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詳細
免疫組織細胞化学において、光学顕微鏡により、単一細胞レベルでアポトーシス細胞を検出および定量するためのキット。
アプリケーション
特徴および利点
高感度:アポトーシス細胞の標識化(細胞染色)の最大強度は、ニックトランスレーション法よりも高くなります。
迅速:フルオレセイン-dUTPの使用により、TUNEL反応の後、二次検出システムの添加前に、サンプルを直接分析できます。
簡便:フルオレセイン-dUTPを使用する直接標識により、アッセイ手順におけるTUNEL反応の効率が検証できます。
正確:分子レベル(DNA鎖切断)でアポトーシスを同定、およびアポトーシスの初期の段階で細胞を同定。
柔軟:基質は含まれていません。染色における選択の機会を提供します。
迅速:フルオレセイン-dUTPの使用により、TUNEL反応の後、二次検出システムの添加前に、サンプルを直接分析できます。
簡便:フルオレセイン-dUTPを使用する直接標識により、アッセイ手順におけるTUNEL反応の効率が検証できます。
正確:分子レベル(DNA鎖切断)でアポトーシスを同定、およびアポトーシスの初期の段階で細胞を同定。
柔軟:基質は含まれていません。染色における選択の機会を提供します。
包装
1つのキットには3つのコンポーネントが含まれています。
原理
In Situ細胞死検出キットPODは、アポトーシスの初期段階で起こる一重および二重鎖DNAの切断を検出します。
アポトーシス細胞は固定化され、透過処理されます。次に細胞はTdTおよびフルオロセイン-dUTPを含むTUNEL反応混合物とともにインキュベートされます。このインキュベーション中に、TdTは、一重および二重鎖DNAの3′末端への、フルオレセイン-dUTPの付加を触媒します。洗浄後、DNAの損傷部位に取り込まれたラベルは、レポーター酵素であるペルオキシダーゼが結合した抗フルオレセイン抗体によって検出されます。未結合の酵素コンジュゲートを洗浄除去した後、免疫複合体中に保持されるPODは、基質との反応によって可視化されます。
アポトーシス細胞は固定化され、透過処理されます。次に細胞はTdTおよびフルオロセイン-dUTPを含むTUNEL反応混合物とともにインキュベートされます。このインキュベーション中に、TdTは、一重および二重鎖DNAの3′末端への、フルオレセイン-dUTPの付加を触媒します。洗浄後、DNAの損傷部位に取り込まれたラベルは、レポーター酵素であるペルオキシダーゼが結合した抗フルオレセイン抗体によって検出されます。未結合の酵素コンジュゲートを洗浄除去した後、免疫複合体中に保持されるPODは、基質との反応によって可視化されます。
調製ノート
保管条件(使用液):TUNEL反応混合物
TUNEL反応混合物は、使用直前に調製し、保存しないでください。TUNEL反応混合物は、使用するまで氷上に置いてください。
コンバーター-ペルオキシダーゼ
コンバーター-ペルオキシダーゼ溶液は、融解後、2~8°Cで保管してください(最大で6ヶ月安定)。
注意:冷凍しないでください。
サンプル材料:サイトスピンおよび細胞スメア調製物、スライド上の培養接着細胞、冷凍およびパラフィン包埋組織切片。
TUNEL反応混合物は、使用直前に調製し、保存しないでください。TUNEL反応混合物は、使用するまで氷上に置いてください。
コンバーター-ペルオキシダーゼ
コンバーター-ペルオキシダーゼ溶液は、融解後、2~8°Cで保管してください(最大で6ヶ月安定)。
注意:冷凍しないでください。
サンプル材料:サイトスピンおよび細胞スメア調製物、スライド上の培養接着細胞、冷凍およびパラフィン包埋組織切片。
キットの構成要素のみ
製品番号
詳細
- Enzyme Solution (TdT)
- Label Solution (fluorescein-dUTP)
- Converter Peroxidase (anti-fluorescein antibody-peroxidase) ready-to-use
シグナルワード
Danger
危険有害性情報
危険有害性の分類
Aquatic Chronic 2 - Carc. 1B Inhalation - Skin Sens. 1
保管分類コード
6.1D - Non-combustible acute toxic Cat.3 / toxic hazardous materials or hazardous materials causing chronic effects
WGK
WGK 3
引火点(°F)
does not flash
引火点(℃)
does not flash
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資料
Cellular apoptosis assays to detect programmed cell death using Annexin V, Caspase and TUNEL DNA fragmentation assays.
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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