mPAGE^® Lux Casting System pro SDS-PAGE gely

Objevte mPAGE^® Lux Casting System pro gely SDS-PAGE připravené k použití během 3 minut. Čerstvé gely SDS-PAGE, které jsou připraveny, kdykoli je potřebujete. Pokud máte dotazy a chcete se dozvědět více o tom, jak odlévat rychleji, klikněte sem a vyplňte formulář a náš tým vás bude kontaktovat.

mPAGE^® Lux Odlévací systém pro gely SDS-PAGE

Jak se odlévá gel pro SDS-PAGE? Odlévání gelů obvykle zahrnuje nalévání rozlišovacích a stohovacích gelů v časově náročném, postupném procesu. Výzkumní pracovníci mají tradičně jen málo možností, jak uspokojit své potřeby v oblasti lití gelů a elektroforézy. Náš inovativní systém odlévání gelů mPAGE^® Lux SDS-PAGE je navržen tak, aby poskytoval flexibilitu ručně odlévaných gelů a spolehlivost prefabrikovaných gelů bez ztráty kvality, času nebo výrazně vyšších nákladů, které provázejí alternativní možnosti. S naším systémem mPAGE^® Lux Casting System získáte gely za méně než tři minuty. Můžete dát sbohem konvenčním metodám a jejich časově náročným, manuálním krokům pro tvorbu gelu. To je čerstvé.

Přečtěte si více informací o

• mPAGE^® Lux Casting System Features and Benefits
• Jaké jsou kroky odlévání gelu?
• mPAGE^® Lux Casting System a Bis-Tris Reagent Kit
• mPAGE^® Lux SDS-PAGE Gel Cast Protocol
• mPAGE^® Lux Bis-Tris gely s pufry MOPS a MES
• Udržitelné odlévání gelů s mPAGE^® Lux Casting System
/a>
• Objednejte si mPAGE^® Lux Casting System a související činidla

 

mPAGE^® Lux Vlastnosti a výhody odlévacího systému

Odlévací systém mPAGE^® Lux nahradí váš proces odlévání do gelu rychlejšími, jednoduššími a bezpečnějšími metodami s reprodukovatelnějšími výsledky. Pomocí systému mPAGE^® Lux Casting System vytvrdíte minigel za 90 sekund ve srovnání s běžnými metodami, které trvají více než 90 minut. Náš rychlý pracovní postup odlévání s UV zářením urychluje vytvrzování mPAGE^® Lux Bis-Tris reagencií, zatímco chemie Bis-Tris gelu umožňuje kratší dobu běhu ve srovnání s konvenčními metodami.

Jednokroková fotopolymerizace s přesným řízením systému a menším počtem přípravných kroků znamená menší možnost chyby. Náš mPAGE^® Caster zabraňuje únikům a použití gelů Bis-Tris poskytuje vynikající kvalitu pásů ve srovnání s ručně litými gely Tris-Glycin. Kromě toho souprava mPAGE^® Lux Reagent Kit, souprava mPAGE^® TurboMix Reagent Kit a prefabrikované gely mPAGE^® používají chemii Bis-Tris a mají stejné provozní pufry a barvení gelu. Náš systém mPAGE^® Lux Casting System nepoužívá APS ani TEMED a nabízí bezpečnější variantu s použitím méně toxických chemikálií.

Tradiční pracovní postup ručního odlévání

Obrázek 1. Infografika tradičního pracovního postupu ručního odlévání gelů SDS-PAGE zobrazující prodloužené kroky a dobu polymerace 90 minut a více.

mPAGE^®Lux Workflow

Obrázek 2. Tradiční odlévání gelu vs. pracovní postup mPAGE^® Lux. Systém mPAGE^® Lux Casting má ve srovnání s tradiční technologií odlévání gelu méně celkových kroků, kratší dobu polymerace a méně toxického odpadu. Gely vytvořené pomocí systému mPAGE^® Lux Casting jsou kompatibilní s nádržkou mPAGE^® Mini-gel Tank a buňkami Bio-Rad Mini-PROTEAN. Pro dosažení vynikajícího rozlišení a zkrácení doby běhu použijte naše pufry mPAGE^®. Gely Lux jsou kompatibilní s pufry a barvicími činidly kompatibilními s Bis-Tris.

