MABE343

Anticorpo antipuromicina, clone 12D10

clone 12D10, from mouse

• Sinônimo(s): Anti-puromicina, Anticorpo de detecção de puromicina, Clone 12D10 anti-puromicina
• Código UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41
• clone: 12D10, monoclonal
• application: FACS; ICC; IF; IHC; IP; WB
• reatividade de espécies: human
• técnica(s): flow cytometry: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunofluorescence: suitable; immunohistochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• citations: 657

Propriedades

• fonte biológica: mouse
• Nível de qualidade: 100
• forma do anticorpo: purified immunoglobulin
• tipo de produto de anticorpo: primary antibodies
• clone: 12D10, monoclonal
• reatividade de espécies: human
• reatividade da espécie (prevista por homologia): all
• técnica(s): flow cytometry: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunofluorescence: suitable; immunohistochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgG2aκ
• Condições de expedição: wet ice
• modificação pós-traducional do alvo: unmodified
• Informações sobre genes: human ... NPEPPS(9520)

Descrição

Descrição geral

A puromicina é um antibiótico aminonucleosídeo, derivado da bactéria Streptomyces alboniger, que funciona como um inibidor da síntese proteica que bloqueia a tradução através da terminação prematura da cadeia no ribossomo. Os anticorpos monoclonais antipuromicina podem ser usados com métodos imunoquímicos padrão para monitorar diretamente a tradução, um método conhecido como detecção de superfície da tradução (SUnSET, do inglês surface sensing of translation). Parte da molécula se assemelha à extremidade 3′ do tRNA aminoacilado, tornando-a útil para a análise da tradução de proteínas. A puromicina induz a fragmentação do DNA em timócitos e em células de leucemia HL-60 humanas.

Especificidade

O anticorpo anti-puromicina, clone 12D10, demonstrou reagir com amostras de teste humano, pré-incubadas com puromicina. Espera-se que reaja com todas as espécies quando a amostra de teste é incubada com puromicina.

Imunogênio

Puromicina de Streptomyces alboniger

Aplicação

Análise de western blot (coloração de proteínas totais): Os lisados de células HEK293 tratadas com puromicina e ciclo-hexamida, ou apenas puromicina, foram separados usando SDS-PAGE e transferidos para uma membrana. As proteínas foram visualizadas com o uso do corante Ponceau S.

Análise imunocitoquímica: Uma diluição de 1:10.000 de um lote representativo detectou proteínas neossintetizadas incorporadas à puromicina nas células HeLa tratadas com puromicina.

Análise de western blot: Um lote representativo detectou proteínas neossintetizadas incorporadas à puromicina em WB (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6): 678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.; Clavarino, G., et al. (2012). PLoS Pathog. 8(5):e1002708.; David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.; Hulmi. J. J., et al. (2012). Am J Physiol Endocrinol Metab. 304(1):E41-50.; Bhattacharya, A., et al. (2012). Neuron. 76(2):325-337.; Hoeffer, C. A., et al. (2013). J Neurophysiol. 109(1):68-76.).

Análise por imunofluorescência: Um lote representativo detectou proteínas neossintetizadas incorporadas à puromicina em WB (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6): 678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.;David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; David, A., et al. (2011). J Biol Chem. 286(23):20688-20700.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Goodman, C. A., et al. (2012). Proc Natl Acad Sci USA. 109(17):E989.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.).

Análise imuno-histoquímica: Um lote representativo detectou proteínas neossintetizadas incorporadas à puromicina em IHQ (Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.).

Análise de separação de células ativada por fluorescência: Um lote representativo detectou proteínas neossintetizadas incorporadas à puromicina em FACS (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277).

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Categoria de pesquisa
Epigenética e função nuclear

O anticorpo antipuromicina, clone 12D10, detecta puromicina incorporada na proteína. Os anticorpos monoclonais antipuromicina podem ser usados com métodos imunoquímicos padrão.

Subcategoria de pesquisa
Metabolismo de RNA e proteínas de ligação

Qualidade

Avaliado por western blot em lisados de células HEK293 tratadas com puromicina e ciclo-hexamida, ou apenas com puromicina.

Análise de western blot: Uma diluição de 1:25.000 deste anticorpo detectou proteínas neossintetizadas incorporadas à puromicina nos lisados de células HEK293 tratadas apenas com puromicina. Este anticorpo também detectou pequenas quantidades de proteínas neossintetizadas incorporadas à puromicina nas células HEK293 tratadas com puromicina e ciclo-hexamida.

Descrição-alvo

A puromicina é incorporada em proteínas neossintetizadas. Na presença de puromicina apenas, este anticorpo detecta as proteínas neossintetizadas incorporadas à puromicina em vários pesos moleculares. No entanto, um sinal mais fraco é observado na presença concomitante da ciclo-hexamida, um inibidor da biossíntese proteica em organismos eucarióticos.

forma física

Formato: Purificado

IgG2aκ monoclonal de camundongo purificada em tampão contendo Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM com 0,05% de azida sódica.

Purificado com proteína G

Armazenamento e estabilidade

Estável por 1 ano a 2-8 °C a partir da data de recebimento.

Nota de análise

Controle
Lisados de células HEK293 tratadas com puromicina e ciclo-hexamida, ou apenas com puromicina.

Outras notas

Concentração: Vide a concentração específica do lote no certificado de análise.

Informações legais

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