T3924

トリプシン-EDTA 溶液

1 ×, sterile; sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture, 0.5 g porcine trypsin and 0.2 g EDTA, 4Na per liter of Hanks′ Balanced Salt Solution with phenol red

• 別名: Cell dissociation enzyme
• Enzyme Commission number: 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)
• MDL番号: MFCD00130286
• UNSPSCコード: 12352204
• NACRES: NA.78

特性

• 由来生物: Porcine
• 無菌性: sterile; sterile-filtered
• 製品種目: BioReagent
• 形状: solution
• 分子量: 23.4 kDa
• 濃度: 1 ×
• テクニック: cell culture | mammalian: suitable; single cell analysis: suitable
• 不純物: Porcine parvovirus, none detected (9 CFR)
• pH: 7.0-9.0
• 輸送温度: dry ice
• 保管温度: −20°C

詳細

アプリケーション

この製品の代表的な用途は、培養表面から接着細胞を除去することです。 細胞をその基質から除去するのに必要なトリプシンの濃度は、主に細胞型と培養物の齢によって決まります。

シーケンシングのための単一細胞懸濁液の調製に適しています。

生物化学的／生理学的作用

トリプシンは、リジンとアルギニン残基の C 末端側のペプチドを切断します。 この反応の加水分解速度は、切断箇所のどちらかの側に酸性残基がある場合に遅くなり、また、C 末端側にプロリン残基がある場合、加水分解は停止します。 トリプシン活性の至適 pH は 7 ～ 9 です。 トリプシンはまた、合成アミノ酸誘導体のエステルおよびアミド結合も切断できます。 EDTA は、トリプシンの作用するペプチド結合を曖昧にするカルシウムやマグネシウムイオンを中和するキレート剤として、トリプシン溶液に添加されます。 これらのイオンの除去は、酵素活性を上昇させます。

DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF およびアプロチニンなどを含むセリンプロテアーゼ阻害剤は、トリプシンを阻害します。

構成

トリプシンは、223 アミノ酸残基からなる単鎖ポリペプチドであり、トリプシノーゲンからの、Lys - lle 結合の位置で切断された N 末端側のヘキサペプチドの除去によって生成されます。 アミノ酸配列は、6 個のジスルフィド結合によって架橋されています。 これがトリプシンのネイティブフォームである、βトリプシンです。 βトリプシンは自己消化によって Lys - Ser 残基の位置で切断され、αトリプシンを生成します。 トリプシンは、セリンプロテアーゼファミリーに属します。

注意

本製品は、-10°C～-40°Cで冷凍保存されます。凍結融解の繰り返しは避けてください。

調製ノート

本製品は、フェノールレッドを含んでいます。

安全性情報

• 保管分類コード: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• 引火点(°F): Not applicable
• 引火点(℃): Not applicable