Jaké jsou kroky lití gelu?

Lití SDS-PAGE gelu často zahrnuje vážení, předmíchání gelových roztoků, lití a čekání na polymeraci. Konvenční metody ručního odlévání gelu jsou sice často uváděny jako ekonomičtější řešení, ale jsou časově náročné a vyžadují mnoho praktických kroků, které mohou vést k nekonzistentním formulacím gelu. Kvalita ručně odlévaných gelů a údaje, které mohou pomoci získat, závisí na konzistenci složení, aby se nakonec neplýtvalo drahocennými činidly a časem při selhání gelu.

Obrázek 3. Porovnání kvality dat s mPAGE^® Lux Bis-Tris gelem a ručně odlitým tris-glycinovým gelem. Kvalita pásů mPAGE^® Lux Bis-Tris gelu (vlevo) v porovnání s ručně odlitým tris-glycinovým gelem (vpravo). Oba gely jsou 10% akrylamidové a jsou zatíženy titrací lyzátu lidských buněk A431. Doba elektroforézy je 42 minut při 200 V (Lux gel) a 119 minut při 120 V (tris-glycinový gel). Gely jsou obarveny barvivem ReadyBlue™ Coomassie gel.

Systém mPAGE^® Lux Casting System nabízí inovativní řešení procesu odlévání gelu. Už si nemusíte vybírat, zda ušetříte čas, nebo prostředky. Náš nový systém odlévání gelů umožňuje výzkumným pracovníkům snadno a rychle odlévat gely, když je potřebují, a to za zlomek nákladů oproti technologiím prefabrikovaných gelů. Zvyšte efektivitu své laboratoře a vylepšete svůj pracovní postup elektroforézy gelů pomocí systému mPAGE^® Lux Casting System.

Obrázek 4. Srovnání metod Western blottingu pro mokrý, rychlý a polosuchý přenos. Srovnání bylo provedeno pomocí 12% mPAGE^® Lux Bis-Tris gelů, které byly spuštěny s titrací lyzátu lidských buněk A431 a s různými metodami přenosu na membrány Immobilon^®-P. Membrány byly blotovány protilátkami anti-EGFR a anti-ErK1/2 a poté detekovány pomocí substrátu Immobilon^® ECL Ultra Western HRP. Turbo metoda = přenos pomocí přenosového systému Bio-Rad Trans-Blot^® Turbo™ Transfer System a přenosových balíčků Trans-Blot^® Turbo™ Transfer Packs.

Obrázek 5: Reprodukovatelnost gelů mPAGE^® Lux Bis-Tris. A. Byly odlity čtyři 8% gely a provedeny s titrací lyzátu lidských buněk A341 následně obarveného barvivem ReadyBlue™ Coomassie. B. Pro každý gel byla vypočtena relativní migrační vzdálenost (Rf) pro neobarvený marker molekulové hmotnosti. Pro každý proteinový pás je uvedena směrodatná odchylka.

