D9779

DL-Ditiotreitolo

for molecular biology, ≥98% (HPLC), ≥99% (titration)

• Sinonimo/i: (±)-Ditiotreitolo, rac-Ditiotreitolo, Ditiotreitolo, treo-1,4-dimercapto-2,3-butandiolo, DTT, Reagente di Cleland
• Formula condensata: HSCH₂CH(OH)CH(OH)CH₂SH
• Numero CAS: 3483-12-3
• Peso molecolare: 154.25
• Beilstein: 1719757
• Numero CE: 222-468-7
• Numero MDL: MFCD00004877
• Codice UNSPSC: 12161504
• ID PubChem: 24894330
• NACRES: NA.31

Proprietà

• Grado: for molecular biology
• Saggio: ≥98% (HPLC); ≥99% (titration)
• Forma fisica: powder
• Impiego in reazioni chimiche: reagent type: reductant
• Punto di fusione: 41-44 °C (lit.)
• Solubilità: H₂O: 50 mg/mL
• Cationi in tracce: heavy metals (as Pb): ≤5 ppm
• Compatibilità: suitable for molecular biology
• Attività estranea: DNase, RNase, protease, none detected
• Temperatura di conservazione: 2-8°C
• Stringa SMILE: O[C@H](CS)[C@H](O)CS
• InChI: 1S/C4H10O2S2/c5-3(1-7)4(6)2-8/h3-8H,1-2H2/t3-,4-/m1/s1; VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N

Descrizione

Descrizione generale

Il ditiotreitolo (DDT) è un reagente ideale per mantenere i gruppi –SH delle proteine nello stato ridotto. Avvia la reazione di scambio tiolo-disolfuro che porta alla riduzione completa dei legami disolfuro inter- o intra-subunità nelle biomolecole. Viene usato per ridurre in maniera specifica il ponte disolfuro dell'agente reticolante N,N′-bis(acriloil)cistammina, e scindere quindi la matrice del gel di poliacrilammide (SDS- PAGE). Di conseguenza, è molto efficace se impiegato con tamponi che riducono i disolfuri in maniera quantitativa. Il DTT è meno aggressivo e meno tossico rispetto al 2-mercaptoetanolo. È anche 7 volte più efficace del beta-mercaptoetanolo.

Applicazioni

Il DL-ditiotreitolo viene usato nei campioni proteici per ridurre i legami disolfuro prima di caricar il campione sul gel per Western Blot o SDS-PAGE. È stato usato nella procedura dell′ibridazione in situ dell′mRNA.

È stato impiegato anche:

• come componente per l′estrazione di proteine nelle analisi di western blot
• per preparare il tampone di lisi del campione per analisi di spettrometria di massa quantitativa
• come componente del tampone chinasi per il dosaggio con immunoadsorbente legato ad un enzima (ELISA)

Un reagente eccellente per impedire l′ossidazione di gruppi SH ridotti; riduce i disolfuri quantitativamente. DTT è efficace in soluzioni tampone dei campioni per ridurre i legami proteina disolfuro prima dell′SDS-PAGE. DTT può anche essere usato per ridurre il ponte disolfuro del reticolante N,N′-bis(acriloil)cistammina per scindere la matrice del gel di poliacrilammide. DTT è meno aggressivo e tossico rispetto al 2-mercaptoetanolo. Tipicamente si ricorre a una concentrazione di DTT (100 mM) sette volte più bassa rispetto al 2-mercaptoetanolo (5% v/v, 700 mM).

Azioni biochim/fisiol

Il ditiotreitolo (DDT) è largamente impiegato nella preparazione delle proteine tiolate per via biochimica e nella sintesi dei peptidi per via chimica. Il DTT è usato anche nell′ambito della chimica delle proteine, negli studi sul ripiegamento delle proteine e sull′attività enzimatica.

Caratteristiche e vantaggi

• Adatto per biologia molecolare
• Privo di RNasi, DNasi, esonucleasi e proteasi
• Alta purezza (HPLC ≥98%)
• Senza metalli pesanti ≤5 ppm

Altre note

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Informazioni sulla sicurezza

• Pittogrammi: GHS05,GHS07
• Avvertenze: Danger
• Indicazioni di pericolo: H302,H315,H318
• Consigli di prudenza: P264 - P280 - P301 + P312 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338 - P332 + P313
• Classi di pericolo: Acute Tox. 4 Oral - Eye Dam. 1 - Skin Irrit. 2
• Codice della classe di stoccaggio: 11 - Combustible Solids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 3
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable
• Dispositivi di protezione individuale: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves