C2674
Colagenase
lyophilized powder, ≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units), 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
Sinônimo(s):
Clostridiopeptidase A
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About This Item
Produtos recomendados
fonte biológica
Clostridium histolyticum
Nível de qualidade
tipo
Type I-A
forma
lyophilized powder
atividade específica
≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
peso molecular
68-130 kDa
concentração
1 mg/mL
técnica(s)
cell culture | mammalian: suitable
single cell analysis: suitable
pH
6.3-8.8
Condições de expedição
ambient
temperatura de armazenamento
−20°C
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Descrição geral
A colagenase é uma protease que cliva a proteína em tripla-hélice chamada colágeno. Há três tipos de colagenases teciduais e estas pertencem à família das metaloproteinases de matriz (MMP). A colagenase obtida do Clostridium histolyticum tem uma atividade muito potente, pois digere colágeno de ambas as terminações, em temperaturas tão baixas quanto 4 ºC-10 °C. Misturas de colágeno brutas contêm duas enzimas principais, a saber colagenase e clostripaína.
Aplicação
A colagenase de Clostridium histolyticum é usada para as seguintes aplicações:
Este produto é adequado para a desagregação de tumor humano, rim de camundongo, cérebro humano adulto e fetal, pulmão e muitos outros tecidos epiteliais. Demonstrou-se também que é eficaz em estudos de perfusão de fígado e rim, digestão de pâncreas, isolamento de células de fígado de rato não parenquimais e preparo de hepatócitos. A colagenase foi usada também no preparo de tecido arterial para o estudo de produtos finais da glicosilação avançada. Esta enzima foi testada para a liberação de hepatócitos em uma concentração de cerca de 1 mg/ml. As concentrações para digestão variam de 0,1 a 5 mg/ml.
Adequado para uso na preparação de suspensão de célula única para sequenciamento.
- Isolamento de células de Sertol
- Usada na comparação de métodos enzimáticos
- Usada durante a preparação de tecidos para imunocitoquímica
- Extração de esperma testicular
- Preparação de suspensões de células individuais
- Imunofluorescência
Este produto é adequado para a desagregação de tumor humano, rim de camundongo, cérebro humano adulto e fetal, pulmão e muitos outros tecidos epiteliais. Demonstrou-se também que é eficaz em estudos de perfusão de fígado e rim, digestão de pâncreas, isolamento de células de fígado de rato não parenquimais e preparo de hepatócitos. A colagenase foi usada também no preparo de tecido arterial para o estudo de produtos finais da glicosilação avançada. Esta enzima foi testada para a liberação de hepatócitos em uma concentração de cerca de 1 mg/ml. As concentrações para digestão variam de 0,1 a 5 mg/ml.
Adequado para uso na preparação de suspensão de célula única para sequenciamento.
Ações bioquímicas/fisiológicas
A colagenase é ativada por quatro gramas de átomos de cálcio por mol de enzima. Ela é inibida por ácido etileno glicol-bis(beta-aminoetil éter)-N, N, N′,N′-tetracético, beta-mercaptoetanol, glutationa, ácido tioglicólico e 8-hidroxiquinolina.
O produto da colagenase é uma mistura de enzimas secretada por C. histolyticum, com diferentes produtos diferenciados pelas proporções relativas de 10-18 componentes encontrados nas enzimas secretadas. Os principais componentes são duas colagenases, clostripaína e uma protease neutra. A ação sinergística dessas enzimas degrada o colágeno e outros materiais intracelulares. A ação das enzimas colagenases e da protease neutra é necessária para liberação eficaz das células do tecido. Vários tipos de colágenos são substratos naturais da colagenase.
Atenção
Como fornecido, este produto é estável por um ano a -20 °C. Não há perdas na atividade de FALGPA ou proteases em 30 dias a 37 °C, 50 °C e -20 °C. As soluções de colagenase bruta são estáveis se forem congeladas rapidamente em alíquotas (na concentração de 10 mg/ml) e mantidas congeladas a -20 °C. Ciclos adicionais de congelamento/descongelamento danificam a solução. O produto retém 100% de atividade ao longo de 7 horas se mantido em gelo.
Definição da unidade
Uma unidade de digestão de colágeno (CDU) libera peptídeos de colágeno do tendão de Aquiles bovino que equivalem em cor de ninidrina a 1,0 μmol de leucina em 5 horas em pH 7,4 a 37 °C na presença de íons de cálcio. Uma unidade de hidrólise de FALGPA hidrolisa 1,0 μmol de furilacriloil-Leu-Gli-Pro-Ala por min a 25 °C. Uma unidade de protease neutra hidrolisa caseína para produzir cor equivalente a 1,0 μmol de tirosina por 5 h em pH 7,5 a 37 °C. Uma unidade de clostripaína hidrolisa 1,0 μmol de BAEE por min em pH 7,6 a 25 °C na presença de DTT.
Nota de preparo
Essa colagenase é obtida a partir de filtrado de cultura de Clostridium histolyticum. Acredita-se que o filtrado da cultura contenha pelo menos 7 proteases diferentes, que variam em peso molecular de 68-130 kDa. Esse produto é do tipo I-A. Geralmente as soluções são preparadas na concentração de 1-2 mg/ml em tampão TESCA (contendo TES 50 mM, cloreto de cálcio 0,36 mM, pH 7,4 a 37 °C).
substrato
Nº do produto
Descrição
Preços
Palavra indicadora
Danger
Frases de perigo
Declarações de precaução
Classificações de perigo
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Órgãos-alvo
Respiratory system
Código de classe de armazenamento
11 - Combustible Solids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 1
Ponto de fulgor (°F)
Not applicable
Ponto de fulgor (°C)
Not applicable
Equipamento de proteção individual
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
Certificados de análise (COA)
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To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.
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