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一般描述
胰蛋白酶由含有223个氨基酸残基的单链多肽组成，由胰蛋白酶原在Lys - lle肽键处切去N-端六肽而得。 这些氨基酸序列通过6个二硫键交联。 这就是胰蛋白酶（即β-胰蛋白酶）的天然形式。 BETA-胰蛋白酶可自溶，在Lys-Ser残基裂解，产生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的成员。
应用
对于胰蛋白酶消化肽，胰蛋白酶:肽的使用比例约为1:100至1:20。本品的典型用途是使贴壁细胞从培养表面脱落。 使细胞解离所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养物代数。 Trypsins也被用于细胞培养过程中的细胞再悬浮，在蛋白质组学研究中用于蛋白质的消化，以及在各种凝胶消化中。 其他的应用包括通过基于膜的技术评估结晶，以及在一项研究中确定蛋白质折叠速率和产量可以被动力学陷阱的存在所限制。
用于免疫组织化学程序，以增强染色并在常规固定和处理后揭露抗原。
生化/生理作用
胰蛋白酶可切割赖氨酸和精氨酸残基的C末端肽段。 如果酸性残基位于切割位点的任意一侧，则该反应的水解速度减慢，并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧，则水解停止。 胰蛋白酶活性的最佳pH条件为7-9。 胰蛋白酶还可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键。 将EDTA添加到胰蛋白酶溶液中作为螯合剂，用于中和钙离子和镁离子以防止其抑制胰蛋白酶活性。 去除这些离子会增加酶活性。
丝氨酸蛋白酶抑制剂（包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等）会抑制胰蛋白酶。
丝氨酸蛋白酶抑制剂（包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等）会抑制胰蛋白酶。
注意
1mM HCl 溶液以等分试样可稳定保存 1 年，储存于 -20℃。Ca2+ 的存在也会减少胰蛋白酶的自溶，并维持其在溶液中的稳定性。 在 2.0M 尿素，2.0M 盐酸胍或 0.1％（w/v）SDS 溶液中，胰蛋白酶也将保留其大部分活性。
单位定义
一个BAEE单位以BAEE作为底物，在25°C、pH 7.6条件下每分钟每毫升产生0.001的ΔA253 。一个BTEE单位=320个ATEE单位。反应体积=3.2mL（1cm的光径）。
制备说明
本品为冻干粉末，可溶于浓度为25 mg/mL的Hank′s平衡盐溶液。
对于需要EDTA的应用，溶解胰蛋白酶应该使用不含Ca2+ 或 Mg2+的缓冲盐溶液.
对于需要EDTA的应用，溶解胰蛋白酶应该使用不含Ca2+ 或 Mg2+的缓冲盐溶液.
底物
抑制剂
产品编号
说明
价格
警示用语：
Danger
危险声明
危险分类
Resp. Sens. 1
储存分类代码
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
个人防护装备
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
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实验方案
本方案适用于使用Nα-苯甲酰基-L-精氨酸乙酯（BAEE）作为底物测定胰蛋白酶活性。本方案是基于连续分光光度速率测定（A253，光程= 1cm）方案：
Continuous spectrophotometric rate determination method using BAEE substrate measures trypsin activity, essential for enzyme characterization.
Continuous spectrophotometric rate determination method using BAEE substrate measures trypsin activity, essential for enzyme characterization.
Continuous spectrophotometric rate determination method using BAEE substrate measures trypsin activity, essential for enzyme characterization.
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