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Merck

DUO82049

Sigma-Aldrich

Duolink® In Situ Waschpuffer, Fluoreszenz

Synonym(e):

in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
12161703
NACRES:
NA.32

Materialien

packing (powdered buffer pouches)

Qualitätsniveau

Produktlinie

Duolink®

Methode(n)

proximity ligation assay: suitable

Eignung

suitable for fluorescence

Lagertemp.

20-25°C

Anwendung

Der Duolink®Proximity Ligation Assay (PLA®) ermöglicht die endogene Detektion von Protein-Interaktionen, posttranslationalen Modifikationen und Proteinexpressionswerten auf Einzelmolekülebene in fixierten Zellen und Gewebeproben.

Nutzen Sie das Duolink® In-situ-Fluoreszenzprotokoll für dieses Produkt. Eine Kurzanleitung ist ebenfalls verfügbar.

Besuchen Sie unser Duolink®-PLA-Informationszentrum für Anleitungen zur Durchführung von Duolink®-Versuchen, Anwendungen, Fehlersuche und mehr.

Zur Durchführung eines kompletten Duolink®-PLA-In-situ-Versuchs benötigen Sie zwei Primärantikörper (PLA-, IHC-, ICC- oder IF-validiert), die zwei Zielepitope erkennen. Andere benötigte Reagenzien sind ein Paar PLA-Sonden von verschiedenen Spezies (eine PLUS und eine MINUS), Detektionsreagenzien, Waschpuffer und Eindeckmittel. Beachten Sie bitte, dass die Primärantikörper von den gleichen Spezies stammen müssen wie die Duolink® PLA-Sonden. Die Analyse wird mit Standardgeräten für Immunfluoreszenz-Assays durchgeführt.

Spezifität
Duolink®-In-Situ-Fluoreszenzanwendungen verwenden zwei Waschpuffer. Waschpuffer A wird nach dem Inkubationsschritt der PLA-Sonde verwendet und Waschpuffer B nach der Inkubation mit den Amplifikationsreagenzien. Weitere Informationen entnehmen Sie bitte dem Datenblatt.

Anwendungshinweis
Es werden zwei Primärantikörper aus unterschiedlichen Spezies benötigt. Testen Sie Ihre Primärantikörper (IgG-Klasse, monoklonal oder polyklonal) in einem gängigen Immunfluoreszenz-(IF)-, immunhistochemischen (IHC) oder immunzytochemischen (ICC) Assay, um die optimalen Fixierungs-, Blockierungs- und Titerbedingungen zu bestimmen. Duolink®-PLA-In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung an fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, formalinfixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet. Es ist keine minimale Zellzahl erforderlich.

Links
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Vollständige Duolink®-Produktliste
Spezifität
Duolink®-In-Situ-Fluoreszenzanwendungen verwenden zwei Waschpuffer. Waschpuffer A wird nach dem Inkubationsschritt der PLA-Sonde verwendet und Waschpuffer B nach der Inkubation mit den Amplifikationsreagenzien. Weitere Details entnehmen Sie bitte dem Datenblatt.

Anwendungshinweis
Es werden zwei Primärantikörper aus unterschiedlichen Spezies benötigt. Testen Sie Ihre Primärantikörper (IgG-Klasse, monoklonal oder polyklonal) in einem gebräuchlichen Immunfluoreszenz-(IF-), immunhistochemischen (IHC-) oder immunzytochemischen (ICC-)Assay, um die optimalen Fixierungs-, Blockierungs- und Titerbedingungen zu bestimmen. Duolink®-PLA-In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung an fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, Formalin-fixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet. Es ist keine Mindestanzahl von Zellen erforderlich.

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Duolink®-PLA-In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung an fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, formalinfixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet.

Leistungsmerkmale und Vorteile

  • Keine Überexpression oder genetische Manipulation erforderlich
  • Hohe Spezifität (weniger falsch-positive Ergebnisse)
  • Einzelmolekül-Sensitivität durch RCA (Rolling Circle Amplifikation)
  • Relative Quantifizierung möglich
  • Keine Spezialgeräte erforderlich
  • Schneller und einfacher als FRET
  • Höhere Präzision als co-IP
  • Publikationsreife Ergebnisse

Rechtliche Hinweise

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Lagerklassenschlüssel

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 3


Analysenzertifikate (COA)

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Proximal Ligation Assay (PLA) on Lung Tissue and Cultured Macrophages to Demonstrate Protein-protein Interaction
Mendez R, et al.
Bio-protocol, 7(21) (2017)
Detection of Receptor Heteromerization Using In Situ Proximity Ligation Assay
Gomes I, et al.
Current Protocols in Pharmacology / Editorial Board, S.J. Enna (editor-in-chief) ... [Et al.], 2-16 (2016)
Increasing the Receptor Tyrosine Kinase EphB2 Prevents Amyloid-?-induced Depletion of Cell Surface Glutamate Receptors by a Mechanism That Requires the PDZ-binding Motif of EphB2 and Neuronal Activity
Miyamoto T, et al.
The Journal of Biological Chemistry (2015)
Xiaofan Li et al.
PLoS pathogens, 13(3), e1006249-e1006249 (2017-03-02)
Trials to reintroduce chloroquine into regions of Africa where P. falciparum has regained susceptibility to chloroquine are underway. However, there are long-standing concerns about whether chloroquine increases lytic-replication of Epstein-Barr virus (EBV), thereby contributing to the development of endemic Burkitt
Xiaofan Li et al.
Journal of virology, 93(17) (2019-06-14)
Herpesviruses are ubiquitous, and infection by some, like Epstein-Barr virus (EBV), is nearly universal. To persist, EBV must periodically switch from a latent to a replicative/lytic phase. This productive phase is responsible for most herpesvirus-associated diseases. EBV encodes a latency-to-lytic

Artikel

Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol

Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.

Protokolle

Duolink® PLA Multicolor Detection Protocol

This page details the Duolink® In Situ Short Protocol for fluorescence detection

In diesem Protokoll wird beschrieben, wie der Immunfluoreszenznachweis von Proteinen in Zellen und Gewebe durchgeführt wird.

This protocol describes how to perform immunofluorescent detection of proteins in cells and tissue.

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