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DUO92007

Duolink® In-situ-Detektionsreagenzien Orange

Synonym(e):

in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent

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NA.32
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product line

Duolink®

Quality Segment

technique(s)

proximity ligation assay: suitable

fluorescence

λex 554 nm; λem 576 nm (Cyanine 3; Zeiss Filter set 20)

suitability

suitable for fluorescence

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

Application

Der Duolink®Proximity Ligation Assay (PLA®) ermöglicht den endogenen Nachweis von Protein-Interaktionen, posttranslationalen Modifikationen und Proteinexpressionswerten auf Einzelmolekülebene in fixierten Zellen und Gewebeproben.

Folgen Sie zur Anwendung dieses Produkts dem Duolink® In-situ-Fluoreszenzprotokoll. Eine Kurzanleitung ist ebenfalls erhältlich.

Besuchen Sie unser Duolink® PLA-Informationszentrum, wo Sie Anleitungen zur Durchführung von Duolink® Versuchen, Anwendungen, Fehlerbehebung und mehr finden.

Zur Durchführung eines kompletten Duolink® PLA-In-situ-Versuchs benötigen Sie zwei Primärantikörper (PLA-, IHC-, ICC- oder IF-validiert), die zwei Zielepitope erkennen. Andere benötigte Reagenzien sind ein Paar PLA-Sonden von verschiedenen Spezies (eine PLUS und eine MINUS), Detektionsreagenzien, Waschpuffer und Eindeckmittel. Beachten Sie bitte, dass die Primärantikörper von den gleichen Spezies stammen müssen wie die Duolink® PLA-Sonden. Die Analyse wird mit Standardgeräten für Immunfluoreszenz-Assays durchgeführt.

Spezifität
Orangene Fluoreszenz-Nachweisreagenzien werden oftmals mit dem Cyanin-3-Filter verwendet.

Anwendungshinweis
Es werden zwei Primärantikörper aus unterschiedlichen Spezies benötigt. Testen Sie Ihre Primärantikörper (IgG-Klasse, monoklonal oder polyklonal) in einem gebräuchlichen Immunfluoreszenz- (IF), immunhistochemischen (IHC) oder immunzytochemischen (ICC) Assay, um die optimalen Fixierungs-, Blockierungs- und Titerbedingungen zu bestimmen. Duolink® In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung auf fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, formalinfixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet. Es ist keine minimale Zellzahl erforderlich.

Wir können Ihnen Arbeit abnehmen! Informieren Sie sich über unser kundenspezifisches Serviceprogramm zur Beschleunigung Ihrer Duolink®-Projekte

Komplette Duolink® Produktliste
Spezifität
Orangefarbene Fluoreszenz-Nachweisreagenzien werden oft mit Cyanine-3-Filter verwendet.

Anwendungshinweis
Es werden zwei Primärantikörper aus unterschiedlichen Spezies benötigt. Testen Sie Ihre Primärantikörper (IgG-Klasse, monoklonal oder polyklonal) in einem gebräuchlichen Immunfluoreszenz-(IF-), immunhistochemischen (IHC-) oder immunzytochemischen (ICC-)Assay, um die optimalen Fixierungs-, Blockierungs- und Titerbedingungen zu bestimmen. Duolink®-In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung auf fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, Formalin-fixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet. Es ist keine Mindestanzahl von Zellen erforderlich.

Wir können Ihnen Arbeit abnehmen! lnformieren Sie sich über unser kundenspezifisches Serviceprogramm zur Beschleunigung der Duolink®-Projekte

Sehen Sie sich die vollständige Duolink®-Produktliste an

Features and Benefits

  • Keine Überexpression oder genetische Manipulation erforderlich
  • Hohe Spezifität (weniger falsch-positive Ergebnisse)
  • Einzelmolekül-Sensitivität durch RCA (Rolling Circle Amplification)
  • Relative Quantifizierung möglich
  • Keine Spezialgeräte erforderlich
  • Schneller und einfacher als FRET
  • Höhere Präzision als co-IP
  • Publikationsreife Ergebnisse

Other Notes

Dieses Produkt besteht aus folgenden Komponenten:
  • 5x Ligation - Enthält Oligonukleotide, die an die PLA-Sonden und alle für die Ligation benötigten Komponenten außer der Ligase hybridisieren
  • 1x Ligase (1 Einheit/μl)
  • 1x Polymerase (10 Einheiten/μl)
  • 5x Amplification Orange - Enthält alle Komponenten, die für die Rolling Circle Amplification (RCA) erforderlich sind, außer der Polymerase. Es enthält außerdem Oligonukleotid-Sonden, die mit einem Fluorophor markiert sind, das an das RCA-Produkt hybridisiert.
Weitere Informationen entnehmen Sie bitte dem Datenblatt.

Nicht im Detektionskit enthalten:

Primärantikörper, PLA-Sonden, Waschpuffer, Eindeckmittel

Legal Information

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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proximity ligation assay: suitable

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proximity ligation assay: suitable

suitability

suitable for fluorescence

suitability

suitable for fluorescence

suitability

suitable for fluorescence

suitability

suitable for fluorescence-detection automated sequencing, suitable for microtiter plates

fluorescence

λex 554 nm; λem 576 nm (Cyanine 3; Zeiss Filter set 20)

fluorescence

λex 594 nm; λem 624 nm (Texas Red®, Zeiss Filter set 31)

fluorescence

λex 495 nm; λem 527 nm (green) (FITC (Cyanine 2), Zeiss Filter set 38)

fluorescence

λex 360 nm; λem 460 nm

Quality Level

200

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10 - Combustible liquids

pictograms

Health hazardEnvironment

Hazard Classifications

Aquatic Chronic 2 - ED ENV 1 - Resp. Sens. 1



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Questions

1–2 of 2 Questions  
  1. What is the emission and excitation of the orange kit?

    1 answer
    1. The fluorophore in this kit has an excitation maximum at 554 nm and an emission maximum at 576 nm. This fluorophore can be visualized using the same filter as Cy3, Rhodamine, AlexaFluor 550, and Atto 550.

      Helpful?

  2. Will repeated thawing and freezing affect the quality of the 5x amplification buffer included in the kit?

    1 answer
    1. It is generally acceptable to subject the amplification buffer to a few freeze-thaw cycles. However, it is advised to avoid exceeding 10 cycles, as this could potentially compromise its effectiveness.

      Helpful?

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