Meio de Eagle modificado por Dulbecco F12 (DMEM F12)
Nos últimos anos, pesquisadores relataram o cultivo de diversas linhagens celulares em meio sem soro que contém um suplemento de nutrientes, fatores de crescimento e hormônios ao invés de soro. Mather e Sato (BBRC, 1985) relataram o cultivo bem-sucedido de células de Leydig e Sertoli em meio sem soro que continha insulina, transferrina, fator de crescimento epidérmico, hormônio luteinizante ou hormônio estimulante folicular, somatomedina e hormônio de crescimento.
Embora os hormônios e suas concentrações sejam específicos para o tipo de célula sendo estudada, o meio considerado ideal para esses estudos foi uma mistura de 1:1 de Meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) e a mistura de nutrientes F-12 de Ham. Essa mistura conhecida como meio DMEM/F12 e contém 21 aminoácidos, 10 vitaminas, glicose, ferro e zinco, entre outros componentes.
O DMEM/F12 é um meio mais rico e complexo do que o DMEM. O tampão de HEPES pode ser incluído na formulação em concentração final de 15 mM para compensar a perda de capacidade de tamponamento que ocorre com a eliminação do soro. Este meio sintético não contém nenhum soro, proteínas, lipídios ou fatores de crescimento e, portanto, pode exigir suplementação com soro bovino fetal (FBS), dependendo do tipo de cultura celular. Algumas formulações comerciais podem ou não incluir glutamina ou vermelho de fenol.
Produtos
Aplicações DMEM/F12
O meio basal avançado DMEM/F12 é frequentemente usado em aplicações que exigem meios com baixo teor de soro ou sem soro, como cultura de organoides 3D ou cultura de células-tronco. Os meios DMEM/f12 também podem ser usados para ajudar a otimizar as transfecções celulares que exigem condições com pouco soro ou sem soro.
Além da cultura de células-tronco, que geralmente requer um ambiente com pouco ou nenhum soro, as células primárias podem ser cultivadas em meios DMEM/F12. Isso inclui fibroblastos, células MDCK, linhagens de células neuronais, células gliais e células musculares lisas, que apresentam crescimento e função equivalentes ou superiores aos das células primárias que foram suplementadas com altas concentrações de soro. As células cultivadas com meio DMEM/F12 também exibem a mesma morfologia celular que as células cultivadas em condições de alto teor de soro.
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