造血幹細胞和免疫細胞培養

• 造血幹細胞
• 人類單核細胞
• 人類巨噬細胞
• 人類樹突狀細胞
• 用於 T 細胞分化的基質細胞

造血幹細胞 (HSC) 可產生所有類型的血細胞，包括髓系和淋巴系。髓系細胞包括單核細胞、巨 噬細胞、中性粒細胞、嗜碱性粒細胞、嗜酸性粒細胞、紅細胞、樹突狀細胞和巨核細胞或血小板。淋巴細胞包括 T 細胞、B 細胞和自然殺傷細胞。造血幹細胞存在於成人的骨髓、臍帶血、胎盤和動員的週邊血液中。造血幹細胞生物學的最新進展使得造血幹細胞移植被用於治療癌症和其他免疫系統疾病。我們提供廣泛的工具、細胞和最佳化的無血清擴展培養基，以培養 CD34+ 人類造血幹細胞和其他人類免疫細胞類型，包括 CD14+ 單核細胞、單核細胞 (PBMC)、巨 噬細胞、樹突狀細胞和 T 細胞淋巴細胞。

圖 1.造血的階段。 透過造血過程，所有細胞血液成分都來自造血幹細胞。

造血幹細胞

CD34+ 造血祖細胞

CD34 是人類造血幹細胞的標記。人類骨髓（BM）細胞的所有集落形成活性都存在於 CD34+ 祖細胞部分。使用富集的 CD34+ BM 細胞進行的臨床移植研究顯示，這部分細胞中存在具有長期 BM 重建能力的造血干細胞。我們提供冷凍保存的 CD34+ 造血祖細胞，這些細胞是從健康人捐獻者的臍帶血中分離出來的。CD34+ 祖細胞包含兩個主要的細胞亞群，即造血祖細胞和內皮祖細胞。因此，CD34+祖細胞適用於一系列研究，包括定向分化為更多類型的造血細胞和內皮系。

圖 2. 利用流式細胞計測人類 CD34+ 造血祖細胞的形態和特徵。

產品說明 人類 CD34+ 祖細胞 (hCD34+-CB), 100,000 cells/vial (PromoCell)	C-12921

造血幹細胞培養基

造血幹細胞憑藉其明顯的自我更新能力，能夠在體內擴大  至大量。體外集落形成單位（CFU）測試已被用來研究造血祖細胞在半固體瓊脂培養基形成集落的能力，從而研究其增殖和分化模式。

造血祖細胞 (HPC) 擴增培養基 DXF 是專為原始 HPCs 在完全定義、無異種的培養環境中最大限度擴增而設計的。由於完全使用合成、重組或植物來源的材料，此種培養基是定義的，不含任何動物來源成分。

應用注意事項： 體外 CD34+/CD38-人造血祖細胞在無血清和無異種幹細胞培養基的擴展。

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產品介紹	C-28021
Hematopoietic Progenitor Medium (PromoCell)	C-28020
Stemline® II 造血幹細胞擴展培養基 (Sigma)	S0192

Featured Product

Stemline^® II Hematopoietic Stem Cell Media

Developed to promote the optimal expansion of human hematopoietic stem cells (HSC) from bone marrow, mobilized peripheral blood, and cord blood, Stemline^® 造血幹細胞擴增培養基 (S0192)比其他市售的無血清培養基配方具有更高的總有核細胞（TNC）倍增率。

特點和優點

• 無血清配方
• 增強臍帶血 CD34+ 細胞的擴增
• 在集落形成單元中擴增所有適當造血系的細胞。
• 在 7 天和 14 天生長實驗中進行廣泛測試。
• 在最先進的 GMP 廠房生產，並提供裝置主檔案 (DMF)。

在 1000 多本刊物上發表

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圖 2.Stemline® 顯示骨髓造血幹細胞 (HSC) 的優異擴增能力。 將 CD34+ HSCs 接種到 24 孔組織培養板的孔中。每孔加入一毫升的培養基，並加入適當的細胞因子以刺激生長（TPO、SCF 和 G-CSF，各 100ng/mL）。每種條件均一式三份，每孔每毫升接種 10,000 個細胞。細胞於第 14 天進行計數，並以最終細胞數/初始細胞數決定增加的倍數。在 Stemline® 和 Stemline® II 中培養的骨髓造血幹細胞比在其他無血清造血幹細胞培養基中培養的造血幹細胞有更優異的擴張效果。

造血細胞激素和生長因子

在複雜的正負性調節因子網路中，有許多免疫相關的細胞激素參與造血的調節。有些細胞因子的作用具有非常狹窄的品系特異性，而其他許多細胞因子則具有相當廣泛且重疊的特異性範圍。本節列出的細胞因子和生長因子，其作用似乎是刺激或調節造血幹細胞的發育：

