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Merck

P5147

Sigma-Aldrich

プロテアーゼ Streptomyces griseus由来

Type XIV, ≥3.5 units/mg solid, powder

別名:

アクチナーゼE, プロナーゼE

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100 MG
¥10,700
1 G
¥36,200
5 G
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About This Item

CAS番号:
EC Number:
MDL番号:
UNSPSCコード:
12352204
eCl@ss:
32160410
NACRES:
NA.54

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由来生物

Streptomyces griseus

品質水準

タイプ

Type XIV

フォーム

powder

比活性

≥3.5 units/mg solid

溶解性

10 mM NaAc (pH 7.5) and 5 mM CaAc: soluble 0.2 mg/mL at 37 °C, clear, colorless to tan

輸送温度

wet ice

保管温度

−20°C

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特異性

細胞外セリンプロテア-ゼを含む3種類以上のプロテア-ゼ活性の混合物です。セリンプロテア-ゼは通常、広範な基質に対して特異性を示します。この特異性は、分子内の1個のAsp残基、1個のHis残基、1個のSer残基で構成される活性部位によるものと考えられています。 この酵素は、グルタミン酸またはアスパラギン酸のカルボキシル基側にあるペプチド結合を選択的に加水分解します。

アプリケーション

Streptomyces griseus(ストレプトマイセス生産菌)からの各種プロテアーゼは以下の用途に使用されています:
  • 髄核(NP)組織の消化[1]
  • ワンスポット不斉マンニッヒ反応の触媒[2]
  • デンプンの除タンパク[3]
  • 細胞解離のための脳スライスの消化。[4]

Sigma の本酵素は、アンチトロンビン-ヘパリン複合体の消化および解析に使用されています。[5]また、酵素耐性デンプンの分離にも使用されています。[6]
プロテアーゼは、ペプチド結合の加水分解によるタンパク質の分解に使用される酵素です。 プロテアーゼは、プロテアーゼ阻害剤や熱失活動力学を研究するための、タンパク質の分解に使用されます。 プロテアーゼは、インキュベーションにおける核酸の分離に使用されます。 Streptomyces griseus 由来プロテアーゼは、テトラペプチドアルデヒドとセリンプロテアーゼによって形成される結合複合体の結晶学的および動力学的研究に使用されています[7]
プロテアーゼは、通常、0.2%ドデシル硫酸ナトリウムと 10 mM EDTA 存在下、0.5 ~ 3 時間のインキュベーションで、核酸の分離に使用されます。
本酵素は、既知のアルカリ性プロテアーゼに比べて、より高いpH領域でより高い活性を示し、0.2 NのNaOH溶液においてもタンパク質分解活性を示します。本酵素は、不溶性タンパク質の分解や、タンパク質構造の研究に有用です。

生物化学的/生理学的作用

プロテアーゼは、ペプチド結合の加水分解によってタンパク質を分解します。 プロテアーゼは、フッ化フェニルメチルスルホニル(PMSF)やジイソプロピルフルオロホスフェートなどのセリン活性部位阻害剤によって不活化されます。 Streptomyces griseus 由来プロテアーゼは、細胞外セリンプロテアーゼを含む少なくとも 3 つのプロテアーゼ活性の混合物です。セリンプロテアーゼは幅広い基質特異性を示し、1 つの Asp、1 つの His、1 つの Ser 残基で構成される分子内の活性部位によって、作用することが知られています。本酵素は、グルタミン酸またはアスパラギン酸のカルボキシル基側のペプチド結合を特異的に加水分解します。
本製品は、3 つ以上のカゼイン分解性活性成分と 1 つのアミノペプチダーゼ活性成分の混合物です。[8]カゼイン分解性の酵素は、Streptomyces griseus プロテアーゼ A、Streptomyces griseus プロテアーゼ B および Streptomyces griseus トリプシンと命名されています。本製品は、タンパク質の広範な、または完全な分解が必要な場合に使用されることがあります。本プロテアーゼ混合物は、極めて非特異的であり、カゼインを 70%以上のモノアミノ酸含量にまで消化します。