Obrázek 6. Analýza trvanlivosti činidel mPAGE^® Lux Bis-Tris. mPAGE^® Lux Bis-Tris gely odlité s použitím činidel (A) starých 0 měsíců, (B) 6 měsíců nebo (C) 12 měsíců. Nebyl pozorován žádný rozdíl ve vzoru chodu nebo době chodu.

mPAGE^® Lux<./span> Casting System a sady reagencií Bis-Tris

Přidejte do své laboratoře mPAGE^® Lux Casting System a získejte gely připravené k použití do 3 minut. Nadechněte se a zvykněte si na rychlý proces odlévání gelů s menším množstvím odpadu a bez obav ze selhání. To je čerstvé. Naše sady systému mPAGE^® Lux Casting System se skládají z vytvrzovací stanice mPAGE^® Lux, mPAGE^® Lux Mixing Tube, mPAGE^®. Gel Caster, mPAGE^® Hřeben s 10 jamkami a 15 jamkami, mPAGE^® Mini Spacer Plate, mPAGE^® Lux Masked Short Plates s 10 jamkami a 15 jamkami. Pro systém mPAGE^® Lux Casting o tloušťce 0,75 mm nejsou hřebenové destičky s 15 jamkami a maskované krátké destičky součástí dodávky. Následují popisy sad a konfigurace:

*K dispozici se zástrčkou NEMA 5-15P (YP12), CEE 7/7 (YP22), typu G (YP61), YP18 nebo typu I (YP03).

Popis sady	Položky/množství	Obsahující díl č.	Katalogové číslo sady.
Lícovací systém Lux, 1 mm*	Lícovací stanice Lux (1)	mPAGE® Lux (1)<.br> mPAGE® Lux Mixing Tube (5) mPAGE® Gel Caster (2) mPAGE® Hřeben 1.0 mm, 10 jamek (5) mPAGE® Hřeben 1,0 mm, 15 jamek (5) mPAGE® Distanční destička 1.0 mm (5) mPAGE® Lux Masked Short Plates 10 jamek (5) mPAGE® Lux Masked Short Plates 15 jamek (5)	LUXGCS LUXMIXTB GCR2 C1M10W C1M15W .MSPA10 LUXSHRTP10W LUXSHRTP15W	LUXCSYS-1M
mPAGE® Lux Casting System, 0.75 mm*	mPAGE® Lux vytvrzovací stanice (1) mPAGE® Lux Mixing Tube (5) mPAGE® Gel Caster (2) mPAGE® Comb 0.75 mm, 10 jamek (5) mPAGE® Distanční destička 0.75 mm (5) mPAGE® Lux Masked Short Plates 10 jamek (5)	LUXGCS LUXMIXTB GCR2 C75M10W MSPA75 LUXSHRTP10W	LUXCSYS-75M
mPAGE® Lux Casting System, 1.5 mm*	mPAGE® Lux vytvrzovací stanice (1) mPAGE® Lux Mixing Tube (5) mPAGE® Gel Caster (2) mPAGE® Hřeben 1. 5 mm, 10 jamek (5) mPAGE® Hřeben 1,5 mm, 15 jamek (5) mPAGE® Distanční destička 1.5 mm (5) mPAGE® Lux Masked Short Plates 10 jamek (5) mPAGE® Lux Masked Short Plates 15 jamek (5)	LUXGCS LUXMIXTB GCR2 Bezdrátové připojení k internetu.C15M10W C15M15W MSPA15 LUXSHRTP10W LUXSHRTP15W	LUXCSYS-15M

Obrázek 7. mPAGE^® Lux Curing Station

Sada reagencií mPAGE^® Lux Bis-Tris je specializovaná sada reagencií pro odlévací systém mPAGE^® Lux. Sada mPAGE^® Lux Bis-Tris Reagent Kit se skládá ze 3 složek: Roztok pro rozpouštění, Ředidlo a Roztok pro stohování. Sada podporuje různé akrylamidové gely v rozmezí 8,0-13,5 %. mPAGE^® Lux Reagent Kit popis a konfigurace:

Popis sady	Položky/množství	Obsahující díl č.	Katalogové číslo sady.
Sada reagencií Lux Bis-Tris® Lux Bis-Tris	Roztok pro rozpuštění Lux Bis-Tris® Lux Bis-Tris (1)<.br> mPAGE® Lux Bis-Tris stohovací roztok (1) mPAGE® Lux Bis-Tris ředidlo (1)	LUXRGTRES LUXRGTSTK LUXRGTDIL	LUXRGTKIT

 mPAGE^® L<<.span class="h2-lowercase">ux SDS-PAGE Gel Cast Protocol

Všechny roztoky musí být chráněny před slunečním zářením, aby nedošlo k polymeraci. Před odléváním gelů uveďte všechny roztoky na pokojovou teplotu.

