Mikrobiális táptalajok előkészítése

A táptalajok típusai

A mikrobiális táptalajoknak optimális növekedési feltételeket kell biztosítaniuk valamennyi vagy meghatározott típusú mikroorganizmus számára. A táptalaj pontos összetétele a termesztendő fajtól és az alkalmazási céltól függ. A táptalaj pH-értékét a mikroorganizmusoktól függően kell beállítani. A mikrobiális táptalajokat több paraméter, például kémiai összetevők, fizikai jelleg és funkció alapján osztályozzák. Az alábbiakban az e paraméterek alapján meghatározott táptalajtípusok kerülnek ismertetésre.

A mikrobiális táptalajok osztályozása kémiai összetétel alapján

A szintetikus (meghatározott) táptalaj meghatározott kémiai összetételű táptalaj, amelyet általában fotoautotrófok, például cianobaktériumok és fotoszintetikus protiszták tenyésztésére használnak. Széles körben használják a kutatásban, a mikroorganizmus anyagcseréjének tanulmányozására.

A komplex táptalaj a különböző mikroorganizmusok táplálkozási igényeinek megfelelő, nem meghatározott kémiai összetevőket, például peptont, húskivonatot és élesztőkivonatot tartalmazó táptalaj. Komplex tápanyagigényű, igényes mikrobák tenyésztésére használják.

Fizikai természet alapján készült mikrobiológiai táptalajok

A szilárd táptalaj 1-7% agar-agart vagy 10-20% zselatint használ a folyékony leves megszilárdítására. A szilárd táptalajt különböző mikrobák egymástól való elkülönítésére, tiszta tenyészetek létrehozására, agar-slants és agar-szúrások készítésére használják.

A folyékony táptalaj nem tartalmaz szilárdító anyagokat. Beoltás és inkubálás után a sejtek kis massza vagy húsleves elmosódás formájában válnak láthatóvá.

Mikrobiális táptalajok az elkészítési mód alapján

A kész táptalaj olyan szilárd vagy folyékony táptalaj, amelyet lemezekben, palackokban, csövekben vagy más tartályokban, használatra kész formában vagy újraolvasztás és kiegészítés után használatra kész állapotban szállítanak.

A kereskedelmi forgalomban kapható dehidratált készítményekből készült táptalaj olyan száraz formában lévő táptalaj, amely a felhasználás előtt rehidratálást és feldolgozást igényel, és így vagy teljes táptalajt, vagy hiányos táptalajt kap, amelyhez a felhasználás előtt kiegészítéseket adnak.

Egyedi komponensekből készített táptalaj a mikrobiológiai laboratórium által teljes egészében az egyes összetevőkből előállított táptalaj.

Az on-demand táptalaj olyan rendszerrel előállított táptalaj, amely egy laboratóriumban több napon keresztül magas koncentrációjú, steril táptalajt tart rendelkezésre. Steril vízzel történő hígítással igény szerint, autoklávozás nélkül képes előállítani a szükséges mennyiségű, felhasználásra kész táptalajt.

Mikrobiális táptalajok előállítása

A táptalaj előállítása dehidratált kereskedelmi készítményekből a gyártó utasításai szerint történik. Az alapvető összetevők, mint a peptonok, élesztőkivonatok, agar, pufferanyagok és antibiotikumok összetételét a táptalaj konzisztenciájának elérése érdekében módosítják. A szükséges mennyiségű dehidratált táptalajt vagy az egyes összetevőket desztillált vízben folyamatos keveréssel, majd (ha szükséges) melegítéssel oldjuk fel. Az agart tartalmazó táptalajt megfelelő keverés mellett kellően át kell áztatni a melegítés előtt. A pH-értéket be kell állítani, és a táptalajt megfelelő tartályokba adagoljuk, hogy autoklávban nedves hővel sterilizáljuk. A hőérzékeny anyagokat (pl. fehérjék, enzimek) membránszűrők alkalmazásával sterilizáljuk.

A táptalajt meghatározott hőmérsékleten kell tárolni, hogy az összetétel ne változzon, és ne legyen hosszabb a termék eltarthatósági idejénél. A tápközegek mikrobiális fertőzéssel szembeni védelme érdekében elengedhetetlen az aszeptikus előkészítés és tárolás. A tárolás során fellépő vízveszteség minimálisra csökkenthető vízzáró csomagolással és/vagy 5 °C ± 3 °C-on történő tárolással. A kémiai degradáció, pl. oxidáció vagy antimikrobiális veszteség, fénytől, hőtől és dehidratációtól való védelemmel késleltethető.