白介素	GM-CSF	G-CSF	M-CSF	EPO	TPO	SCF	Flt-3 配體

造血幹細胞標誌

CD34	CD38	CD90	CD133	CD105	CD45	c-Kit	SCA-1	Stem Cell Factor	ALDH

AldeRed™ ALDH 檢測試劑

造血幹細胞表達高水平的醛脫氫酶（ALDH）。ALDH活性已被用作造血幹細胞移植品質的指標。從歷史上來看，ALDH水平是使用活細胞滲透性染料來測量，該染料在電磁波譜的綠色區域（512 nm）發光。因此，本試劑不能同時用於表達在綠色螢光光譜中發光的綠色螢光蛋白的細胞或小鼠。該 AldeRed™ALDH檢測試劑 是一種ALDH的紅移螢光底物，用於標記存活的ALDH陽性造血干細胞，留下綠色發光通道供進一步實驗使用。

人類單核細胞

單核細胞是血液中循環的未成熟吞噬細胞。作為抗原呈递免疫细胞，它們可以吞噬和降解微生物和微粒物质。我們的原代人類 CD14+ 單核細胞是從單一健康捐獻者的新鮮外周血中分離出來的。以專利方法分離出超純的單核細胞部分後，再以 > 95% 純度的正向選擇方式分離出 CD14+ 單核細胞。單核細胞附著培養基可以有效地從新分離的人類單核細胞中進行單核細胞附著選擇，同時保持最佳的細胞健康。

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人類單核細胞 (PBMCs)

單核細胞，包括周邊血單核細胞 (PBMCs)，代表從臍帶血或周邊血中分離出來的淋巴細胞和單核細胞部分。它們是以最佳化的低密度梯度離心法製備，可有效降低粒細胞含量。紅血球則採用專利技術輕柔但徹底地去除，而非滲透性裂解。這可製造出超純的單核細胞，具有優異的存活能力，且生物功能不變。PBMC 可直接用於實驗，或作為分離多種細胞類型的起始材料，例如造血和內皮祖細胞、單體細胞和淋巴細胞亞群。

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人類巨噬細胞

巨噬細胞是組織駐留的專業吞噬細胞和抗原呈递細胞 (APC)，由循環的外周血單核細胞分化成 M1 或 M2 表型。巨細胞生成培養基的開發是為了從新鮮分離的人類外周血單核細胞或直接從 PBMCs 作為起始材料高效生成單核細胞衍生巨噬細胞 (MDM)。M1-Macrophage Generation Medium DXF 含有 GM-CSF，可生成 M1 極化巨噬細胞。M2 巨噬細胞生成培養基 DXF 含有 M-CSF，可生成 M2 極化巨噬細胞。這兩種巨噬細胞培養基 DXF 都是定義和不含異種物質的配方，只使用合成、重組或植物來源的材料，此種培養基不含任何動物來源的成分。

應用注意事項： In Vitro Differentiation of Human PBMC Derived Monocytes into M1 or M2 Macrophages in a Serum-free and Xeno-free Cell Culture Media.

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人類樹突狀細胞

樹突狀細胞是高度移動的免疫細胞，也是哺乳類動物免疫系統中最強大的抗原呈递細胞 (APC)。樹突狀細胞是唯一能夠刺激幼稚 T 細胞的抗原呈递細胞，因此它們在適應性免疫的產生過程中舉足輕重。Dendritic Cell (DC) Generation Medium 是為了從外周血單核細胞中簡易且有效率地產生未成熟及完全成熟的髓系 Dendritic Cell 而開發的。DC 生成培養基是一種定義清晰且不含異種物質的配方，可用於新近分離的細胞。由於本培養基完全使用合成、重組或植物來源的材料，因此不含任何動物來源成分。

應用注意事項： In Vitro Differentiation of Human PBMC and CD34+ Derived Monocytes into Mature CD83+/CD14- Dendritic Cells.

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T細胞分化的基質細胞

T淋巴細胞在胸腺中由骨髓衍生的造血幹細胞（HSCs）和祖細胞（HSPCs）發育而成。  在體外，各種模型系統已被用來模仿胸腺功能以支持T細胞的發育。最近，我們開發了一種新的無血清人工胸腺器官（ATO）系統，它支持從多種來源的 HSPCs（包括臍帶血、骨髓和外周血 CD34+ HSPCs）進行高效、可重複的體外分化和人類 T 細胞的正向選擇。 ATO系統的一個關鍵組成部分是MS5-DLL1細胞系，它消除了對原始胸腺組織的需求。 為了形成器官組織，MS5-DLL1基質細胞通過離心與HSPCs聚合，並在 Millicell^® 細胞培養插入物 在定義的無血清培養基。

參考文獻： Amélie Montel-Hagen et al. Generation of mature T cells from human hematopoietic stem/progenitor cells in artificial thymic organoids.Nat Methods.2017 May; 14(5)：521-530.

產品描述	零件編號
MS5-mDLL1 基質細胞株 (Mouse DLL1/mStrawberry)	SCC166
MS5-hDLL1 Stromal Cell Line (Human DLL1/eGFP)	SCC167