Resolvingový gel

1. Připravte roztok resolvingového gelu smícháním resolvingového roztoku a ředidla. Objem míchání viz níže uvedená tabulka. Roztok Rozpouštěcího gelu lze připravit ve velké dávce, aby se postupně vytvořilo několik gelů.
2. Pomocí čisté pipety přidejte Rozpouštěcí roztok do černé směšovací zkumavky nebo jiné neprůhledné nádoby.
3. Pomocí čisté pipety přidejte Ředidlo do stejné směšovací zkumavky.
4. Míchejte jemným otáčením nádoby dnem vzhůru. Nevrtejte.

Objem roztoku pro rozpouštěcí gel

Níže uvedené objemy použijte k vytvoření jednoho 1,0 mm gelu. Objem roztoku 0,75 mm a 1,5 mm naleznete v úplném návodu k použití, který je k dispozici na stránce produktu na SigmaAldrich.com.

Procento gelu	Roztok		Ředidlo		Celkový objem
8%	2 ml/p>	+	3 ml	=	5 ml
10%	2.5 ml	+	2.5 ml	=		5 ml
12%	3 ml	+	2 ml	=	5 ml
13.5%	3.3 ml	+	1.7 ml	=	5 ml

Stacking Gel

Stacking Solution je připraven k použití přímo z lahvičky. Pro 1,0 mm gel použijte 1,5 ml stohovacího roztoku. Důležité: Neřeďte Stacking Solution.

Odlévání gelu

1. Skleněné destičky vyčistěte jemným čisticím prostředkem a opláchněte vodou DI. Před použitím otřete 70% etanolem.
2. Sestavte mPAGE^® Gel Caster pomocí mPAGE^® Spacer Plate a mPAGE^® Lux Masked Short Plate a vytvořte skleněnou kazetu. Maskovaná krátká destička by měla být orientována tak, aby byl text na levé straně kazety. Před zavřením svorek kolečka se ujistěte, že jsou obě skleněné desky zarovnány na spodní straně rámu kolečka. Poznámka: Maskovaná krátká deska mPAGE^® Lux musí být použita s vytvrzovací stanicí mPAGE^®.
3. Zapněte vytvrzovací stanici mPAGE^® Lux stisknutím tlačítka napájení. Curing Station zahájí autotest. Po dokončení autotestu se zobrazí obrazovka připravenosti.
4. Otevřete dvířka a umístěte kolečko s gelem do stanice Curing Station, přičemž kolečko zarovnejte za nárazníky.
5. Pomocí čisté pipety o objemu 5 ml přidejte připravený roztok rozpouštěcího gelu do vyznačené plnicí čáry na rámu stanice mPAGE^® Gel Caster.
6. Pomocí čisté 5ml pipety pomalu přidávejte stohovací roztok až do horní části krátké destičky.
7. Pomalu zasuňte hřeben mPAGE^® pod úhlem, abyste zabránili tvorbě vzduchových bublin pod zuby. Důležité: Míchání různých formátů jamek může vést k nesprávnému vytvoření jamek. Použití: V případě, že se jedná o váleček, který se nachází na okraji jamky, je nutné použít tzv:
   • 10-well combs with 10-well mPAGE^® Lux Masked Short Plates
   • 15-well combs with 15-well mPAGE^® Lux Masked Short Plates
8. Utírejte rozlitý roztok z přední strany krátké destičky, abyste zabránili neúplnému vytvrzení v místech, kde je rozlitý roztok.
9. Zavřete dvířka vytvrzovací stanice a zvolte tloušťku gelu.
10. Stisknutím tlačítka Start zahájíte vytvrzování gelu. Tip: Pokud odléváte více gelů, zahajte proces odlévání gelu s druhým gelovým podstavcem nyní, zatímco první gel vytvrzuje.
11. Po dokončení vytvrzování otevřete dvířka a vyjměte gelový podstavec. Kazetu z Gel Casteru vyjměte spuštěním napínací spony, aby se uvolnil rám kolečka. Poté otevřete boční strany rámu a vysuňte kazetu shora.
12. Gel použijte okamžitě nebo kazetu zabalte do vlhké papírové utěrky a uložte ji naležato v sáčku se zipem nebo jiné vzduchotěsné nádobě při teplotě 2-8 °C až na 2 týdny. Nenechávejte kazety nezabalené, protože gel vysychá.

