Nitrit szennyeződések kezelése: Nitrózamin-kockázat mérséklésére irányuló beszállítói-gyártói megközelítés

Az N-nitrozodimetilamin (NDMA) és más nitrózaminok a valószínűsíthető emberi rákkeltő anyagok¹ kategóriájába tartoznak, és először 2018-ban azonosították őket valszartánt tartalmazó gyógyszerkészítményekben. A kisméretű, erős hatású alkilnitrózaminok, mint például az NDMA, általában kiindulási anyagként, reagensként, oldószerként használt másodlagos amin prekurzorokból vagy ezek szennyeződéseiből keletkeznek a gyógyszerhatóanyagok (API) szintézise vagy a gyógyszerkészítmények gyártása és tárolása során. A nitrózaminok egy másik típusa az úgynevezett NDSRI-k (Nitrosamine Drug Substance Related Impurities), amelyek sérülékeny aminokat tartalmazó API-kból vagy API szennyeződésekből származnak. Az első azonosítás óta mind a nitrózaminokat, mind az NDSRI-ket megtalálták más gyógyszerekben². A aktív gyógyszer-összetevők (API-k),készítményeket és csomagolásokat vizsgáló értékelés kimutatta, hogy mind a nitrózaminok, mind az NDSRI-k elterjedtebbek, mint korábban hitték. Tekintettel potenciális biztonsági kockázatukra, a gyógyszergyártóknak fel kell mérniük a nitrozamin szennyeződések szintjét a gyógyszeripari termékekben, és meg kell határozniuk a megfelelő csökkentő intézkedéseket.³

Ez az oldal ismerteti a nitrozaminok keletkezésének módját, a nitrozaminok és kémiai prekurzorok előfordulását a gyógyszeripari termékekben, a mennyiségi meghatározási módszereket és a nitrit szennyeződések kezelésére szolgáló stratégiákat.

A szakasz áttekintése

• A nitrózaminok képződése
• A nitrózamin-prekurzorok előfordulása a gyógyszerekben
• Módszerek a nitritek mennyiségi meghatározására
• A nitritek forrásai a segédanyagokban
• Az Emprove^® termékek kategorizálása a nitritszintek alapján

A nitrózaminok képződése

A nitrózamin szennyeződések leggyakrabban másodlagos aminokból származnak, amelyek lehetnek kiindulási anyagok vagy szennyeződések az API-k szintéziséhez használt nyersanyagokban, maguk az API-k vagy az API-val kapcsolatos szennyeződések. Az elsődleges aminok nem képesek nitrózaminokat képezni, míg a harmadlagos aminok nitrozatív de-alkilezést vagy nitrozatív hasadást igényelnek, amelyek sokkal lassabb folyamatok. A kvaterner ammóniumionok másodlagos és harmadlagos aminokká bomolhatnak, vagy szennyeződésként tartalmazhatják azokat.

Nitrozamin-prekurzorok előfordulása a gyógyszerekben

A nitrozamin-prekurzorok lehetséges előfordulását a gyógyszerekben a közelmúltban megjelent publikációban Schlingemann, et al. és 2021-re világossá vált, hogy számos hatóanyag olyan prekurzorokat tartalmaz, amelyek potenciálisan NDSRI-ket⁴ képezhetnek. Több adatbázist is áttekintettek a szekunder és tercier aminok gyógyszerekben és gyógyszer szennyeződésekben való jelenléte szempontjából; az adatbázistól függően a bejegyzések 25-40%-a tartalmazott szekunder vagy tercier aminokat, a másodlagos aminok a bejegyzések 10-19%-át tették ki.

A Journal of Phamaceutical Sciences által 2023-ban közzétett, a nitrozaminok hatásosságát vizsgáló átfogó áttekintés szerint a másodlagos aminokból származó nitrozaminok elsősorban a kevésbé hatásos kategóriákba tartoznak, és csak egy kis hányadukat sorolták a leghatásosabb⁵ kategóriába. A tercier aminokból származó nitrózaminok viszonylag egyenletesen oszlanak meg a potencia-kategóriák között, míg a potens NDSRI-k nagyobb valószínűséggel származnak kevésbé reaktív tercier aminokból, mint szekunder aminokból.

Módszerek a nitrit mennyiségi meghatározására

A nitrit jelenlétének kimutatására több módszer is rendelkezésre áll, de nem mindegyik alkalmazható a nyomnyi mennyiség ng/g szinten történő meghatározására.⁶

A griess-származtatás egy olyan közvetett mennyiségi meghatározási módszer, amely egy egyszerű reakción alapul, amely a nitriteket egy rózsaszínű azo-festékre vezeti át. Ez a deriválás növeli a visszatartást az RP-HPLC-ben. A minta mátrixa azonban gátolhatja a kémiai reakciót, és ha nem történik meg a teljes átalakulás, a minta nitrittartalma alulbecsülhető. A Griess-származtatást követő HPLC-MS/MS alkalmazása a stabil izotóphígításos elemzéssel kompenzálja a változó hozamokat, és nagy érzékenységet és specifikusságot biztosít. E módszer alkalmazásakor azonban matematikai korrekcióra van szükség a spektrális izotópátfedések miatt.

