Puffer Referencia Központ

• A kiválasztott biológiai puffer pH-tartományai táblázat (25 °C, 0.1 M)
• Tris vagy Trizma^® Pufferkészítés - pH vs. Hőmérséklet
• Foszfát puffer készítése - 0.2 M oldat
• Citromsav - Na₂HPO₄ Pufferkészítés, pH 2.6-7,6
• Citromsav - nátrium-citrát pufferkészítmény, pH 3,0-6.2
• Nátriumacetát - ecetsav pufferkészítmény, pH 3,7-5.6
• Na₂HPO₄4 - NaH₂PO₄ pufferkészítmény, pH 5.8-8.0 25 °C-on
• Imidazol (glioxalin) - HCl pufferkészítmény, pH 6,2-7.8 25 °C-on
• Nátriumkarbonát - nátrium-bikarbonát pufferkészítmény, pH 9.2-10,8
• Pufferkészítmény képletek és egyenletek

A megfelelő biológiai puffer kiválasztása

Válasszon puffert a pH-követelmények, valamint a pKa alapján, amely a pH, a koncentráció és a hőmérséklet figyelembevételével méri a saverősséget. A pontos alkalmazáshoz szükséges szabályozási vagy tisztasági követelményeket is figyelembe kell venni. Az alábbi táblázatok segíthetnek eligazodni számos gyakori pufferoldat pH és pKa szerinti elkészítésében. 

Az alábbi táblázatokon kívül számos pufferrecept-kalkulátort fejlesztettünk ki, amelyek segítik a pufferkészítést.

TBE és TAE gélelektroforézishez receptjei kissé bonyolultabbak. Segítünk kiválasztani a megfelelőt.

Mi a pufferfokozat?

A pufferfokozat a különböző felhasználási célokra megfelelő minőséget és szennyeződésszintet jelzi. Hat pufferfokozatot kínálunk, amelyek általános laboratóriumi felhasználásra, végső gyógyszerformulázásra és -gyártásra, valamint a kettő közötti alkalmazásokhoz vannak feltüntetve, amelyekhez nyomfémvizsgálatra vagy meghatározott tisztaságú anyagokra lehet szükség.

Kiemelt biológiai pufferek hasznos pH-tartományai (25 °C, 0,1 M)

Pufferek	Hasznos pH-tartomány	pKa (20 °C-on)	pKa (25 °C-on)	pKa (25 °C-on).C-on)	pKa (37 °C-on)	Reagens fokozat	BioPerformance Certified Grade
MES	5.5-6.7	6.16	6.10	5.97	M8250	M2933
Bis-Tris	5.8-7.2	n/a	6.50	6.36	B9754	B4429
ADA	6.0-7.2	6.65	6.59	6.46	A9883	n/a
ACES	6.1-7.5	6.88	6.78	6.54	A9758	A3594
PIPES	6.1-7.5	6.80	6.76	6.66	P6757	P1851
MOPSO	6.2-7.6	n/a	6.90	6.75	M8389	n/a
Bis-Tris propán	6.3-9.5	n/a	6.8, 9.0	n/a	B6755		B4679
BES	6.4-7.8	7.17	7.09	6.90	B9879	B4554
MOPS	6.5-7.9	7.28	7.20	7.02	M1254	M3183
TES	6.8-8.2	7.50	7.40	7.16	T1375	T5691
HEPES	6.8-8.2	7.55	7.48	7.31	H3375	H4034
DIPSO	7.0-8.2	n/a	7.60	7.35	n/a	n/a
MOBS	6.9-8.3	n/a	7.60	n/a	M3295	n/a	M3295	n/a
TAPSO	7.0-8.2	n/a	7.60	7.39	T9269		n/a
Tris vagy Trizma®	7.0-9.0	8.20	8.06	7.72	T1503	T6066
HEPPSO	7.1-8.5	n/a	7.80	6.66	n/a	n/a
POPSO	7.2-8.5	n/a	7.80	7.63	P3405	n/a
TEA	7.3-8.3	n/a	7.80	n/a	n/a	n/a
EPPS	7.3-8.7	n/a	8.00	n/a	E9502		E0276
Tricin	7.4-8.8	8.16	8.05	7.80	T0377	T5816
Gly-Gly	7.5-8.9	n/a	8.20	n/a	G1002		G3915
Bicin	7.6-9.0	8.35	8.26	8.04	B3876	n/a
HEPBS	7.6-9.0	n/a	8.30	n/a	H6903	n/a	H6903	n/a
TAPS	7.7-9.1	8.49	8.40	8.18	T5130	T5316
AMPD	7.8-9.7	n/a	8.80	n/a	A9754	n/a	A9754	n/a
TABS	8.2-9.6	n/a	8.90	n/a	n/a	n/a
AMPSO	8.3-9.7	n/a	9.00	9.10	A6659	n/a
CHES	8.6-10.0	9.55	9.49	9.36	C2885	n/a
CAPSO	8.9-10.3	n/a	9.60	9.43	C2278	n/a
AMP	9.0-10.5	n/a	9.70	n/a	n/a	n/a
CAPS	9.7-11.1	10.56	10.40	10.02	C2632	n/a
CABS	10.0-11.4	n/a	10.70	n/a	C5580	n/a