Jak odstranit gel po elektroforéze

Ze skleněné kazety odstraňte gel pomocí škrabky na gel. Řezte podél okrajů gelu (vpravo), aby nedošlo k jeho roztržení. mPAGE^® Lux Bis-Tris gely by měly být používány POUZE s MOPS-SDS nebo MES-SDS běžícím pufrem. Gely Bis-Tris NEJSOU kompatibilní s běžícím pufrem Tris-Glycin.

mPAGE^® Lux<./span> Bis-Tris gely s pufry MOPS a MES

mPAGE^® Lux Bis-Tris gely jsou navrženy tak, aby pracovaly výhradně s pufry MOPS nebo MES. V závislosti na tom, který běhový pufr je použit, lze dosáhnout velmi odlišných separačních vzorů. Pufr MOPS lze použít k jemnému doladění separace velkých a středně velkých proteinů, zatímco pufr MES poskytuje optimální separaci menších proteinů. Podle migračních grafů (obrázek 8) určete, který systém gelového pufru je nejvhodnější pro zamýšlený rozsah separace.

Obrázek 8. Migrační grafy mPAGE^® Lux Bis-Tris gelů s MOPS SDS Running Buffer a MES SDS Running Buffer (kDa).

Udržitelný gelový odlitek s mPAGE^® Lux gelovým odlévacím systémem./h2>

Pro vyčíslení udržitelných dopadů našeho systému mPAGE^® Lux Casting System byly provedeny výpočty oproti použití reprezentativní rychlé odlévací soupravy pro ruční odlévání polyakrylamidových gelů pro elektroforézu proteinů. Oba systémy vyžadují použití opakovaně použitelných odlévacích souprav a souprav činidel pro ruční odlévání. Odlévací systém mPAGE^® Lux navíc vyžaduje použití stanice pro vytvrzování gelů mPAGE^® Lux, zatímco základní systém vyžaduje použití soupravy APS &; TEMED, které se prodávají odděleně od soupravy činidel pro ruční odlévání.

V tomto hodnocení jsou zohledněny všechny komponenty potřebné k odlévání elektroforézních gelů po dobu minimální životnosti stanice mPAGE^® Lux Curing Station, která činí 5 let. To zahrnuje výrobu, balení, distribuci, používání a dopady po skončení životnosti soupravy pro ruční odlévání, potřebných činidel a veškerého potřebného spotřebního laboratorního materiálu. Výpočty byly provedeny za předpokladu 250, 500 nebo 1000 gelů vyrobených za rok a byl deklarován minimální rozdíl oproti základnímu systému.

Atributy udržitelnosti materiálů a výrobků

Ačkoli je systém mPAGE^® Lux Casting System inovativním řešením pracovního postupu pro ruční odlévání polyakrylamidových gelů, stále vyžaduje určité použití plastového spotřebního materiálu a nebezpečných činidel. Přestože v této aplikaci neexistuje žádná vhodná náhrada akrylamidu, byla z tohoto systému odstraněna všechna zbývající chemická nebezpečí a množství potřebných plastových spotřebních materiálů je oproti základnímu systému výrazně sníženo.

