11684817910
Roche
Kit di rilevamento della morte cellulare in situ, POD
sufficient for ≤50 tests
Sinonimo/i:
morte cellulare
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About This Item
Codice UNSPSC:
12352200
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Prodotti consigliati
impiego
sufficient for ≤50 tests
Livello qualitativo
Produttore/marchio commerciale
Roche
tecniche
immunohistochemistry: suitable
Temperatura di conservazione
−20°C
Categorie correlate
Descrizione generale
Kit per il rilevamento e la quantificazione della morte cellulare apoptotica a livello di singola cellula mediante microscopio ottico in immunoistocitochimica.
Applicazioni
Il kit per il rilevamento della morte cellulare in situ con POD utilizza una tecnica non radioattiva precisa, veloce e semplice che permette di identificare e quantificare la morte cellulare apoptotica nelle cellule e nei tessuti a livello di singola cellula. Pertanto, il kit per il rilevamento della morte cellulare in situ può essere utilizzato con molti sistemi di analisi diversi.
- Alcuni esempi sono: rilevamento di singole cellule apoptotiche in sezioni di tessuti congelate incluse in paraffina e fissate in formalina nella ricerca di base e nella patologia di routine[1][2]
- determinazione della sensibilità delle cellule maligne all′apoptosi indotta da farmaci nella ricerca sul cancro e in oncologia clinica[3]
- tipizzazione delle cellule in fase di morte cellulare in popolazioni eterogenee mediante procedure di doppia colorazione
Caratteristiche e vantaggi
Sensibile: la massima intensità della marcatura (colorazione cellulare) delle cellule apoptotiche è superiore a quella ottenuta con il metodo della nick translation.
Rapido: l′uso della fluoresceina-dUTP consente l′analisi dei campioni direttamente dopo la reazione TUNEL, prima dell′aggiunta del sistema di rilevamento secondario.
Pratico: la procedura di marcatura diretta che utilizza la fluoresceina-dUTP consente la verifica dell′efficienza della reazione TUNEL durante la procedura del saggio.
Accurato: identificazione dell′apoptosi a livello molecolare (rotture del filamento di DNA) e identificazione delle cellule nelle primissime fasi dell′apoptosi.
Versatile: nessun substrato incluso; offre la possibilità di scegliere la procedura di partenza preferita.
Rapido: l′uso della fluoresceina-dUTP consente l′analisi dei campioni direttamente dopo la reazione TUNEL, prima dell′aggiunta del sistema di rilevamento secondario.
Pratico: la procedura di marcatura diretta che utilizza la fluoresceina-dUTP consente la verifica dell′efficienza della reazione TUNEL durante la procedura del saggio.
Accurato: identificazione dell′apoptosi a livello molecolare (rotture del filamento di DNA) e identificazione delle cellule nelle primissime fasi dell′apoptosi.
Versatile: nessun substrato incluso; offre la possibilità di scegliere la procedura di partenza preferita.
Confezionamento
1 kit contenente 3 componenti.
Principio
Il kit per il rilevamento della morte cellulare in situ con POD si basa sull′identificazione delle interruzioni del DNA a singolo e doppio filamento che si verificano nelle fasi iniziali dell′apoptosi.
Le cellule apoptotiche vengono fissate e permeabilizzate. In seguito, le cellule vengono incubate con la miscela di reazione TUNEL che contiene TdT e fluoresceina-dUTP. Durante questo periodo di incubazione, la TdT catalizza l′aggiunta della fluoresceina-dUTP in corrispondenza dei gruppi 3′-OH liberi nel DNA a singolo e doppio filamento. Dopo il lavaggio, la marcatura incorporata nei siti danneggiati del DNA viene contrassegnata da un anticorpo anti-fluoresceina coniugato con l′enzima reporter perossidasi. Dopo il lavaggio per rimuovere il coniugato enzimatico non legato, la POD trattenuta nell′immunocomplesso viene visualizzata tramite una reazione del substrato.
Le cellule apoptotiche vengono fissate e permeabilizzate. In seguito, le cellule vengono incubate con la miscela di reazione TUNEL che contiene TdT e fluoresceina-dUTP. Durante questo periodo di incubazione, la TdT catalizza l′aggiunta della fluoresceina-dUTP in corrispondenza dei gruppi 3′-OH liberi nel DNA a singolo e doppio filamento. Dopo il lavaggio, la marcatura incorporata nei siti danneggiati del DNA viene contrassegnata da un anticorpo anti-fluoresceina coniugato con l′enzima reporter perossidasi. Dopo il lavaggio per rimuovere il coniugato enzimatico non legato, la POD trattenuta nell′immunocomplesso viene visualizzata tramite una reazione del substrato.
Nota sulla preparazione
Condizioni di stoccaggio (soluzione di lavoro): Miscela di reazione TUNEL
La miscela di reazione TUNEL deve essere preparata subito prima dell′uso e non può essere conservata. Conservare le miscela di reazione TUNEL su ghiaccio fino al momento di utilizzo.
Perossidasi per conversione
Una volta scongelata, la soluzione di conversione con perossidasi deve essere conservata a 2-8 °C (stabilità massima per 6 mesi).
Nota: non congelare.
Materiale dei campioni: preparati per strisci cellulari e cytospin, cellule aderenti coltivate su vetrini, sezioni di tessuti congelate e incluse in paraffina.
La miscela di reazione TUNEL deve essere preparata subito prima dell′uso e non può essere conservata. Conservare le miscela di reazione TUNEL su ghiaccio fino al momento di utilizzo.
Perossidasi per conversione
Una volta scongelata, la soluzione di conversione con perossidasi deve essere conservata a 2-8 °C (stabilità massima per 6 mesi).
Nota: non congelare.
Materiale dei campioni: preparati per strisci cellulari e cytospin, cellule aderenti coltivate su vetrini, sezioni di tessuti congelate e incluse in paraffina.
Solo come componenti del kit
N° Catalogo
Descrizione
- Enzyme Solution (TdT)
- Label Solution (fluorescein-dUTP)
- Converter Peroxidase (anti-fluorescein antibody-peroxidase) ready-to-use
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Classi di pericolo
Aquatic Chronic 2 - Carc. 1B Inhalation - Skin Sens. 1
Codice della classe di stoccaggio
6.1D - Non-combustible acute toxic Cat.3 / toxic hazardous materials or hazardous materials causing chronic effects
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 3
Punto d’infiammabilità (°F)
does not flash
Punto d’infiammabilità (°C)
does not flash
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