Tris vagy Trizma^® pufferkészítési táblázat - pH a hőmérséklet függvényében

5 °C			25 °C	37 °C
7.20	6.91
7.89	7.30	7.02
7.97	7.40	7.12
8.07	7.50	7.22
8.18	7.60	7.30
8.26	7.70	7.40
8.37	7.80	7.52
8.48	7.90	7.62
8.58	8.00	7.71
8.68	8.10	7.80
8.78	8.20	7.91
8.88	8.30	8.01
8.98	8.40	8.10
9.09	8.50	8.22
9.18	8.60	8.31
9.28	8.70	8.42
9.36	8.80	8.51
9.47	8.90	8.62
9.56	9.00	8.70

g/L a 0.05 M oldat
Trizma® HCL	Trizma® Base
0.67
6.85	0.80
6.61	0.97
6.35	1.18
6.06	1.39
5.72	1.66
5.32	1.97
4.88	2.30
4.44	2.65
4.02	2.97
3.54	3.34
3.07	3.70
2.64	4.03
2.21	4.36
1.83	4.65
1.50	4.90
1.23	5.13
0.96	5.32
0.76	5.47

Foszfát puffer készítési táblázat - 0,2 M oldat  

Kálium  Foszfát monobázikus vízmentes g/L	Nátrium-foszfát Dibázikus heptahidrát g/L	23 °C pH
22.4	3.49	5.7
22.08	4.29	5.8
21.60	5.37	5.9
21.05	6.60	6.0
20.40	8.05	6.1
19.56	9.93	6.2
18.60	12.07	6.3
17.64	14.22	6.4
16.44	16.90	6.5
15.00	20.12	6.6
13.56	23.34	6.7
12.24	26.29	6.8

	Monobázikus kálium-foszfát Vízmentes g/L	Nátrium-foszfát Dibázikus heptahidrát g/L	23 °C pH
10.80	29.51	6.9
9.36	32.73	7.0
7.92	35.95	7.1
6.72	38.63	7.2
5.52	41.31	7.3
4.56	43.46	7.4
3.84	45.07	7.5
3.12	46.68	7.6
2.52	48.55	7.7
2.04	49.09	7.8
1.68	49.89	7.9
1.27	50.81	8.0

Citromsav - Na₂HPO₄ Pufferkészítmény, pH 2,6-7.6¹

Citromsav-monohidrát, C₆H₈O₇ - H₂O, MW 210.14; 0,1 M 21,01 g/L-t tartalmaz. Na₂HPO₄, MW 141,98; 0,2 M 28,40 g/L-t tartalmaz, vagy Na₂HPO₄ - 2H₂O, MW 178.05; 0,2 M 35,61 g/L-t tartalmaz.


x mL 0,1 M citromsav és y mL 0,2 M-Na₂HPO₄ keverve

pH	x mL 0,1 M-savas citromsav	y mL 0.2-Na2HPO4
2.6	89,10	10,90
2,8	84.15	15.85
3.0	79.45	20.55
3.2	75.30	24.70
3.4	71.50	28.50
3.6	67.80	32.20
3.8	64.50	35.50
4.0	61.45	38.55
4.2	58.60	41.40
4.4	55.90	44.10
4.6	53.25	46.75
4.8	50.70	49.30
5.0	48.50	51.50
5.2	46.40	53.60
5.4	44.25	55.75
5.6	42.00	58.00
5.8	39.55	60.45
6.0	36.85	63.15
6.2	33.90	66.10
6.4	30.75	69.25
6.6	27.25	72.75
6.8	22.75	77.25
7.0	17.65	82.35
7.2	13.05	86.95
7.4	9.15	90.85
7.6	6.35	93.65

Citromsav - nátrium-citrát pufferkészítmény, pH 3,0-6.2¹

Citromsav-monohidrát, C₆H₈O₇ - H₂O, MW 210.14; 0,1 M 21,01 g/L-t tartalmaz. Trinátrium-citrát-dihidrát, C₆H₅O₇Na₃ - 2H₂O, MW 294.12; 0,1 M 29,41 g/L-t tartalmaz.

