單位定義：在 20 °C、pH 值為 6.0 的條件下，一個單位的過氧化物酶將在 20 秒內從焦棓酚中形成 1.0 毫克的紫棓素。
注意事项
有关危害和安全处理方法的信息，请查阅材料安全数据表。
1.0 M 磷酸二氢钾溶液 （目录编号 P8709) 1.0 M 磷酸二氢钾溶液 （产品目录编号 P8584)
過氧化氫 30% (w/w) 溶液 (目錄編號 H1009)
焦膽醇 (目錄編號 H1009。span class="LD__Headline--H2">試劑製備說明 (儲存/穩定性)
試劑製備使用超純水 (25°C時電阻率≥18 MΩ×cm) 。
磷酸緩衝液（100 mM 磷酸鉀緩衝液，pH 6.0，20 °C）- 加入 17.36 ml 1。0 M 磷酸鉀單基質溶液 （目錄編號 P8709）。加入 2.64 ml P8584），并用超纯水调节至最终体积 200 ml。在 20 °C 下使用 1 N KOH 或 1 N HCl 調整至 pH 6.0。在冰上儲存磷酸緩衝液。
過氧化物溶液（0.50% [w/w] 過氧化氫 [H2O2] 溶液） - 用 1：使用 H1009)在超純水中稀釋 1:60。
注意：為對照品和樣品準備新的稀釋液，並將溶液保存在有蓋的 4 釐米小瓶中，放在冰上以減少暴露於空氣中。
焦化酚溶液（5% [w/v] 焦化酚溶液）- 使用 配製 50 mg/ml 的溶液。Pyrogallol （目錄編號 254002）於超純水中，置於琥珀色小瓶中（或以鋁箔紙覆蓋）。
注意：新鮮製備，並將此溶液置於冰上避光保存。
過氧化酶溶液 - 在 COLD 磷酸緩衝液中製備 10 mg/ml 的過氧化酶溶液。使用前，立即在 COLD 磷酸緩衝液中製備含 0.45-0.75 單位/毫升過氧化酶的工作溶液。
注意：10 mg/ml 儲備溶液可用於 RZ 因子測定。
程序
最終分析濃度 - 在 3.00 mL 反应混合物中，最终浓度为 14 mM 磷酸二氢钾、0.027%（v/v）过氧化氢、0.5%（w/v）焦棓酚和 0.45-0.75 单位过氧化物酶。
注意：每次运行一个比色皿，因为最大速率在第一分钟。
1.将以下试剂移入合适的比色皿中：
2.倒置混合，在適當恆溫的分光光度計中平衡至 20 °C ~10 分鐘。
註： 所有比色管可同時孵育，但每次只讀取一個比色管。
3.然後加入：
註： 所有比色管可同時孵育，但每次只讀取一個比色管。
4.立即倒置混合並記錄 3 分鐘內 A420 的增加。使用所有 Tests 和 Blank 的最大線性速率或 0.5 分鐘間隔，取得 DA420/20 秒。
適用性準則：速率 DA420/20 秒必須在 0.18-0.34 之內。如有必要，可修改酵素濃度。
結果
計算
1.
其中：
3 = 化驗容量（毫升）
df = 稀釋係數
12.0 = 1 mg/mL Purpurogallin 在 420 nm 波長的消光係數（內部測定）
0.1 = 使用酶的體積（毫升）
2.
3.
參考資料
04/17-1
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