Protokół wolny od RNazy i DNazy

Numer produktu. 11119915001

Protokół

Warunki trawienia RNazą

0.1 mU RNazy, wolnej od DNazy degraduje 1 μg RNA w ciągu 30 minut w temperaturze + 37 °C w objętości reakcji 50 μL wody klasy PCR. Stężenie białka RNazy, wolnej od DNazy wynosi 0,5 μg/μL Aktywność właściwa enzymu wynosi 30 U/mg, co odpowiada 1,5 mU/μL; jeden mikrolitr preparatu RNazy wystarcza do całkowitej degradacji 15 μg RNA w ciągu 30 minut. Ponieważ dokładne stężenie RNA w próbkach biologicznych nie jest dokładnie znane, a zazwyczaj chce się zdegradować RNA ilościowo, zaleca się nadmiar RNazy.

RNazy nie mają specyficznych potrzeb buforu reakcyjnego: są aktywne w czystej wodzie i w obecności Tris lub NaCl.

Aby usunąć RNA z próbek, dodaj RNazę, wolną od DNazy i inkubuj w temperaturze od +15 do +25 °C lub +37 °C.6 komórek i inkubować w temperaturze od +15 do +25 °C lub +37 °C. W przypadku kwasów nukleinowych z 10⁷ komórek dodać 1,5 μL RNazy i inkubować 30 min w temperaturze + 37 °C. Dla kwasów nukleinowych z 10⁸ komórek, dodać 16 μL RNazy i inkubować 30 min w + 37 °C.