D5319

Desoxyribonuklease I Rind

recombinant, expressed in Pichia pastoris, buffered aqueous glycerol solution, ≥5,000 units/mg protein

• Synonym(e): DNAse I, Desoxyribonukleat-5′-oligo-nukleotidhydrolase
• EC-Nummer: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• MDL-Nummer: MFCD00130918
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: bovine
• Qualitätsniveau: 200
• Rekombinant: expressed in Pichia pastoris
• Assay: ≥95%
• Form: buffered aqueous glycerol solution
• Spezifische Aktivität: ≥5,000 units/mg protein
• Mol-Gew.: ~39 kDa
• Methode(n): DNA extraction: suitable
• Eignung: suitable for molecular biology
• Anwendung(en): diagnostic assay manufacturing
• Fremdaktivität: RNAse and protease, free
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Anwendung

DNase I von Sigma wurde in einer Studie verwendet, um durch Behandlung von nukleärem Lysat einzelne Nukleosome zu erhalten.[1] Außerdem wurde das Enzym für die Präparierung und das Abernten von Milchdrüsen der Maus genutzt.[2]

Ebenso wurde Desoxyribonuklease I des Rindes in einer Studie genutzt, um die initialen Aktionen von Desoxyribonuklease der Milz und des Pankreas zu vergleichen. Außerdem wurde Desoxyribonuklease I des Rindes in einer Studie verwendet, um Deoxythymidin-3′, 5′-di-p-nitrophenylphosphat als synthetisches Substrat aus Desoxyribonuklease des Rinderpankreas zu untersuchen.

Wird verwendet für das Entfernen von DNA aus Proteinproben.

Biochem./physiol. Wirkung

Dnase I ist eine Endonuklease; sie wirkt auf Phosphodiesterbindungen, die neben Pyrimidinen liegen, und erzeugt so Polynukleotide mit terminalen 5′-Phosphaten. Der optimale pH-Wert liegt zwischen 7 und 8. Zweiwertige Kationen wie Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺ und Zn²⁺ aktivieren das Enzym. Eine Konzentration von 5 mM Ca²⁺ stabilisiert das Enzym gegen proteolytische Verdauung.[3] 2-Mercaptoethanol, Chelatoren, Natriumdodecylsulfat (SDS)[4] und Aktin[5] hemmen bekanntlich die Enzymaktivität.

Erzeugt aus ein- und doppelsträngiger DNA mittels Verdau eine Mischung aus Mono- und Oligonukleotiden, die 5′-Phosphate und 3′-OH-Termini besitzen. Diese katalytische Aktivität ist divalent ionenabhängig. In Gegenwart von Mg²⁺ hydrolysiert DNase I jeden Strang von Doppelstrang-DNA unabhängig und nach dem Zufallsprinzip. In Gegenwart von Mn²⁺ können beide Stränge aufgespalten werden.

Leistungsmerkmale und Vorteile

• RNA-Aufreinigung durch Entfernen von DNA
• Präparation von DNA für die Nick-Translation¹
• Footprinting-Assays für die Bestimmung von DNA-Protein-Interaktionen²

Einheitendefinition

Eine Einheit erzeugt ein ΔA₂₆₀ von 0,001 pro Minute und pro Milliliter Reaktionsgemisch, wobei DNA vom Thymus des Kalbs bei einem pH-Wert von 5,0 und einer Temperatur von 25 °C verwendet wird.

Physikalische Form

Wird als Lösung in 4 mg/ml Glycin bei pH 5,0, 5 mM Calciumacetat und 50 % Glycerin geliefert

Angaben zur Herstellung

Produziert ohne Verwendung von Tierzellen oder Materialien tierischen Ursprungs

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable