03359123001

Alkalische Phosphatase, rekombinant, hochgradig aktiv

EIA Grade, from Pichia Pastoris

• EC-Nummer: 3.1.3.1 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.21

Eigenschaften

• Qualitätsniveau: 100
• Assay: ≥95% (HPLC)
• Form: buffered aqueous solution (ready-to-use, 20 mg/ml)
• Spezifische Aktivität: ≥7000 units/mg protein (At 37 °C with pNPP and DEA as the substrates)
• Verpackung: pkg of 10 mg (500 μl)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Konzentration: 20 mg/mL (ready-to-use)
• Optimaler pH-Wert: 8.0(Stability); 9.8(Activity)
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: 2-8°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Die alkalische Phosphatase (ALP) ist ein Hydrolase-Enzym. Es handelt sich dabei um eine hochgradig aktive Form in der Darmschleimhaut von Kälbern.[1][2] Die alkalische Phosphatase im Kälberdarm ist ein dimeres Glycoprotein mit einer Molekülmasse von ca. 140 kDa.[3]

Die rekombinante, hochgradig aktive alkalische Phosphatase weist die gleiche Aminosäurensequenz auf wie die native, von Rindern stammende alkalische Phosphatase. Im Fertigungsprozess kommen keine von Tieren stammenden Komponenten zum Einsatz. Dadurch wird das Risiko der bovinen spongiformen Enzephalopathie (BSE) und anderer von Tieren verursachter Infektionen ausgeschaltet.
Das rekombinante Enzym garantiert eine ausgezeichnete Chargenkonsistenz und beseitigt jegliche BSE-Risiken.

Spezifität

Die alkalische Phosphatase katalysiert die Hydrolyse zahlreicher Phosphatester, beispielsweise von Estern primärer und sekundärer Alkohole, Saccharide, cyclischer Alkohole, Phenole und Amine. Phosphodiester reagieren nicht. Das Enzym hydrolysiert anorganisches Pyrophosphat. Die kinetischen Eigenschaften des Enzyms hängen von vielen Faktoren ab, beispielsweise der Reinheit des Enzyms, der Enzymkonzentration im Assay, dem Puffer, dem pH-Wert usw.

Anwendung

Die alkalische Phosphatase kann über ihre Amino- und Kohlenhydratgruppen an andere Proteine gekoppelt werden. Die Enzymlösung kann ohne vorherige Analyse direkt für die Konjugation verwendet werden. Für die Konjugation von AP mit IgG wird ein Verhältnis von 2,5:1 empfohlen. Die Applikation des konjugierten Enzyms bei ELISA-Verfahren, Mikroarrays und Western-Blot-Analysen ist verschieden.

Biochem./physiol. Wirkung

Die alkalische Phosphatase (ALP) ist für das Entfernen von Phosphatgruppen an der 5- und 3- Position von vielen Arten von Molekülen verantwortlich, z. B. von Nukleotiden, Proteinen und Alkaloiden.[2] Es eignet sich auch zur Modifizierung von Lipopolysacchariden durch die Dephosphorylierung der Lipid-A-Gruppe, womit es weniger toxisch wird als das nicht modifizierte Lipid A.[4]

Spezifikationen

≥7.000 U/mg (+37 °C; pNPP; DEA)

Physikalische Form

Lösung in 3 M NaCl, pH-Wert von 7,6, 5 mM Magnesiumchlorid, 0,1 mM Zinkchlorid, 30 mM Triethanolamin.

Angaben zur Herstellung

Aktivator: Mg^2-, Co^2- und Mn^2-ione

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): No data available
• Flammpunkt (°C): No data available