ESPCAS9BST

eSpCas9-Blasticidin Lenti Plasmid

• Kod UNSPSC: 41106609
• NACRES: NA.51

Właściwości

• rekombinowane: expressed in E. coli
• Poziom jakości: 200
• opakowanie: vial of 50 μL
• stężenie: 20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of Plasmid DNA)
• Wybór: ampicillin
• Warunki transportu: dry ice
• temp. przechowywania: −20°C

Opis

Opis ogólny

Produkt ten jest plazmidem lentiwirusowym, który wykorzystuje promotor EF1 alfa do napędzania ekspresji eSpCas9 i kasetę oporności na blastycydynę połączoną peptydem 2A (EF1a-eSpCas9-2A-Blasticidin), umożliwiając łatwą selekcję po udanej transfekcji lub transdukcji. Użyj lentiwirusowego plazmidu eSpCas9 firmy Sigma do generowania cząstek lentiwirusowych i wydajnej produkcji stabilnych linii komórkowych wyrażających eSpCas9 do edycji genomu opartej na CRISPR. Plazmid lenti-eSpCas9 firmy Sigma jest jedną z części dwuczęściowego systemu CRISPR z indywidualnymi wektorami ekspresji eSpCas9 i gRNA.

Aby zamówić gRNA w dowolnym formacie kliknij tutaj.

Zastosowanie

Genomika funkcjonalna/walidacja celu

• Tworzenie nokautów genów w wielu liniach komórkowych
• Całkowity nokaut genów niepodatnych na RNAi
• Produkcja cząsteczek lentiwirusowych wyrażających eSpCas9

Cechy i korzyści

• Zwiększona specyficzność w porównaniu do Cas9 typu dzikiego
• Wysoka aktywność
• Gotowy do użycia oczyszczony plazmid DNA

Zasada

Systemy CRISPR/Cas są wykorzystywane przez bakterie i archeony do obrony przed inwazją wirusów i plazmidów. Niedawno system CRISPR/Cas typu II z bakterii Streptococcus pyogenes został zaprojektowany do funkcjonowania w systemach eukariotycznych przy użyciu dwóch składników molekularnych: pojedynczego białka Cas9 i niekodującego RNA (gRNA). Endonukleazę Cas9 można zaprogramować za pomocą pojedynczego gRNA, kierując dwuniciowe pęknięcie DNA (DSB) w pożądane miejsce genomu. Podobnie jak w przypadku DSB indukowanych przez nukleazy z palcem cynkowym (ZFN), komórka aktywuje następnie endogenne procesy naprawy DNA, albo niehomologiczne łączenie końców (NHEJ), albo naprawę ukierunkowaną homologicznie (HDR), aby wyleczyć docelowe DSB. Nowo zmodyfikowany eSpCas9 umożliwia skuteczną ukierunkowaną edycję genów w ustalonych systemach CRISPR z korzyścią w postaci zmniejszonych efektów poza celem. Mutacje punktowe w motywie wiążącym chromosom SpCas9, opisane przez Slaymaker i in., zapewniają wyższą wierność na celu bez utraty wydajności cięcia.[1]

Informacje prawne

Umowa licencyjna na użytkowanieCRISPR

Licencje na fluorofory Lentiviral, WPRE i Evrogen

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Kod klasy składowania: 10 - Combustible liquids
• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 2
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable