°C): does not flash