This product is prepared by adding 50 µL of the reconstitution solution to the 250 µg package or 30 µL of the reconstitution solution to the 50 µg. The reconstitution solution is 50% glycerol in water. A prepared stock solution may be stored at -20°C. The dilution buffer is 20 mM Na-Hepes pH 7.5, 200 with mM NaCl. Please see the link below to review the full product datasheet:
https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/138/442/cas9d10aprbul.pdf
おすすめの製品
関連するカテゴリー
詳細
Streptococcus pyogenes由来のリコンビナントタンパク質Cas9-D10Aニッカーゼ（約160 Kd）は調製不要のゲノム編集用試薬です。S. pyogenes由来Cas9-D10Aニッカーゼは、標的特異的なpgRNAと併用すると、培養細胞のトランスフェクションや、一細胞胚注入による遺伝子改変動物の迅速作製に適した標的ヌクレアーゼとして機能します。
Cas9（CRISPR（clustered regularly interspaced short palindromic repeats）関連タンパク質-9ヌクレアーゼ）ニッカーゼは、RuvCとHNHという2つのヌクレアーゼドメインで二重鎖を切断します。[1]
アプリケーション
機能ゲノミクス／標的バリデーション／ゲノム編集
特徴および利点
- 高特異性
- 高活性
- 注入／トランスフェクトにすぐ使用できます
包装
50 gパッケージ（300 pmol以上）
250 gパッケージ（1500 pmol以上）
250 gパッケージ（1500 pmol以上）
構成
各キットの内容：
- リコンビナントタンパク質Cas9-D10Aニッカーゼ 1バイアル
- 1 mLの1倍希釈バッファー 1バイアル
- 1 mLのグリセロール含有ヌクレアーゼフリー水 1バイアル
原理
CRISPR/Casシステムは、細菌や古細菌に備わるウイルスやプラスミドの侵入に対する防御機構です。近年、細菌Streptococcus pyogenes由来のII型CRISPR/Casシステムが、単一のCas9タンパク質と非コーディングガイドRNA（gRNA）の2つの分子成分を用いて真核生物系で機能するように設計されました。Cas9エンドヌクレアーゼは、gRNAでプログラムすることができ、目的のゲノム位置でDNA二本鎖切断（DSB）を誘導します。Znフィンガーヌクレアーゼ（ZFN）によって誘導されるDSBと同様に、細胞は内因性DNA修復プロセス［非相同末端結合（NHEJ）または相同性指向修復（HDR）］を活性化して、標的とされたDSBを修復します。
再構成
凍結乾燥したS. pyogenes Cas9-D10Aニッカーゼタンパク質は、希望する濃度になるまで溶解液に再懸濁してください。チューブを穏やかに叩いて凍結乾燥粉末を完全に溶解させ、氷上で10分間インキュベートし、チューブを遠心して材料をチューブの底に移動させます。
その他情報
gRNAの注文には、弊社のCRISPR選択ツールをご使用ください
弊社の他のMISSION® Cas9タンパク質につきましては、SigmaAldrich.com/CRISPRproteinsをご覧ください
製品については、最近bioRxivに投稿した弊社の論文Highly efficient and specific genome editing in human cells with paired CRISPR-Cas9 nickase ribonucleoproteinsをご参照ください
弊社の他のMISSION® Cas9タンパク質につきましては、SigmaAldrich.com/CRISPRproteinsをご覧ください
製品については、最近bioRxivに投稿した弊社の論文Highly efficient and specific genome editing in human cells with paired CRISPR-Cas9 nickase ribonucleoproteinsをご参照ください
保管分類コード
11 - Combustible Solids
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
毒物及び劇物取締法
キットコンポーネントの情報を参照してください
PRTR
キットコンポーネントの情報を参照してください
消防法
キットコンポーネントの情報を参照してください
労働安全衛生法名称等を表示すべき危険物及び有害物
キットコンポーネントの情報を参照してください
労働安全衛生法名称等を通知すべき危険物及び有害物
キットコンポーネントの情報を参照してください
カルタヘナ法
キットコンポーネントの情報を参照してください
Jan Code
キットコンポーネントの情報を参照してください
最新バージョンのいずれかを選択してください：
試験成績書（COA）
Lot/Batch Number
この製品を見ている人はこちらもチェック
Stem Cell Genetics for Biomedical Research: Past, Present, and Future, 376-376 (2018)
プロトコル
Guaranteed PURedit™ CRISPR synthetic gRNAs and Cas9 protein offer industry-leading on-site cutting and specificity
Combine guaranteed sgRNAs with our comprehensive range of CRISPR products and tools, including Cas9 and delivery reagents, for efficient genome modification with higher specificity.
-
What is the reconstitution protocol for the Cas9D10A protein? What is the difference between dilution buffer and reconstitution buffer?
1 回答-
役に立ちましたか？
-
アクティブなフィルタ
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
製品に関するお問い合わせはこちら（テクニカルサービス）
