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アプリケーション
アルカリホスファターゼは、脱リン酸化カゼインなどのタンパク質に用いることができます。アルカリホスファターゼを用いて、DNAまたはRNAの5'-末端を脱リン酸化し、セルフライゲーションを予防することもできます。DNAまたはRNAは、アルカリホスファターゼによる脱リン酸化後に(T4ポリヌクレオチドキナーゼにより)放射性同位元素標識リン酸をタグとして融合することもできます。
抗体及びタンパク質接合に対して推奨される高い比活性グレードを有します。
Alkaline phosphatase is usually conjugated to antibodies and other proteins in immunological techniques such as ELISA, Western blotting, and immunohistochemistry. It is routinely used to dephosphorylate proteins and nucleic acids. It may be used for protein labeling when high sensitivity is required. Alkaline phosphatase may be also be used to dephosphorylate the 5′-termini of DNA or RNA to prevent self-ligation. DNA or RNA can also be tagged with radiolabeled phosphate (via T4 polynucleotide kinase) after dephosphorylation with alkaline phosphatase. Product P7923 has been used in a novel screening strategy for nitrilase-producing strains.
The enzyme has been used to develop a highly sensitive immunoassay for determining one thousandth of an attomole (1 zeptomole) of alkaline phosphatase. It has been used in an immunoassay of proinsulin. It has also been used to pretreat ISG (immature secretory granule) membranes to study the phosphorylation of proteinacous components in it.
生物化学的／生理学的作用
本酵素はアルコール、アミン、ピロリン酸、及びフェノールのリン酸エステルに対して広い特異性を有しています。タンパク質及び核酸を脱リン酸化するために、日常的に使用されます。
Alkaline phosphatase, from bovine intestinal mucosa, is most stable in the pH range 7.5-9.5. The enzyme has a broad specificity for phosphate esters of alcohols, amines, pyrophosphate, and phenols. It requires zinc, and magnesium or calcium divalent ions for activity.
The enzyme is a glycoprotein containing approximately 12% carbohydrate (6% hexoses and 6% other neutral sugars). Each molecule of alkaline phosphatase contains four zinc atoms and four disulfide bridges. Maximal activity with alkaline phosphatase is achieved in the presence of magnesium. It catalyzes the hydrolysis of phosphate monoesters such as: p-nitrophenyl phosphate, phenyl phosphate, phenolphthalein phosphate, α-glycerol phosphate, β-glycerol phosphate, 2-phosphorylglycerate, triosephosphate, glucose-6-phosphate, glucose 1-phosphate, fructose 1-phosphate, fructose 6-phosphate, adenosine 5-phosphate adenosine 3-phosphate, phosphoenolpyruvate, and β-nicotinamide adenine dinucleotide phosphate. Arsenate, cysteine, iodine, inorganic phosphate, pyrophosphate, diisopropyl phosphate, triphenylphosphate, diisopropyl fluorophosphate, and L-phenylalanine are some of the strong inhibitors of alkaline phosphatase.
物性
ウシの腸管内のアルカリホスファターゼは二量体で、膜由来の糖タンパク質です。少なくとも3つのアイソフォームが存在し、通常は単量体あたり2つのN結合型グリカンと1つ以上のO結合型グリカンを有します。
ウシの腸管内のアルカリホスファターゼは二量体で、膜由来の糖タンパク質です。少なくとも3つのアイソフォームが存在し、通常は単量体あたり2つのN結合型グリカンと1つ以上のO結合型グリカンを有します。2 本酵素は、作用するために亜鉛、並びにマグネシウム又はカルシウムのニ価イオンを必要とします。
単位の定義
1 DEAユニットは、pH 9.8、37°C、1分間に、1 μmolの4-ニトロフェニルリン酸を加水分解する酵素量です(1 グリシンユニットは約3 DEAユニットに相当します)。
物理的形状
5 mM Tris, 5 mM MgCl2および0.1 mM ZnCl2を含有する50%グリセロ-ル( pH 7.0)に溶解された溶液
アナリシスノート
タンパク質はBiuret法で測定。
容量は、DEA unitに基づいています。
基質
シグナルワード
Danger
危険有害性情報
危険有害性の分類
Resp. Sens. 1
保管分類コード
10 - Combustible liquids
WGK
WGK 1
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
個人用保護具 (PPE)
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
Jan Code
P7923-1KU:
P7923-VAR:
P7923-2KU:
P7923-50KU:
P7923-10KU:
P7923-BULK:
試験成績書（COA）
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
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プロトコル
Enzymatic Assay of Alkaline Phosphatase, Diethanolamine Assay (EC 3. 1. 3. 1)
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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