>.Az anioncserélő kromatográfia vezetőképesség-detektálással közvetlen módszer a nitrit kimutatására, de a gyakori interferenciák miatt más megközelítésekhez képest alacsonyabb érzékenységet és specificitást kínál. A ion-kromatográfia (IC) és az oszlop utáni Griess-származtatás kombinációja lehetővé teszi az UV-detektálást, és eltávolítja a Griess-reakciót esetleg elnyomó zavaró vegyületeket.

A kihívást jelentő mintamátrixok miatt ortogonális módszerekre van szükség a nitrit kimutatására, mivel az UV-aktív mátrixok a HPLC-UV-ban koelúcióhoz vezethetnek, ami megakadályozza a pontos integrációt. Ebben a helyzetben nagyobb specificitású technikákat, például LC-MS/MS-t vagy más elválasztási mechanizmust, például IC-t kell alkalmazni oszlop utáni derivatizálással (PCD) a nitrit elválasztására, majd derivatizálására.

A sók vagy más anyagok, amelyek nagy ionterhelést hoznak a ionkromatográfiás eljárás telítheti a oszlopot, megakadályozva a nitrit beépülését.

Ha a minta mátrixkomponensei gátolják a Griess-reakciót, a nitrit mennyiségi meghatározása közvetlen detektálással (IC-CD) vagy mátrixeltávolítással (IC-PCD-UV) végezhető.

Az 1. táblázat összefoglalja a különböző nitritdetektálási módszereket és az egyes módszerek jellemző mennyiségi határértékeit (LOQ).

A nitritek forrásai a segédanyagokban

A nitritek jelenléte a segédanyagok a nitrozaminok képződésének kockázatát jelenti a gyógyszerkészítményekben; ezek a nyersanyagokból vagy a segédanyaggyártás során alkalmazott lépésekből, például a porlasztva szárításból származnak, 2. táblázat. Nitrozaminok képződhetnek a gyógyszerkészítmények formulálása és tárolása során is. A nitrozáló szer és az oldószerekből, reagensekből, reakció melléktermékekből, nyers- és kiindulási anyagokból vagy bomlástermékekből származó sérülékeny aminok kombinációja megfelelő körülmények között kis molekulatömegű nitrozaminok képződéséhez vezethet.

Az FDA a 2021. évi, az iparnak szóló iránymutatásában kiemeli a nitritek segédanyagokban való jelenléte miatt a nitrózamin szennyeződések kialakulásának kockázatát.⁷ Hasonlóképpen,  az EMA megállapítja, hogy a nitriteket szennyeződésként azonosították és számos gyakori segédanyagban, és a forgalomba hozatali engedély jogosultjainak vagy kérelmezőinek tisztában kell lenniük azzal, hogy a nitrózamin szennyeződések a segédanyagokban lévő nitritek miatt az elfogadható beviteli szinteket meghaladó mértékben képződhetnek.⁸

Az Emprove^® termékek kategorizálása a nitritszintek alapján

A több mint 350 termék, amelyet a Emprove^® Essential, a Emprove^® Expert és a Emprove^® API portfólió nitritek jelenlétét vizsgálták, és a nitritek szintje alapján három kategóriába sorolták.

• Nitritkoncentráció 200 ng/g alatt vagy a LOQ alatt:  alacsony szintű kockázatot jelent a nitritek releváns szintjének a folyamatba való bevezetése szempontjából.
• Nitritszint 200 és 500 ng/g között: legalább egy tételben kimutatták a nitritek jelenlétét, és ezeket a termékeket rendszeresen vizsgálják a nitritszintek ellenőrzése céljából. Ezek a termékek mérsékelt aggodalomra adnak okot.
• Nitritszint  >500 ng/g legalább egy tételben. Bár ez többnyire az ppm alatti tartományban van, további ellenőrzési lépéseket alkalmaznak, és további tételadatokat gyűjtenek a rendszeres ellenőrzés megvalósítható határértékének és módszerének levezetése érdekében. 

A nitrit jelenlétével kapcsolatos információkat az Emprove^® anyagminősítési és működési kiválósági dossziék tartalmazzák, amelyek ezeket a termékeket kísérik. Ezek az információk támogatják a nitrózaminok gyógyszerkészítményekben történő képződésének kockázatértékelését, és értékes információkkal látják el a gyógyszergyártókat a nitrózaminok kockázatának mérsékléséhez és a betegek gyógyszerbiztonságának javításához. Töltse le az ingyenes Emprove^® vegyi anyagok demo dossziéit.