特徴および利点

  • pH 8.8 でピーク活性を持ち、pH 5.0 ~ 9.0 で極めて安定
  • 多くの DNA および RNA 分離バッファーに適合
  • 幅広い基質特異性

品質

酢酸カルシウムを含んでいます。

物性

80°Cを越える温度で15~20分間加熱すると完全に不活化されます。

単位の定義

1ユニットは、pH 7.5、37°C、1分間に、カゼインを加水分解して、1.0 μmol(181 μg)のチロシンに相当する呈色を生ずる酵素量です(Folin-Ciocalteu試薬で発色)。

調製ノート

S. griseusの培養ブロスから回収しています。

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ピクトグラム

Health hazardExclamation mark

シグナルワード

Danger

危険有害性情報

危険有害性の分類

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

ターゲットの組織

Respiratory system

保管分類コード

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 2

引火点(°F)

Not applicable

引火点(℃)

Not applicable

個人用保護具 (PPE)

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

Jan Code

P5147-100MG:
P5147-5G:
P5147-BULK:
P5147-1G:
P5147-1G-C:
P5147-5G-C:
P5147-VAR:


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質問

1–6/6 質問  
  1. Is it possible to store P5147 at -80°C after reconstitution?

    1 回答
    1. There is no specific information available about storing the enzyme at -80°C once it has been reconstituted.

      役に立ちましたか?

  2. Under what conditions can Product P5147, Protease from Streptomyces griseus, be used to digest protein?

    1 回答
    1. For DNA isolation, Pronase E is usually prepared as a stock solution, and prior to storage at -20°C, the solution is first heated to 56°C for about 15 minutes, then incubated at 37°C for 1 hour. This encourages self-digestion, to eliminate DNAse and RNAse contamination. The enzyme is added to a DNA sample (in the presence of 0.5-1%(w/v) SDS to disrupt DNA protein interactions) typically at 250-500 μg protein/mL, then incubated at 37°C for 1-4 hours. For protein hydrolysis, dissolve about 0.2 μmol of protein in 0.2 mL of 50 mM ammonium bicarbonate buffer at pH 8 (or phosphate buffer pH 7). Add Pronase to 1% (w/w) and incubate at 37°C for 24 hours. It may be necessary to add aminopeptidase M at 4% (w/w) and incubate at 37°C for another 18 hours.

      役に立ちましたか?

  3. Is Product P5147, Protease from Streptomyces griseus, also described as "Pronase"?

    1 回答
    1. "Pronase E" is the name given to a group of proteolytic enzymes produced by Streptomyces griseus K-1. At least 10 proteases are in the mixture, five serine-type proteases, two zinc endopeptidases, two zinc leucine aminopeptidases, and one zinc carboxypeptidase.

      役に立ちましたか?

  4. Does Product P5147, Protease from Streptomyces griseus, contain calcium acetate?

    1 回答
    1. This product contains calcium acetate buffer salt. The amount of calcium acetate present will vary for each lot number and has been observed to range from 2 - 30% (w/w).

      役に立ちましたか?

  5. How should Product P5147, Protease from Streptomyces griseus, be reconstituted and how should a stock solution be prepared?

    1 回答
    1. This product can be dissolved in 0.01 M sodium acetate with 0.005 M calcium acetate at pH 7.5 at 37°C; at 0.2 mg/mL, this yields a clear solution which ranges from colorless to light tan. Calcium ion is recommended for protection from autolysis. The activity of a dilute enzyme solution containing 0.01 to 0.1 M calcium ion was stable over 24 hours at neutral pH at 2-8°C.  Pronase E is stable at 4°C for at least six months.  Stock solutions of 5 to 20 mg/mL in water are usually stored at -20°C.

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  6. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 回答
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

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