x mL 0,1 M-citromsav és y mL 0,1 M-triszátrium-citrát keveréke

pH	x mL 0,1 M-savas citromsav	y mL 0.1 M-triszátrium-citrát
3.0	82.0	18.0
3.2	77.5	22.5
3.4	73.0	27.0
3.6	68.5	31.5
3.8	63.5	36.5
4.0	59.0	41.0
4.2	54.0	46.0
4.4	49.5	50.5
4.6	44.5	55.5
4.8	40.0	60.0
5.0	35.0	65.0
5.2	30.5	69.5
5.4	25.5	74.5
5.6	21.0	79.0
5.8	16.0	84.0
6.0	11.5	88.5
6.2	8.0	92.0

Nátriumacetát - ecetsav puffer KÉSZítmény, pH 3,7-5.6¹

Nátrium-acetát trihidrát, CH₃COONa - 3H₂O, MW 136.09; 0,2 M 27,22 g/L-t tartalmaz.

x mL 0,2 M-NaOAc és y mL 0,2 M-HOAc összekeverve

pH, 18 °C	x mL 0,2 M-NaOAc	y mL 0.2 M-HOAc
3.7	10.0	90.0
3.8	12.0	88.0
4.0	18.0	82.0
4.2	26.5	73.5
4.4	37.0	63.0
4.6	49.0	51.0
4.8	59.0	41.0
5.0	70.0	30.0
5.2	79.0	21.0
5.4	86.0	14.0
5.6	91.0	9.0

Na₂HPO₄ - NaH₂PO₄ puffer előkészítés, pH 5.8-8,0 25 °C-on¹

Na₂HPO₄ - 2H₂O, MW 178,05; 0,2 M 35,61 g/L-t tartalmaz. Na₂HPO₄ - 12H₂O, MW 358,22; 0,2 M 71,64 g/L-t tartalmaz. NaH₂PO₄ - H₂O, MW 138,01; 0,2 M 27,6 g/L-t tartalmaz. NaH₂PO₄ - 2H₂O, MW 156,03; 0,2 M 31,21 g/L-t tartalmaz.

x mL 0.2 M-Na₂HPO₄, y mL 0,2 M-NaH₂PO₄; 100 mL-re hígítva H₂O-val

pH, 25 °C	x mL 0,2 M-Na2HPO4	y mL 0.2 M-NaH2PO4
5.8	4.0	46.0
6.0	6.15	43.85
6.2	9.25	40.75
6.4	13.25	36.75
6.6	18.75	31.25
6.8	24.5	25.5
7.0	30.5	19.5
7.2	36.0	14.0
7.4	40.5	9.5
7.6	43.5	6.5
7.8	45.75	4.25
8.0	47.35	2.65

Imidazol (glioxalin) - HCl puffer KÉSZÍTÉS, pH 6,2-7.8 25 °C-on¹

Imidazol, C₃H₄N₂, MW 68.08


25 mL 0,2 M-imidazol (13,62 g/L), x mL 0,2 M-HCl, 100 mL-re hígítva H₂O-val

pH, 25 °C	x mL 0.2 M-HCl
6,2	21,45
6.4	19,9
6,6	17,75
6,8	15.2
7.0	12.15
7.2	9.3
7.4	6.8
7.6	4.65
7.8	3.0

Nátrium-karbonát - nátrium-bikarbonát puffer KÉSZítmény, pH 9,2-10.8¹

Na₂CO₃ - 10H₂O, MW 286,2; 0,1 M 28,62 g/L-t tartalmaz. NaHCO₃, MW 84,0; 0,1 M tartalmaz 8,40 g/L.


x mL 0.1 M-Na₂CO₃ és y mL 0,1 M-Na₂HCO₃ keverve

20 °C	37 °C
x mL 0.1 M-Na2CO3	y mL 0.1 M-Na2HCO3
9.2	8.8	10	90
9.4	9.1	20	80
9.5	9.4	30	70
9.8	9.5	40	60
9.9	9.7	50	50
10.1	9.9	60	40
10.3	10.1	70	30
10.5	10.3	80	20
10.8	10.6	90	10

Pufferkészítési képletek és egyenletek

Meghatározott tömegszázalék (w/v)

(% kívánt puffer / 100) × végső puffertérfogat (ml) = g szükséges kiindulási anyag.

Moláris oldatok

kívánt molaritás × képlet tömege × oldat végső térfogata (L) = szükséges gramm

Henderson-Hasselbach-egyenlet

Hivatkozás

1. Dawson R, Elliot D, Elliot W, Jones KM. 1986. Data for Biochemical Research. 3rd ed.. Oxford Science Publ..