Dodatečná hmotnost stanice pro vytvrzování gelů, kterou vyžaduje systém mPAGE^® Lux Casting System, je kompenzována snížením množství produktů potřebných v pracovním postupu odlévání gelů, jak je znázorněno na grafu. Po celou dobu životnosti přístroje se celková hmotnost systému sníží nejméně o 20 % ve srovnání se systémy pro rychlé lití.

Hmotnost systému po celou dobu životnosti (kg) pro lití 500 gelů/rok:

Obrázek 5. Srovnání hmotnosti systému (kg) za dobu životnosti při odlévání 500 gelů/rok pro systém mPAGE^® Lux Casting a referenční systém produktu. Tmavě modrá = referenční systém výrobku. Světle modrá = systém mPAGE^® Lux Casting.

Tento výrobek navíc dodržuje zásady strategie SMASH Packaging, která podporuje zlepšování udržitelnosti obalů prostřednictvím menšího množství obalů, udržitelnějších materiálů a snadnější recyklace.

• Obaly výrobků a dalších položek potřebných pro funkční jednotku jsou oproti základnímu systému sníženy o 30 %.
• 100 % systémových obalů na bázi vláken má certifikaci udržitelného lesnictví.
• Všechny ochranné pěnové vložky jsou vyrobeny ze 100% recyklovaného polyethylenu.
• Obaly neobsahují žádné materiály, které by bránily recyklaci podle našich směrnic SMASH.

mPAGE^® Lux Casting System Distribuce a použití výrobku

Snížení potřebného spotřebního materiálu a eliminace některých činidel vede k výraznému snížení dopadů spojených s přepravou. Snížení hmotnosti pravidelně přepravovaných součástí a souvisejících obalů činí nejméně 24 % po dobu minimální životnosti přístroje.

Tabulka 1. Celková úspora hmotnosti za 5 let u systému mPAGE^® Lux.

Úspory za 5 let
Gely/rok	Reagencie	Laboratoř
250	4.7 kg	12.8 kg
500	8.4 kg	12.8 kg
1000	16.1 kg	22.1 kg

Přestože přidaný přístroj vyžaduje během provozu energii, byla stanice mPAGE^® Lux Casting Station navržena s ohledem na energetickou účinnost. Díky využití LED osvětlení a jednoduchého, ale intuitivního uživatelského rozhraní zůstává celková spotřeba energie pozoruhodně nízká. Kumulativní spotřeba energie potřebná k vytvrzení 1000 gelů je pouze 1,65 kWh, což odpovídá přibližně 33 hodinám používání notebooku. Množství jednorázového plastového odpadu, které vzniká v průběhu celého pracovního postupu odlévání gelu, se snižuje nejméně o 25 %. Navíc se činidla mPAGE^® Lux při vystavení okolnímu osvětlení sama polymerují, čímž se eliminují nepolymerované zbytky akrylamidu v odpadních tocích.

Při odlévání čerstvých gelů připravených k použití podle potřeby se eliminuje riziko předpřípravy gelů, které zůstanou nevyužity. Systém mPAGE^® Lux odstraňuje potřebu skladovat sady činidel nebo předem odlité gely v různých procentech, což snižuje množství odpadu vznikajícího v důsledku expirace komponent. Vytvrzovací stanice mPAGE^® Lux je elektronické zařízení, a jako takové musí být likvidováno v souladu se všemi platnými předpisy. Další informace o likvidaci elektronického odpadu naleznete na naší stránce WEEE Compliance.

Tento výrobek vykazuje výrazné zlepšení oproti základnímu systému v průběhu celého životního cyklu výrobku a byl označen jako ekologičtější alternativní výrobek. Další informace naleznete na naší stránce o našem rámci Design for Sustainability a našich ekologičtějších alternativních produktech.