COLLA-RO

Colagenase A

from Clostridium histolyticum

• UNSPSC Code: 12352204
• Número CE: 3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
• NACRES: NA.54
• Specific activity: >0.15 U/mg lyophilizate (Collagenase activity)
• Biological source: Clostridium histolyticum
• Concentration: 1 mg/mL (0.1%, w/v)

Propriedades

• biological source: Clostridium histolyticum
• sterility: non-sterile
• form: lyophilized
• specific activity: >0.15 U/mg lyophilizate (Collagenase activity)
• packaging: pkg of 100 mg (10103578001), pkg of 2.5 g (11088793001), pkg of 500 mg (10103586001)
• manufacturer/tradename: Roche
• concentration: 1 mg/mL (0.1%, w/v)
• color: brown
• optimum pH: 6.0-8.0
• solubility: water: soluble
• suitability: suitable for PCR
• NCBI accession no.: WP_138210331
• UniProt accession no.: A0A4U9RG91
• application(s): cell analysis; life science and biopharma; sample preparation
• foreign activity: Clostripain 9.489 U/mg, Proteases 6.067 U/mg (Azocoll ), Trypsin 0.144 U/mg (with BAEE)
• storage temp.: 2-8°C
• Gene Information: Clostridium histolyticum ... COLA_1(1668506084)

Descrição

General description

A colagenase é uma protease que cliva a proteína em tripla-hélice chamada colágeno. O Clostridium histolyticum produz seis tipos de colagenases, a saber α, β, γ, δ, ε e λ. Essas colagenases são ativas contra o tecido conjuntivo e apresentam maior reatividade em relação à gelatina que ao colágeno. A colagenase obtida de Clostridium histolyticum tem uma atividade muito forte, já que digere colágeno das duas extremidades, em temperaturas que chegam a 4-10 °C.

Application

A colagenase de C. histolyticum é amplamente usada para:

• Desagregação de muitos tipos de tecidos (por exemplo, pulmão, coração, músculos, ossos, tecido adiposo, fígado, rins, cartilagem, glândula mamária, placenta, vasos sanguíneos, cérebro, tumores, cordão umbilical)
• preparação de suspensões de célula única para o estabelecimento de sistemas de cultura de células primárias. A colagenase A é recomendada quando o rendimento, a viabilidade e a funcionalidade são importantes.
• Preparação de células de vários tipos de tecido, como hepatócitos, adipócitos, ilhotas pancreáticas, células epiteliais, células musculares, células endoteliais etc. No entanto, a adequação de cada lote da enzima para o rompimento de um tecido específico deve ser determinada empiricamente.

Biochem/physiol Actions

A colagenase degrada o colágeno nativo. Clostripaína, enzimas semelhantes à tripsina e proteases neutras também degradam outras proteínas.
Atividade enzimática:
Atividade da colagenase: >0,15 U/mg (segundo Wünsch) (+25 °C, 4-fenil-azobenzil-oxicarbonil-Pro-Leu-Gli-Pro-D-Arg como substrato)
Atividades enzimáticas contaminantes: tripsina, clostripaína e atividade proteolítica neutra
A colagenase A tem uma proporção equilibrada de atividades enzimáticas.

Preparation Note

Ativador: Ca²⁺
Inibidores:
Inibidores de colagenase: EDTA, EGTA, Cis, His, DTT, 2-mercapto-etanol
A colagenase não é inibida pelo soro.
Inibidores de clostripain: TLCK
Inibidores de tripsina: aprotinina, inibidor de tripsina (clara de ovo, soja), soro
Concentração de trabalho: 0,5 a 2,5 mg/ml
Condições de armazenamento (solução de trabalho): -15 ºC a -25 °C
A Roche recomenda reconstituir apenas a quantidade de liofilizado necessária para uso imediato. A solução reconstituída pode ser armazenada a -15 ºC a -25 °C por até uma semana. Evite o congelamento e descongelamento repetido, uma vez que a atividade diminui após cada reconstituição.

Mantenha o recipiente hermeticamente fechado, em local seco e bem ventilado

Reconstituição em qualquer solução salina balanceada (como HBSS)

Other Notes

Conteúdo
Liofilizado, não estéril

Definição de unidade: A colagenase da Roche é determinada em unidades de Wünsch (1 μmol de produto formado por minuto a +25 °C com substrato de Wünsch).
Frequentemente, as atividades de colagenase são fornecidas em unidades de Mandl (1 μmol de leucina liberada do colágeno em 5 horas a +37 °C).
Infelizmente, não existe um fator de conversão consistente entre as duas unidades de atividade, já que a unidade de Mandl depende, em parte, da concentração das proteases contaminantes no preparo da colagenase, uma variável indefinível. De fato, um preparo mais puro de colagenase geraria uma menor atividade específica em unidades de Mandl que o preparo bruto. Os preparados de Clostridium costumam gerar fatores de conversão de cerca de 1:1800 (p.ex., um lote específico de colagenase de Clostridium contém cerca de 0,15 unid. de Wünsch/mg e 250 unid. de Mandl/mg).

Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.

Disclaimer

As condições de envio podem variar

Informações de segurança

• pictograms: GHS07,GHS08
• signalword: Danger
• pcodes: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Classe de armazenamento: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: does not flash
• flash_point_c: does not flash
• hcodes: H315,H319,H334,H335